Journal of Mazandaran University of Medical Sciences

fa فراوانی ژن‌های منتخب بتالاکتاماز وسیع‌الطیف کلاس A در ایزوله‌های مقاوم به چندداروی سودوموناس آئروژینوزا و آسینتوباکتر بومانی در بیمارستانهای آموزشی-درمانی مازندران Prevalence of Selected Class A Extended-Spectrum Beta-Lactamase Genes in Multidrug-Resistant Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii Isolates from Teaching Hospitals in Mazandaran, Iran ميکروبيولوژي Microbiology پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف: بتالاکتامازهای وسیع‌الطیف (ESBLs) کلاس A مهم‌ترین مکانیسم مقاومت به سفالوسپورین‌های نسل سوم و چهارم و مونوباکتام‌ها در سودوموناس آئروژینوزا و آسینتوباکتر بومانی هستند. این مطالعه با هدف تعیین فراوانی ژن‌های blaTEM، blaSHV، blaCTX-M، blaPER، blaVEB و blaGES در ۲۰ ایزوله مقاوم به چنددارو (MDR) سودوموناس آئروژینوزا و ۲۰ ایزوله MDR آسینتوباکتر بومانی جدا‌شده از بیمارستان‌های آموزشی- درمانی دانشگاه علوم پزشکی مازندران انجام شد. مواد و روش ‌ها: ایزوله‌های بالینی از بیمارستان‌های آموزشی- درمانی استان مازندران جمع‌آوری و با استفاده از آزمون‌های استاندارد میکروبیولوژیک و بیوشیمیایی تعیین هویت شدند. الگوی حساسیت آنتی‌بیوتیکی ایزوله‌ها به روش دیسک آگار دیفیوژن و بر اساس دستورالعمل CLSI تعیین شد. سپس، DNA ژنومی با روش لیز قلیایی و جوشاندن استخراج شد و حضور ژن‌های هدف با استفاده از واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) با پرایمرهای اختصاصی بررسی شد. داده‌ها با استفاده از نرم‌افزار SPSS و آزمون دقیق فیشر تحلیل شدند. یافته‌ها: تمامی ایزوله‌های مورد مطالعه (۱۰۰ درصد) دارای فنوتیپ MDR بودند. در ایزوله‌های سودوموناس آئروژینوزا، ژن blaCTX-M با فراوانی ۱۰۰ درصد شایع‌ترین ژن بود و ژن‌های blaPER (۹۰ درصد)، blaGES (۹۰ درصد)، blaVEB (۸۵ درصد)، blaSHV (۳۵ درصد) و blaTEM (۵ درصد) در رتبه‌های بعدی قرار داشتند. در ایزوله‌های آسینتوباکتر بومانی، ژن blaSHV با فراوانی(80 درصد) شایع‌ترین بود و ژن‌های blaTEM (25 درصد)، blaPER (60 درصد)، blaVEB (20 درصد)، blaCTX-M (15 درصد) و blaGES (10 درصد) شناسایی شدند. استنتاج: فراوانی بالای ژن‌های ESBL کلاس A در ایزوله‌های MDR این دو پاتوژن مهم، به ویژه فراوانی غالب blaCTX-M در سودوموناس آئروژینوزا و blaSHV در آسینتوباکتر بومانی، نشان‌دهنده فشار انتخابی شدید احتمالی ناشی از مصرف گسترده آنتی‌بیوتیک‌های بتالاکتام در منطقه است. حضور هم زمان چندین ژن مقاومت در یک ایزوله، خطر ظهور سویه‌های با مقاومت گسترده را افزایش می‌دهد. اجرای برنامه‌های مدیریت مصرف آنتی‌بیوتیک و پایش مداوم مولکولی ژن‌های مقاومت برای کنترل انتشار این سویه‌ها ضروری به نظر می‌رسد. Background and purpose: Class A extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) are a major mechanism of resistance to third- and fourth-generation cephalosporins and monobactams among Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii. This study aimed to determine the prevalence of blaTEM, blaSHV, blaCTX-M, blaPER, blaVEB, and blaGES genes in 20 multidrug-resistant (MDR) P. aeruginosa and 20 MDR A. baumannii clinical isolates obtained from teaching hospitals affiliated with Mazandaran University of Medical Sciences. Materials and methods: Clinical isolates were collected from teaching hospitals in Mazandaran province and identified using standard microbiological and biochemical tests. The antimicrobial susceptibility of the isolates to beta-lactams (piperacillin, aztreonam, ceftazidime, cefepime, imipenem, and meropenem) was determined using the disk diffusion method in accordance with CLSI guidelines. Genomic DNA was extracted using alkaline lysis and boiling, and the presence of the target genes was investigated using polymerase chain reaction (PCR) with specific primers. Data were analyzed using SPSS software and Fisher's exact test. Results: All isolates (100%) exhibited an MDR phenotype. In P. aeruginosa isolates, the blaCTX-M gene was the most prevalent (100%), followed by blaPER (90%), blaGES (90%), blaVEB (85%), blaSHV (35%), and blaTEM (5%). In A. baumannii isolates, the blaSHV gene was the most frequent (80%), followed by blaTEM (25%), blaPER (60%), blaVEB (20%), blaCTX-M (15%), and blaGES (10%). Conclusion: The high prevalence of class A ESBL genes in MDR isolates of these two important pathogens, particularly the high prevalence of blaCTX-M in P. aeruginosa and blaSHV in A. baumannii, indicates substantial selective pressure associated with the widespread use of beta-lactam antibiotics in the region. The concurrent presence of multiple resistance genes within a single isolate may increase the risk of the emergence of extensively drug-resistant (XDR) strains. Therefore, antibiotic stewardship and continuous molecular surveillance of resistance genes are essential for controlling the spread of these strains.   سودوموناس آئروژینوزا؛ آسینتوباکتر بومانی؛ بتالاکتامازهای وسیع‌الطیف (ESBL)؛ مقاومت چنددارویی (MDR)؛ ژن‌های بتالاکتاماز کلاس A؛ ایران Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii, extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs), multidrug-resistant (MDR), Class A beta-lactamase genes, Iran 76 89 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-19821-1&slc_lang=fa&sid=1 Zahra Salari Telmadareh زهرا سالاری تلمادره No PhD Student, Department of Biology, QaS.C., Islamic Azad University, Qaemshahr, Iran دانشجوی دکتری، گروه زیست شناسی، واحد قائمشهر، دانشگاه آزاد اسلامی، قائمشهر، ایران Simin Arian سیمین آرین Yes Assistant Professor, Department of Microbiology, To.C., Islamic Azad University, Tonekabon, Iran استادیار، گروه میکروبیولوژی، واحد تنکابن، دانشگاه آزاد اسلامی، تنکابن، ایران Abbas Ali Dehpour عباسعلی دهپور No Associate Professor, Department of Biology, QaS.C, Islamic Azad University, Qaemshahr, Iran دانشیار، گروه زیست شناسی، واحد قائمشهر، دانشگاه آزاد اسلامی، قائمشهر، ایران Babak Sadeghi بابک صادقی No Associate Professor, Department of Chemistry, To.C., Islamic Azad University, Tonekabon, Iran دانشیار، گروه شیمی، واحد تنکابن، دانشگاه آزاد اسلامی، تنکابن، ایران Esmaeil Ghorbanalinezhad اسمعیل قربانعلی نژاد No Assistant Professor, Department of Microbiology, To.C., Islamic Azad University, Tonekabon, Iran استادیار، گروه میکروبیولوژی، واحد تنکابن، دانشگاه آزاد اسلامی، تنکابن، ایران