fa تاثیر تک لایه های قطبی و غیر قطبی سلول های پوششی لوله رحم انسان بر تکوین جنین های دو سلولی موش پژوهشي-کامل Research(Original) <div style="text-align: justify direction: rtl"> <span style="font-weight: bold">سابقه و هدف:</span> بهبود رشد و تکوین جنین پستانداران در محیط ازمایشگاهی همواره مورد توجه بوده و در این ارتباط کارایی سیستم های هم کشتی جنین با سلول های سوماتیک به اثبات رسیده است. در مطالعه حاضر سیستم هم کشتی ویژه ای که در آن سلول های پوششی لوله رحم به حالت قطبی کشت شده است، مورد مطالعه قرار گرفته است.<br><span style="font-weight: bold">مواد و روش ها</span>: نمونه های لوله رحم انسانی از بیماران تحت عمل برداشت رحم (hysterectomy) تهیه شد و سلول های پوششی آن به روش آنزیمی جدا گردید و بر روی سطوح پلاستیک (به حالت غیر قطبی) و ژل ECM (به حالت قطبی) کشت گردید. ماهیت پوششی سلول ها با روش ایمنی بافتی - شیمیایی و قطبی بودن آنها با روش میکروسکوپ الکترونی (Transmission Electron Microscopy) تایید شد. آنگاه جنین های دو سلولی موش NMRI به روش Flushing تهیه شد و سیستم های هم کشتی آن با سلول های کشت یافته بر روی پلاستیک (غیر قطبی) و ژل ECM (قطبی) ایجاد گردید. رشد و تکوین جنین ها به طور روزانه و به مدت 96 ساعت در فرم های ویژه ای ثبت گردید و نتایج حاصل با روش آماری X2 آنالیز شد در انتهای دوره کشت تعدادی بلاستوسیست از گروه های مختلف به روش افتراقی به منظور شمارش سلولی رنگ آمیزی گردید و نتایج آن با استفاده از آزمون One-way ANOVA مورد مقایسه قرار گرفت.<br><span style="font-weight: bold">یافته ها:</span> نتایج ایمنی - بافتی - شیمیایی نشانگر ماهیت پوششی سلول های کشت یافته بود. مقاطع میکروسکوپ الکترونی قطبی بودن کامل سلول های کشت یافته بر روی ژل ECM را تایید کرد. این سلول ها استوانه ای شکل بوده و بر روی غشا پایه قرار داشتند و کمپلس اتصالی (به ویژه اتصال محکم) تشکیل شده بود؛ در حالی که سلول های کشت یافته بر روی پلاستیک (غیر قطبی) دوکی شکل بودند و اتصال شبه دسموزوم بین آن ها بر قرار بود. نتایج رشد و تکوین نشان داد که در تمام مدت 96 ساعت دوره کشت،‌ جنین های سیستم های هم کشتی در مقایسه با گروه شاهد تکوین بهتری دارند. مقایسه سیستم قطبی با غیر قطبی نشان داد که سیستم قطبی از لحاظ درصد تشکیل بلاستوسیست تفاوت معنی داری با غیر قطبی ندارد. نکته حایز اهمیت پر سلول بودن بلاستوسیست های سیستم قطبی نسبت به غیر قطبی بود و از این لحاظ دو سیستم تفاوت معنی داری داشتند.<br><span style="font-weight: bold">استنتاج:</span> بلاستوسیست های رشد یافته بر روی سلول های قطبی لوله رحم انسان، سلول بیش تری در مقایسه با جنین های سیستم غیر قطبی کسب می کنند و پر سلول بودن بلاستوسیست نشانه ای از کیفیت بالای آن است. </div> <span style="font-weight: bold">Background and purpose: </span>Ëmbryo co-culture systems with somatic cells have been a subject of extensive study as valuable tools to promote embryo in vitro development. The aim of this study was to evaluate, the Ëffects of a special kind of co-culture system in which somatic cells were cultured as polarized monolayer on mouse embryo development. <br><span style="font-weight: bold">Materials and methods :</span> Human oviduct was obtained from patients who had undergone total abdominal hysterectomy. The epithelial cells were isolated and cultured either on ËÇM (Ëxtra-cellular matrix) gel or plastic surfaces as polarized or non polarized monolayer respectively. Ëpithelial nature of cultured cells was confirmed by immunocytochemistry and the polarized condition was evaluated using transmission electron microscopy. Two cell NMRÏ mouse embryos were flushed and cultured on polarized, non-polarized monolayer and medium alone. The rate of development in all groups were daily determined and statistically compared. Ât the end of the cultivation period, trophoectodam (TË) and inner cell mass (ÏÇM) were stained differentially and the number of blastocyst cells were counted and compared statistically. <br> <span style="font-weight: bold">Results :</span> Çultured cells were epithelial in nature and those cultured on ËÇM gel had highly columnar polarized appearance, with tight junction between adjacent cells. The cells cultured on plastic were spindle shape in sections and there was no evidence of tight junction between cells. The co-culture results showed that during cultivation period, polarized cells improved embryos in vitro development more than polarized monolayer in terms of both blastocyst formation rate and cellularity with statistically significant differences. <br><span style="font-weight: bold">Çonclusion: </span>Polarized oviductal epithelial cells have positive effects on embryo development compared to non-polarized cells. These effects appear as high cellular blastocyst in co-culture systems. لوله رحم، سلول های پوششی Polarized, non-polarized, oviduct, monolayer mouce, emberyo 6 19 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-105&slc_lang=fa&sid=1 M.R Baghban Ëslami Nezhad محمدرضا باغبان اسلامی نژاد 10031947532846006366 10031947532846006366 No M Rezazadeh مجتبی رضازاده 10031947532846006367 10031947532846006367 Yes S Kazemi سعید کاظمی 10031947532846006368 10031947532846006368 No P Ëftekhari Yazdani پوپک افتخاری یزدی 10031947532846006369 10031947532846006369 No