TY - JOUR T1 - Induction of Continuous Expression of Cyclooxygenase -2 in Human Breast Cancer Cell Line Using COX-2 cDNA Plasmid Transfection TT - القاء بیان مداوم سیکلواکسیژناز-2 در رده سلولی سرطان سینه از طریق ترانسفکشن آن ها با پلاسمید pSG5-COX-2 JF - J-Mazand-Univ-Med-Sci JO - J-Mazand-Univ-Med-Sci VL - 27 IS - 154 UR - http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-6605-fa.html Y1 - 2017 SP - 38 EP - 50 KW - multidrug resistance KW - COX-2 KW - MCF7 cell line N2 - سابقه و هدف: یکی از مشکلات عمده مربوط به شیمی‌درمانی، بروز مقاومت در برابر داروهای ضد سرطان است. گزارش‌های اخیر، وجود ارتباط میان بروز سیکلواکسیژناز- 2 (COX-2) (Cyclooxygenase-2) و توسعه فنوتیپ مقاومت چند دارویی (MDR) (Multidrug resistance) را نشان داده‌اند. COX-2 به طور مداوم در سلول‌ها بیان نمی‌شود، بلکه بیان آن توسط سیگنال‌های التهابی، فاکتورهای رشد و سیتوکین‌ها در محل التهاب القاء می‌شود. جهت بررسی ارتباط میان بیان COX-2 و ترانسپورترهای MDR در شرایط in vitro به سلول‌هایی نیاز است که این پروتئین را به صورت مداوم بیان کنند. این مطالعه با هدف القاء بیان مداوم COX-2 در رده سلولی سرطان پستان انسان MCF7 و MCF7/MX انجام گرفت. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، پلاسمید حاوی توالی COX-2 در سلول های باکتری اشرشیا کولی کلون شد، سپس پلاسمید خالص سازی شده توسط فرآیند لیپوفکشن با کمک معرف فیوژن 6 به رده سلولی MCF7 و MCF7/MX انتقال یافت. در آخر محتوی پروتئینی به دست آمده از سلول‌های ترانسفکت شده طی فرآیند وسترن بلات جداسازی و بیان پروتئین COX-2 در آن‌ها مورد بررسی قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج نشان داد که سلول‌های MCF7 ترانسفکت شده‌ای که نسبت حجم فیوژن 6 به DNA در آن‌ها 3:1 است و محیط حاوی جنتیسین 24 ساعت بعد از پاساژ به آن‌ها افزوده شده است، بیش‌ترین میزان بیان پروتئین COX-2 را داشت. هم‌چنین در سلول‌های MCF7/MX نیز بیان COX-2 در سلول‌های ترانسفکت شده‌ای که نسبت حجم فیوژن 6 به DNA در آن‌ها 3:2 بود، نسبت به کنترل افزایش یافت (P<0.05). استنتاج: در حقیقت سطح بیان ژن مورد نظر بسته به رده سلولی و شرایط کشت متفاوت است و افزایش میزان DNA لزوما منجر به افزایش کارایی ترانسفکشن نمی‌شود. M3 ER -