fa مطالعه اثرات مهاری تیمار هم‌زمان سیلیبینین و الیگونوکلئوتید CpG-ODN بر بیان ژن‌های MMP-2 و TLR-9 در رده سلول‌های سرطان کبد هماتولوژی و آنکولوژی Hematology and Oncology پژوهشي-کامل Research(Original) <span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">سابقه</span></span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;"> و هدف:</span></span></span><span style="font-family:b zar;"> هپاتوسلولار کارسینوما </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">(HCC)</span></span><span style="font-family:b zar;"> سرطانی شایع است و</span><span style="font-family:b zar;"> تحریک سیستم ایمنی از طریق 9-</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">TLR</span></span><br> <span style="font-family:b zar;">(</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Toll-like receptors</span></span><span style="font-family:b zar;">) به وسیله 2006 </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CpG-ODN</span></span><span style="font-family:b zar;"> می‌تواند در درمان آن کارآیی داشته باشد. هدف این مطالعه بررسی اثر تیمار هم‌زمان سیلیبینین و 2006 </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CpG-ODN</span></span><span style="font-family:b zar;"> بر رشد و تکثیر مدل سلولی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">HCC</span></span><span style="font-family:b zar;"> می باشد.</span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"></span></span></span><br> <span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">مواد و روش</span></span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">‌</span></span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">ها:</span></span></span> <span style="font-family:b zar;">در این مطالعه تجربی، اثر بازدارندگی دوزهای متفاوت سیلیبینین و 2006 </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CpG-ODN</span></span><span style="font-family:b zar;"> بر رشد سلول‌های 2</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">HepG</span></span><span style="font-family:b zar;"> <span style="letter-spacing:-.2pt;">و تعیین بهترین غلظت برای تیمار هم‌زمان به روش </span></span><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:b zar;"> سنجیده شد. میزان بیان ژن‌های </span></span><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-size:10.0pt;">MMP2</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:b zar;"> و </span></span><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-size:10.0pt;">TLR9</span></span> <span style="font-family:b zar;">به روش </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Real-Time PCR</span></span><span style="font-family:b zar;"> سنجیده شد. فعالیت ماتریکس‌ متالوپروتییناز </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MMP2</span></span><span style="font-family:b zar;"> با روش زایموگرافی اندازه‌گیری گردید.</span><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"></span></span><br> <span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">یافته</span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">‌</span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">ها:</span></span> <span style="font-family:b zar;">به ترتیب، غلظت‌های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">&micro;M</span></span><span style="font-family:b zar;"> 100 و </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">nM</span></span><span style="font-family:b zar;"> 100 از سیلیبینین و 2006 </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CpG-ODN</span></span><span style="font-family:b zar;"> برای انجام تیمار هم‌زمان انتخاب شدند که اثرات ایستایی شدیدی بر رشد سلول داشتند (05/0</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;"><</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">P</span></span><span style="font-family:b zar;">). نتایج </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Real-Time PCR</span></span><span style="font-family:b zar;"> تفاوت معنی‌داری در </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Ct</span></span><span style="font-family:b zar;"> تکثیر ژن‌ها</span><span style="font-family:b zar;"> نشان نداد </span><span style="font-family:b zar;">(05/0</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">></span></span> <span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">P</span></span><span style="font-family:b zar;">).<span style="color:black;"></span></span><br> <span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">استنتاج:</span></span></span><span style="font-family:b zar;"> حتی </span><span style="font-family:b zar;">غلظت‌های </span><span style="font-family:b zar;">پایین </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CpG</span></span><span style="font-family:b zar;"> در این پژوهش، اثربخشی </span><span style="font-family:b zar;">سیلیبینین</span> <span style="font-family:b zar;">بر سلول سرطان کبد </span><span style="font-family:b zar;">را به طور</span><span style="font-family:b zar;"> مشخصی افزایش داده</span><span style="font-family:b zar;">‌</span><span style="font-family:b zar;">اند.</span><span style="font-family:b zar;"> با توجه به اهمیت استفاده از دوزهای پایین دارو و فعال‌سازی مکانسیم‌های ایمنی، </span><span style="font-family:b zar;">تجویز توام این دو دارو می</span><span style="font-family:b zar;">‌</span><span style="font-family:b zar;">تواند چشم</span><span style="font-family:b zar;">‌</span><span style="font-family:b zar;">انداز روشنی را برای روش</span><span style="font-family:b zar;">‌</span><span style="font-family:b zar;">های درمانی ترکیبی آینده داشته باشد.</span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"></span></span></span><br> <br> &nbsp; <strong>Background and purpose:</strong>&nbsp;Hepatocellular carcinoma (HCC) is a most common liver malignancy and TLR9 (Toll-like receptor) is essential for CpG DNA-induced immune responses. The aim of this study was to assess the anti-metastatic effects of combined administration of silibinin and CpG-ODN2006 on human hepatocellular carcinoma HepG-2 cell line model.<br> <strong>&nbsp;Materials and methods:</strong>&nbsp;Inhibitory effects of various different concentrations of silibinin and CpG-ODN2006 on HepG-2 cells growth and detection of best dosages for simultaneously treatment were assessed by MTT method. Expression of MMP2 and TLR9 genes was analyzed by real- time PCR. Gelatin zymography was used to determine the activity of MMP2.<br> <strong>Results:&nbsp;</strong>Inhibitory effects of determined concentrations of silibinin (100 &mu;M) and CpG-ODN2006 (100 nM) on HepG-2 cells growth was significant (p<0.05). Real-Time PCR showed no significant differences between Ct of the genes expression analyses.<br> <strong>Conclusion:</strong>&nbsp;<strong>Conclusion:</strong>&nbsp; Collectively, the data in this study supports the idea of combined silibinin-CpG administration in hepatic cancer customized therapeutic modalities. However, more investigations to assess immunomodulatory effects and safety analyses would be very informative steps in advance of randomized clinical trials.<br> <br> &nbsp; سیلیبینین, اولیگوداکسی‌نوکلئوتیدهای CpG, MMP2, TLR9, HepG-2 silibinin, CpG-oligodeoxynucleotides, MMP2, TLR9, HepG-2 1 10 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-9577-1&slc_lang=fa&sid=1 Arezou Rezaei آرزو رضایی arezaei@du.ac.ir 1003194753284600103641 1003194753284600103641 No Assistance Professor, School of Biology, Institute of Biological Sciences, Damghan University, Damghan, Iran استادیار، دانشگاه دامغان، دانشکده زیست شناسی و انستیتو علوم زیستی، دامغان، ایران Farshid Saadat فرشید سعادت fsaadat@alumnus.tums.ac.ir 1003194753284600103642 1003194753284600103642 No Associate Professor, Department of Immunology, Faculty of Medicine, Guilan University of Medical Sciences, Rasht, Iran. دانشیار، گروه ایمونولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران Farnaz Safavifar فرناز صفوی فر fsafavifar@yahoo.com 1003194753284600103643 1003194753284600103643 No Research Associate, Endocrinology and Metabolism Research Center, Endocrinology and Metabolism Clinical Sciences Institute, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran دکترا، مرکز تحقیقات غدد و متابولیسم، پژوهشکده علوم بالینی غدد و متابولیسم، دانشگاه علوم پزشکی تهران، ایران Azar Berahmeh آذر برهمه 1003194753284600103644 1003194753284600103644 No MSc in Biothecnology, Department of Pathobiology, Faculty of Public Health, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran فوق لیسانس بیوتکنولوژی، گروه پاتوبیولوژی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران، ایران Mohammad Reza Khorramizadeh محمدرضا خرمی‌زاده khoramza@sina.tums.ac.ir 1003194753284600103645 1003194753284600103645 Yes 5Professor, Biosensor Research Center, Endocrinology and Metabolism Molecular-Cellular Sciences Institute, Tehran University of Medical Sciences, Tehran Iran . Professor, Biothechnology Research Center, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran . استاد، مرکز تحقیقات بیوسنسور، پژوهشکده علوم سلولی، مولکولی غدد و متابولیسم، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران . استاد، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران