fa اثر بربرین بر بیان ژن Bcl-2 در بیماران لوسمی لنفوسیتی مزمن در مقایسه با گروه کنترل ايمونولوژي Immunology پژوهشي-کامل Research(Original) <span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">سابقه</span></span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;"> و هدف:</span></span></span><span style="font-family:b zar;"> پروتئین ضد آپوپتوزی </span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span></em><span style="font-family:b zar;"> از وقوع آپوپتوز از طریق مسیر میتوکندریایی جلوگیری کرده و بیان بالای این پروتئین، برای بقای سلول‌‌های توموری بیماران مبتلا به لوسمی لنفوسیتی مزمن (</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CLL</span></span><span style="font-family:b zar;">) ضروری است. بربرین یک آلکالوئید است که منجر به القای آپوپتوز سلول</span><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">‌</span></span><span style="font-family:b zar;">‌های سرطانی از طریق مسیر میتوکندریایی می</span><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">‌</span></span><span style="font-family:b zar;">گردد. مطالعه حاضر با هدف ارزیابی اثر بربرین بر میزان بیان ژن </span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span></em><span style="font-family:b zar;"> در سلول‌‌های تک هسته ‌ای خون محیطی (</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">PBMCs</span></span><span style="font-family:b zar;">) افراد مبتلا به </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CLL</span></span><span style="font-family:b zar;"> در مقایسه با افراد سالم در محیط </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">In vitro</span></span><span style="font-family:b zar;"> انجام پذیرفت.<span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"></span></span></span><br> <span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">مواد و روش</span></span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">‌</span></span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">ها:</span></span></span><span style="font-family:b zar;"> در این مطالعه تجربی، خون محیطی از 12 فرد مبتلا به </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CLL</span></span><span style="font-family:b zar;"> و 6 فرد سالم گرفته شد. </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">PBMCs</span></span><span style="font-family:b zar;"> با استفاده از فایکول جداسازی، و در دو گروه تیمار شده با بربرین (</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">&mu;M</span></span><span style="font-family:b zar;"> 25) و تیمار نشده برای 48 ساعت کشت داده شد. بیان ژن </span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span></em> <span style="font-family:b zar;">به دنبال استخراج </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">RNA</span></span><span style="font-family:b zar;"> و سنتز </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">cDNA</span></span><span style="font-family:b zar;"> با استفاده از </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Real-time PCR</span></span><span style="font-family:b zar;"> و روش سایبرگرین در هر دو گروه مورد سنجش قرار گرفت.<span style="color:black;"></span></span><br> <span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">یافته</span></span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">‌</span></span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">ها:</span></span></span> <span style="font-family:b zar;">سطح بیان ژن </span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span></em><span style="font-family:b zar;"> در افراد مبتلا به لوسمی لنفوسیتی مزمن تحت تأثیر بربرین نسبت به گروه تیمار نشده، به</span><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">‌</span></span><span style="font-family:b zar;">طور قابل توجهی پایین‌تر بود (05/0 </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">p</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;"><</span></span><span style="font-family:b zar;">)، در حالی‌ که تفاوت معنی‌داری در افراد سالم تحت تأثیر بربرین و گروه کنترل (بدون دارو) مشاهده نشد.<span style="color:black;"></span></span><br> <span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b koodak;">استنتاج:</span></span></span> <span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:b zar;">فعالیت آپوپتوزی بربرین ممکن است از طریق کاهش بیان ژن </span></span><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span></em><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:b zar;"> در سلول‌‌های توموری </span></span><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-size:10.0pt;">CLL</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:b zar;"> میانجی</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;">‌</span></span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:b zar;">گری </span></span><span style="font-family:b zar;">شود. با توجه به نقش اساسی پروتئین </span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span></em> <span style="font-family:b zar;">در بقای سلول‌های توموری، این محتمل است که بربرین به عنوان یک ترکیب بالقوه طبیعی باز دارنده فعالیت ژن </span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Bcl-2</span></span></em><span style="font-family:b zar;">، می‌‌تواند یک گزینه درمانی برای </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">CLL</span></span><span style="font-family:b zar;"> مطرح باشد.</span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"></span></span></span> <strong>Background and purpose:</strong> Anti-apoptotic protein Bcl-2 prevents apoptosis through the mitochondrial pathway and high-level expression of Bcl-2 is required for survival of chronic lymphocytic leukemia (CLL). Berberine (BBR) is an alkaloid that induces apoptosis of cancer cells via mitochondrial pathways. The aim of this study was to investigate the effect of Berberine on Bcl-2 gene expression in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of CLL patients compared to healthy subjects in vitro.<br> <strong>Materials and methods:</strong> In this experimental study, peripheral blood was obtained from 12 CLL patients and six age-matched healthy subjects. PBMCs were isolated by Ficoll separation and were cultured in two groups for 48 hours incubation; treated with Berberine (25 &mu;M) and untreated. Finally, Bcl-2 gene expression was investigated in both groups following RNA extraction and cDNA synthesis by Real time PCR using SYBR Green method.<br> <strong>Results:</strong> Bcl-2 gene expression levels in CLL patients treated with Berberine were significantly lower than those of the untreated group (P<0.05), but no significant differences were found between healthy subjects treated with Berberine and control group.<br> <strong>Conclusion:</strong> The apoptotic activity of Berberine may be mediated through the reduction of Bcl-2 mRNA expression level in leukemic cells of CLL. Considering the major role of Bcl-2 in survival of tumor cells, Berberine could be considered as a natural therapeutic option for CLL. لوسمی لنفوسیتی مزمن, Bcl-2, بربرین, Real-time PCR chronic lymphocytic leukemia, Bcl-2, Berberine, Real-time PCR 56 63 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-8332-2&slc_lang=fa&sid=1 Mehrnoosh Pashaei مهرنوش پاشایی meh.pashaei@yahoo.com 1003194753284600102869 1003194753284600102869 No 1 Cancer Research Center, Semnan University of Medical Sciences, Semnan, Iran 2 PhD Student in Immunology, Department of Immunology, School of Medicine, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran . مرکز تحقیقات سرطان، دانشگاه علوم پزشکی سمنان، سمنان، ایران 2. دکترای ایمونولوژی، گروه ایمنی شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران Mehdi Barati مهدی براتی mehdi.barati10@yahoo.com 1003194753284600102870 1003194753284600102870 No PhD Student in Immunology, Department of Immunology, Faculty of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran 4 Student Research Committee, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran . دکترای ایمونولوژی، گروه ایمنی شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران 4. کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران Farahnaz Ghahremanfad فرحناز قهرمانفرد f_ghahremanfard@yahoo.com 1003194753284600102871 1003194753284600102871 No Cancer Research Center, Semnan University of Medical Sciences, Semnan, Iran مرکز تحقیقات سرطان، دانشگاه علوم پزشکی سمنان، سمنان، ایران Fatemeh Pak فاطمه پاک parisa_amin@yahoo.com 1003194753284600102872 1003194753284600102872 No Cancer Research Center, Semnan University of Medical Sciences, Semnan, Iran مرکز تحقیقات سرطان، دانشگاه علوم پزشکی سمنان، سمنان، ایران Abolghasem Ajami ابوالقاسم عجمی ajami36@gmail.com 1003194753284600102873 1003194753284600102873 No Professor, Department of Immunology, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran . استاد، گروه ایمنی شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Parviz Kokhaei پرویز کوخایی p_kokha@yahoo.com 1003194753284600102874 1003194753284600102874 Yes Immune and Gene Therapy Lab, Cancer Centre Karolinska, Karolinska University Hospital, Stockholm, Sweden . مرکز تحقیقات سرطان، دانشگاه علوم پزشکی سمنان، سمنان، ایران . آزمایشگاه ایمونولوژی و ژن درمانی، مرکز سرطان کارولینسکا، بیمارستان دانشگاه کارولینسکا، استکهلم، سوئد