TY - JOUR T1 - Comparing Fluorescent Loop-Mediated Isothermal Amplification and PCR in Detecting Salmonella TT - مقایسه دو روش LAMP فلورسنت و PCR در تشخیص مولکولی سالمونلا JF - J-Mazand-Univ-Med-Sci JO - J-Mazand-Univ-Med-Sci VL - 22 IS - 95 UR - http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-1541-fa.html Y1 - 2012 SP - 48 EP - 55 KW - Salmonella KW - PCR KW - LAMP KW - Fluorescent Probe N2 - سابقه و هدف: باکتری سالمونلا یکی ازاعضاء خانواده انتروباکتریاسه بوده که باعث ایجاد بیماری‌های عفونی در انسان و حیوان می‌گردد. از جمله بیماری‌های ایجاد شده می‌توان به تب روده‌ای (تیفوئید)، باکتریمی، انتروکولیت، سالمونلوز اشاره نمودکه خود یک معضل بهداشتی محسوب می‌گردد. بنابراین تشخیص سریع، دقیق، مطمئن و به موقع آن برای جلوگیری از اپیدمی و عوارض مخرب این باکتری ضروری به نظر می‌رسد. مواد و روش‌ها: روش‌های مختلفی جهــت تشخیص باکتـری سالــمونلا وجود دارد از ان جمله می‌تــوان به روش کشت، Immuno assay، PCR و Real-time PCR اشاره نمود که تمام این روش‌ها به زمان طولانی وتعداد زیاد باکتری در نمونه اولیه و تجهیزات گران قیمت آزمایشگاهی و افراد متخصص در این زمینه نیاز دارند به همین دلیل در این مطالعه روشی به‌کار گرفته شد که معایب روش‌های پیشین را به حداقل برساند در این روش از تکثیر تک دمایی وابسته به حلقه یا LAMP (Loop–Meadiated iso thermal Amplification of DNA) همراه با دو پروب فلورسنت استفاده گردید واین روش با PCR که در حال حاضر متداول‌ترین تکنیک تکثیر DNA می‌باشد و روش LAMP مقایسه شد. یافته‌ها: در این مطالعه از 4 سویه سالمونلا جهت انجام PCR، LAMP و LAMP by Using florescent Prob استفاده گردید که طی انجام PCR جهت شناسایی سالمونلا بالغ بر 3 ساعت روش LAMP تقریباً 2 ساعت زمان صرف گردید که این زمان در روش LAMP by Using florescent Prob به 70 دقیقه کاهش یافت با توجه به این‌که کاهش زمانی همراه با افزایش دقت و اختصاصیت در تعیین جواب‌های مثبت می‌باشد لذا از اهمیت ویژه‌ای برخوردار است. استنتاج: براساس نتایج به دست آمده روش LAMP by Using florescent Prob جهت شناسایی سالمونلا روش تشخیصی مولکولی سریع‌تر، دقیق‌تر و با اختصاصیت بالاتر وکاربردی گسترده‌تر در آزمایشگاه تشخیص پزشکی، پزشکی قانونی، کشاورزی وتحقیقاتی می‌باشد. مزایای این روش عدم نیاز به چرخه‌های دمایی و دستگاه ترموسایکلر نسبت به روش PCR و استفاده از یک ماده نشاندار در تعیین جواب‌های مثبت در مقایسه با روش LAMP این امکان را می‌دهد که تفسیر نتایج از اطمینان و دقت بیشتری برخوردار باشد. M3 ER -