Journal of Mazandaran University of Medical Sciences

fa بررسی موتاسیون در ژن gyrAدر سویه های بالینی اشریشیا کلی و کلبسیلا پنومونیه جدا شده ازبیمارستان امام خمینی(ره) شهرستان ساری Evaluating the gyrA Gene Mutation in Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae Isolates in Sari Imam Khomeini Hospital, Iran ميکروبيولوژي Microbiology پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف: افزایش تعداد مقاومت به کوئینولون‌ها در باکتری‌های اشرشیا کلی و کلبسیلا پنومونیه‌های جدا شده از ساری، مشکلات فراوانی را در درمـان ایجـاد نموده است. موتاسیون در ژن gyrA منجر به تغییر اسیدهای آمینه و مقاومت به فلئوروکینولون‌ها در باکتری‌های اشرشیاکلی و کلبسیلا پنومونیه می‌باشد. هدف ما از این مطالعه، تشخیص جهش‌های قابل توجه از ایزوله‌های جدا شده به روش SSCP PCR می باشد. مواد و روش‌ها: ایزوله‌های جدا شده جمع‌آوری و تست حساسیت آنتی‌بیوتیکی )سیپروفلوکساسین، نالیدیکسیک اسید) معمول به روش دیسک دیفیوژن آگار انجام شد. مقاومت فلوروکینولون با استفاده از آزمون MIC به روش E-test تایید شد. از روش SSCP PCR برای تشخیص جهش در ژن ser83-asp87) gyrA( استفاده شد. نتایج به دست آمده از روش SSCP PCR برای تایید به‌طور راندوم، تعیین توالی گردید. یافته‌ها: از 103 ایزوله جدا شده، 65 نمونه (2/63 درصد) اشرشیاکلی و 38 نمونه (8/36 درصد) کلبسیلا پنومونیه بودند. ایزوله‌های جدا شده با روش SSCP PCR بررسی شدند. در همه‌ی نمونه‌های اشرشیاکلی مقاوم به سیپروفلوکساسین، حداقل یک موتاسیون مشاهده گردید. هم‌چنین در همه نمونه‌های کلبسیلای مقاوم به سیپروفلوکساسین، حداقل یک موتاسیون و در 14 نمونه در هر 2 نقطه موتاسیون مشاهده گردید، در حالی که در 5 نمونه حساس به سیپروفلوکساسین هیچ موتاسیونی دیده نشد. استنتاج: نتایج نشان داد که جهش در gyrA ارتباط نزدیکی با مقاومت کینولون‌ها دارد. افزایش شیوع مقاومت کینولون ها در میان باکتری E.coli و K.penumune جدا شده، نشان دهنده نیاز به برنامه‌های کنترل عفونت می باشد. Background and purpose: Increasing resistance to Quinolones in Escherichia coli and Klebsiella pneumonia in Sari, has caused many problems in treatment. Mutation in gyrA gene lead to changes in amino acids and resistance against Fluoroquinolones in E. coli and K. pneumonia. This study aimed at identifying remarkable mutations in E. coli and K. pneumonia isolates using PCR-SSCP analysis. Materials and methods: Antibiotic sensitivity test (ciprofloxacin, nalidixic acid) was performed using Agar Disk Diffusion method. Resistance to fluoroquinolones was confirmed by E-test. (MIC experiment). We used PCR-SSCP method to detect mutation in gyrA (ser83 – asp 87) genes. Then, the PCR products were randomly sequenced. Results: From 103 isolates, 65 (63.2 %) were E. coli and 38 (36.8%) were K. pneumoniae. In all E.coli isolates resistant to Ciprofloxacin, at least one mutation was observed. Also, in all K. pneumoniae samples resistant to Ciprofloxacin, at least one mutation was seen and in 14 samples two mutation points were observed, but in 5 samples that were sensitive to Ciprofloxacin no mutation was observed. Conclusion: This study showed that the mutation in gyrA genes is closely related to quinolones resistance. High prevalence of quinolones resistance in E. coli and K. pneumoniae isolates requires more appropriate infection control programs.   اشرشیا کلی, کلبسیلا پنومونیه, کینولون ها, مقاومت آنتی بیوتیکی Escherichia Coli, Klebsiella pneumonia, Quinolones, Antibiotic resistance 21 30 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4813-1&slc_lang=fa&sid=1 Behnam Hashemi بهنام هاشمی 100319475328460095321 100319475328460095321 No MSc Student in Microbiology, Student Reseach Committee, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran دانشجوی کارشناسی ارشد میکروبشناسی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Alireza Rafiei علیرضا رفیعی 100319475328460095322 100319475328460095322 No Professor, Department of Immunology, Molecular and Cell Biology Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran استاد، گروه ایمونولوژی، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Reza Valadan رضا ولدان 100319475328460095323 100319475328460095323 No Assistant Professor, Department of Immunology, Molecular and Cell Biology Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran استادیار، گروه ایمونولوژی، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Maryam Abdollahi مریم عبدالهی 100319475328460095324 100319475328460095324 No MSc Student in Microbiology, Student Reseach Committee, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran دانشجوی کارشناسی ارشد میکروبشناسی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Mohammad Ahanjan محمد آهنجان ahanjan2007@gmail.com 100319475328460095325 100319475328460095325 Yes Associate Professor, Department of Microbiology, Pediatric Infectious Diseases Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran دانشیار، گروه میکروبشناسی، مرکز تحقیقات عفونی اطفال، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Eisa Nazar عیسی نظر 100319475328460095326 100319475328460095326 No PhD Student in Biostatistics, Student Research Committee, Faculty of Health, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran دانشجوی دکترای آمار زیستی، کمیته تحقیقات دانشجویی، گروه آمار زیستی و اپیدمیولوژی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران Zaher Morsaljahan ظاهر مرسل جهان 100319475328460095327 100319475328460095327 No MSc Student in Immunology, Student Research Committee, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran دانشجوی کارشناسی ارشد ایمونولوژی، کلیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Rezvan Khajavi رضوان خواجوی 100319475328460095328 100319475328460095328 No MSc in Molecular Biology, Molecular Cell Biology Research Center, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran کارشناس ارشد بیولوژی مولکولی، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Maryam Salehiyan مریم صالحیان 100319475328460095329 100319475328460095329 No MSc in Microbiology, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran کارشناس ارشد میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران