Journal of Mazandaran University of Medical Sciences

fa بررسی نقش miR-429 با میزان بیان ژن E2F3در رده سرطان پستان The Role of MicroRNA-429 in E2F3 Expression in Breast Cancer Cell Lines بیوتکنولوژی Biotechnology پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف: یکی از عوامل کنترل کننده بسیاری از اجزای سلولی و عملکرد های بیولوژیک در سطح اپی ژنتیک، MicroRNA ها می ‌باشند. miR-429 جزو خانواده miR-200 بوده و در متاستاز سرطان دخالت دارد. مطالعات بسیاری ارتباط miR-429 را با سرطان کبد، مثانه، روده و معده بررسی کرده‌‌اند. این مطالعه با هدف تغییر بیان ژن E2F3 پس از ترانسفکت کردن سلول‌های MCF-7 با وکتورهای pre-miR-429 و anti-miR-429 به عنوان هدف احتمالی miR-429، انجام پذیرفت. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، با استفاده از پایگاه های داده‌ miR و ابزار های بیوانفورماتیکی E2F3 به عنوان هدف miR-429 پیش‌بینی شد. سپس سلول‌های MCF-7 با دو وکتور pre-miR-429 و anti-miR-429 ترانسفکت شدند. پس از گذشت 48 ساعت، استخراج RNA و سنتز cDNA انجام شد. میزان بیان miR-429 و ژن هدف با استفاده از روش Real-Time PCR بررسی شد. یافته‌ها: نتایج حاصل از مقایسه گروه سلول‌های ترانسفکت نشده، ترانسفکت ‌شده با pre-miR-429 و ترانسفکت شده با anti-miR- 429 نشان دهنده افزایش بیان ژن هدف در اثر ترانسفکشن با anti-miR-429 (38/9 برابر) و کاهش بیان در اثر ترانسفکشن با pre-miR-429 می‌باشد (3/5 برابر). استنتاج: کاهش بیان miR-429 در متاستاز به استخوان در سرطان پستان نقش داشته و در تومور تخمدان و کارسینومای کولورکتال کاهش بیان آن باعث کاهش متاستاز و تهاجم می گردد. در مطالعه حاضر نشان داده شد که میزان بیان E2F3 در اثر ترنسفکت با pre-miR-429 کاهش و با anti-miR-429 افزایش می‌یابد، بنابراین miR-429 می‌تواند به عنوان ساپرس‌کننده تومور در سرطان پستان از طریق مهار E2F3 عمل کند.   Background and purpose: MicroRNA regulation of cancer-related pathways has a major effect on cancer development. MiR-429 is a member of miR-200 family with an important role in metastasis. There are many studies on the association between miR-429 and liver, bladder, bowel, and gastric cancers. In this study, we investigated the expression changes of E2F3 genes after transfection of MCF-7 cells using pre-miR-429 and anti-miR-429 as the potential targets of miR-429. Materials and methods: In this experimental study, E2F3 was predicted as the potential target of miR-429 using using miRNA bioinformatics tools. MCF-7 cells were then transfected with both mir-429 precursor and inhibitory vectors. RNA extraction and cDNA synthesis were done after 48 hr. Expression of miR-429 and target gene were determined by qRT-PCR. Results: The comparison between the results of untransfected cells group, transfected with pre-miR-429 group, and transfected with anti-miR-429 group showed that down-regulation of miR-429, increased the expression level of E2F3 in cells transfected with miR-429 inhibitory vector (9.38 folds). Expression level of E2F3 decreased in cells transfected with pre-miR-429 vector (5.3 folds). Conclusion: Low expression level of miR-429 in breast cancer was found to be effective in bone metastasis, although in ovarian cancer and colorectal carcinoma, resulted in decreasing invasion and matastasis. In current study, the expression level of E2F3 decreased when transfected with pre-miR-429 vector and increased when transfected with anti-miR-429 vector, therefore, miR-429 could be a potential target in breast cancer therapy. سرطان پستان, MCF7, miR-429, ژن E2F3 breast cancer, MCF-7, miR-429, E2F3 29 39 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-9329-1&slc_lang=fa&sid=1 Saeedeh Darvishi سعیده درویشی 1003194753284600100442 1003194753284600100442 No PhD Student in Clinical Pathology, Department of Clinical Pathology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran دانشجوی دکترای تخصصی کلینیکال پاتولوژی، دانشکده دامپزشکی، گروه کلینیکال پاتولوژی، دانشگاه تهران، تهران، ایران Nahid Atyabi ناهید اطیابی 1003194753284600100443 1003194753284600100443 No Professor, Department of Clinical Pathology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran استاد، گروه کلینیکال پاتولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران Arshad Hosseini ارشد حسینی hoseini.a@iums.ac.ir 1003194753284600100444 1003194753284600100444 Yes Assistant Professor, Department of Medical Biotechnology, School of Allied Medicine, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran . Assistant Professor, Cellular and Molecular Research Center, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran استادیار، گروه بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران.استادیار، مرکز تحقیقات سلولی مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران Pouria Omidi پوریا امیدی 1003194753284600100445 1003194753284600100445 No MSc Student in Medical Biotechnology, School of Allied Medicine, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران Farhad Zaker فرهاد ذاکر 1003194753284600100446 1003194753284600100446 No Professor, Department of Hematology, School of Allied Medicine, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran استاد، گروه هماتولوژی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایران، ایران، تهران Arash Ghalyanchi Langeroudi آرش قلیانچی لنگرودی 1003194753284600100447 1003194753284600100447 No Asssociate Professor, Department of Microbiology and Immunology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran دانشیار، گروه میکروبیولوژی و ایمنولوژی، دانشکده ی دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران Siavash Moradi سیاوش مرادی 1003194753284600100448 1003194753284600100448 No Assistant Professor, Gastrointestinal Cancer Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran استادیار، مرکز تحقیقات سرطان دستگاه گوارش، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران