Journal of Mazandaran University of Medical Sciences

fa ارزیابی مقایسه‌ای روش‌های میکروسکوپی و مولکولی برای تشخیص لیشمانیوز پوستی در دو کانون اندمیک در شمال و مرکز ایران، طی سال‌های۱۴۰۴ –۱۴۰۳ Comparative Evaluation of Microscopic and Molecular Methods for the Diagnosis of Cutaneous Leishmaniasis in Two Endemic Foci in Northern and Central Iran, 2024-2026 انگل شناسي parasitology پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف: بیماری لیشمانیوز پوستی یک بیماری انگلی مهم و اندمیک در بسیاری از مناطق ایران است. اگر چه بررسی مستقیم میکروسکوپی به‌طور گسترده برای تشخیص این بیماری مورد استفاده قرار می‌گیرد، اما حساسیت آن ممکن است در نمونه‌هایی با بار انگلی پایین محدود باشد. این مطالعه با هدف شناسایی عفونت Leishmania با استفاده از بررسی مستقیم میکروسکوپی و Conventional PCR در بیماران مشکوک به لیشمانیوز پوستی در دو کانون اندمیک در شمال و مرکز ایران، انجام پذیرفت. مواد و روش ‌ها: این مطالعه مقایسه‌ای-مقطعی، از مهر ماه ۱۴۰۳ تا پایان دی‌ ماه ۱۴۰۴ بر روی ۱۱۰ فرد مشکوک به لیشمانیوز پوستی مراجعه‌ کننده به مراکز درمانی استان‌های گلستان و سمنان انجام شد. اطلاعات دموگرافیک و بالینی از طریق پرسشنامه ثبت و از ضایعات پوستی نمونه‌برداری شد. بررسی میکروسکوپی با رنگ‌آمیزی گیمسا و درجه‌بندی بار انگلی مطابق پروتکل سازمان بهداشت جهانی انجام شد. استخراج DNA به روش فنل-کلروفرم-ایزوآمیل الکل و شناسایی مولکولی با استفاده از (Conventional Polymerase Chain Reaction ) Conventional PCR و پرایمرهای LITSR/L5.8S صورت گرفت. تحلیل آماری با نرم‌افزار SPSS نسخه ۲۰ انجام شد. یافته‌ها: از مجموع ۱۱۰ نمونه، ۹۷ مورد (88/2 درصد) با PCR و ۸۳ مورد (75/5 درصد) با بررسی میکروسکوپی مستقیم مثبت شدند. میزان توافق بین دو روش 87/3 درصد و ضریب کاپای کوهن 0/58 (توافق متوسط) بود. سابقه درمان با گلوکانتیم با نتیجه هر دو روش تشخیصی ارتباط آماری معنی‌داری داشت(0/001 P<). سن، جنسیت، محل سکونت و محل ضایعه با نتایج هیچ کدام از دو روش تشخیصی ارتباط آماری معنی‌داری نداشتند. بیش‌ترین فراوانی ضایعات مربوط به دست‌ها (49/1 درصد) بود. استنتاج: PCR  Conventionalدر مقایسه با میکروسکوپی، موارد بیش‌تری از عفونت مشکوک به لیشمانیوز پوستی را شناسایی کرد. استفاده همزمان از روش‌های مولکولی و میکروسکوپی می‌تواند به بهبود شناسایی عفونت لیشمانیا در مناطق اندمیک ایران کمک کند. Background and purpose: Cutaneous leishmaniasis (CL) is an important endemic parasitic disease in several regions of Iran. Although direct microscopy is widely used for diagnosis, its sensitivity may be limited, particularly in specimens with low parasite loads. This study aimed to compare the detection of Leishmania infection by direct microscopic examination and conventional polymerase chain reaction (PCR) in patients with suspected CL from two endemic foci in northern and central Iran. Materials and methods: This comparative cross-sectional study was conducted between October 2024 and January 2026 and included 110 individuals with suspected cutaneous leishmaniasis attending healthcare centers in Golestan and Semnan Provinces. Demographic and clinical data were collected using a questionnaire, and samples were obtained from skin lesions. Microscopic examination was performed using Giemsa staining, and parasite load was graded according to the World Health Organization protocol. DNA was extracted using the phenol-chloroform-isoamyl alcohol method, and Leishmania DNA was detected by conventional PCR using the LITSR/L5.8S primer pair. Statistical analyses were performed using SPSS version 20. Results: Of the 110 samples, 97 (88.2%) were PCR-positive, compared with 83 (75.5%) that were positive by direct microscopic examination. The overall agreement between the two methods was 87.3%, with a Cohen's kappa coefficient of 0.58, indicating moderate agreement. A significant association was found between a history of previous treatment with Glucantime and the results of both diagnostic methods (P < 0.001). In contrast, age, sex, place of residence and lesion site were not significantly associated with the diagnostic results. The hands were the most frequently affected site, accounting for 49.1% of lesions. Conclusion: Conventional PCR detected a higher proportion of positive cases than direct microscopy among patients with suspected cutaneous leishmaniasis. Using molecular and microscopic methods in combination may improve the laboratory detection of CL, particularly in endemic regions of Iran.   لیشمانیوز پوستی, واکنش زنجیره ای پلیمر, روش میکروسکوپی, ITS1 cutaneous leishmaniasis, polymerase chain reaction, microscopic examination, ITS1 112 123 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-19810-1&slc_lang=fa&sid=1 Hajar Ziaei Hezarjaribi هاجر ضیایی هزارجریبی ziaei2000@yahoo.com No Professor, Department of Medical Parasitology, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran استاد،گروه انگل شناسی پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Amirmohammad Fallahi Lima امیرمحمد فلاحی لیما amirlimaaa9@gmail.com Yes MSc in Medical Parasitology,Toxoplasmosis Research Center, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran کارشناسی ارشد انگل شناسی پزشکی، مرکز تحقیقاتی توکسوپلاسموز، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Shakiba Afsharzadeh شکیبا افشارزاده afsharzades@gmail.com No PharmD Student, Student Research Committee, School of Pharmacy, Semnan University of Medical Sciences, Semnan, Iran دانشجوی داروسازی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی سمنان، سمنان، ایران Hedieh Hatamipour هدیه حاتمی پور Hedi.hatami@gmail.com No MSc, Student Research Committee, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran کارشناسی ارشد، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران