fa بررسی اثر باکتریوسین تولید شده توسط لاکتوباسیلوس کازئی جدا شده از شیر با پتانسیل پروبیوتیکی بر توانایی تشکیل بیوفیلم توسط استرپتوکوکوس سالیواریوس جدا شده از پلاک دندانی ميکروبيولوژي Microbiology پژوهشي-کامل Research(Original) <span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;">سابقه</span></span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;"> و هدف:</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> پلاک دندان در واقع یک بیوفیلم است که در سطح دندان ایجاد می‌شود. ضایعات پوسیدگی به علت تغییرات اکولوژیکی نامناسب در فلور میکروبی بیوفیلم پلاک، ایجاد می‌شود. در این مطالعه </span>اثر باکتریوسین<em> لاکتوباسیلوس کازئی </em>پروبیوتیک جدا شده از شیر بر تشکیل بیوفیلم توسط <em>استرپتوکوکوس سالیواریوس</em> مورد بررسی قرار گرفت.</span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"></span></span></span><br> <span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;">مواد و روش</span></span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">‌</span></span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;">ها:</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">در این مطالعه مقطعی ، جداسازی 3سویه<em> لاکتوباسیلوس کازئی</em> پروبیوتیک از نمونه‌های شیر غنی‌سازی و کشت در محیط </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">MRS </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">Broth</span></span><span style="font-family:B Zar;"> و </span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">MRS Agar</span></span><span style="font-family:B Zar;"> در جار شمع</span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Zar;">‌</span></span><span style="font-family:B Zar;">دار (</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">(Candle jar</span></span><span style="font-family:B Zar;"> صورت گرفت. شناسایی اولیه<em> <span style="letter-spacing:-.1pt;">لاکتوباسیلوس</span></em></span><span style="font-family:B Zar;">‌<em><span style="letter-spacing:-.1pt;">کازئی</span></em><span style="letter-spacing:-.1pt;"> با تست</span><span style="letter-spacing:-.1pt;">‌های تخمیری قند و سایر تست</span>‌های بیوشیمیایی مربوطه صورت پذیرفت، سپس با </span><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-size:10.0pt;">PCR</span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:B Zar;"> و سکانس</span></span> <span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">16srDNA</span></span><span style="font-family:B Zar;">توالی‌های به</span><span style="font-family:B Zar;">‌دست آمده، تایید شد. تخلیص نسبی باکتریوسین از روش رسوب‌دهی با سولفات آمونیوم انجام و وزن مولکولی آن به</span>‌وسیله <span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">SDS-PAGE</span></span><span style="font-family:B Zar;"> اندازه</span><span style="font-family:B Zar;">‌گیری و فعالیت آن سنجیده شد. جدایه</span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Zar;">‌</span></span><span style="font-family:B Zar;">های <em>استرپتوکوکوس سالیواریوس</em> از پلاک دندانی جداسازی و به</span><span style="font-family:B Zar;">‌صورت فنوتیپی و بیوتیپی شناسایی شدند. تایید مولکولی جدایه</span>‌های به‌دست آمده با استفاده از ژن اختصاصی <span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">&nbsp;gtfK</span></span><span style="font-family:B Zar;">با روش</span><span dir="LTR"><span style="font-size:10.0pt;">PCR </span></span><span style="font-family:B Zar;">&nbsp;انجام شد. توانایی تشکیل بیوفیلم <em>استرپتوکوکوس سالیواریوس</em> و بررسی اثر باکتریوسین بر تشکیل بیوفیلم با میکروتیترپلیت سنجیده شد.</span><span style="font-family:B Zar;"></span><br> <span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Koodak;">یافته</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Zar;">‌</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Koodak;">ها: </span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:B Zar;">پس از تخلیص نسبی باکتریوسین 3 سویه<em> لاکتوباسیلوس کازئی</em> پروبیوتیک جداسازی شده از شیر، در سنجش </span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Zar;">وزن مولکولی آن</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">‌</span></span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Zar;">ها به روش</span></span><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-size:10.0pt;">SDSPAGE</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Zar;"> دو نمونه </span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:10.0pt;">3</span></span></span><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-size:10.0pt;">LC</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Zar;"> و </span></span><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-size:10.0pt;">LC1</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="font-family:B Zar;"> باندهایی به ترتیب با وزن مولکولی ۳۵ تا ۴۰ کیلودالتون و حدود</span></span><span style="font-family:B Zar;"> 75 کیلو دالتون تشکیل دادند. مایع رویی حاصل از کشت<em> لاکتوباسیلوس کازئی</em> و باکتریوسین‌ها، اثرات ضدباکتریایی علیه جدایه</span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">‌</span></span></span><span style="font-family:B Zar;">های <em>استرپتوکوکوس سالیواریوس</em> از پلاک دندانی و تشکیل بیوفیلم توسط این باکتری را نشان دادند.</span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"></span></span><br> <span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;">استنتاج:</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">طبق نتایج این مطالعه باکتریوسین <em>لاکتوباسیلوس کازئی</em> توانایی مهار رشد <em>استرپتوکوکوس سالیواریوس</em> و نیز کاهش تشکیل بیوفیلم را دارند</span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">و جایگزین مناسبی برای استفاده در صنایع بهداشت دهان می‌باشند.<span style="letter-spacing:-.2pt;"></span></span></span> <strong>Background and purpose:</strong> Dental plaque is a biofilm that is formed on the surface of the tooth. Carious lesions are caused by inappropriate ecological changes in microbial flora of the plaque biofilm. In this study, the effect of <em>Lactobacillus casei</em> bacteriocin, isolated from dairy products, was investigated on<em> Streptococcus salivarius</em> biofilm formation.<br> <strong>Materials and methods:</strong> In this experimental study, MRS Broth and MRS Agar medium were used to isolate three strains of <em>Lactobacillus casei</em> probiotic from milk samples under microaerophilic conditions. The initial identification of <em>Lactobacillus casei</em> was performed by sugar fermentation and other biochemical tests. Then, 16SrRNA encoding gene was confirmed by PCR and sequenced. At last, Bacteriocin was isolated by ammonium sulfate sedimentation and its molecular weight was measured by SDS-PAGE and the antimicrobial activities were investigated. The <em>Streptococcus salivarius</em> were isolated from dental plaque and phenotypically and biotypically identified. Molecular confirmation of the isolates was performed using gtfK specific gene by PCR. The ability to form <em>Streptococcus salivarius</em> biofilm and the effect of bacteriocin on biofilm formation were measured by microtiter plate.<br> <strong>Results:</strong> After partial purification of <em>Lactobacillus casei</em> probiotic from dairy products, two LC3 and LC1 protein samples formed bands (35-40 kDa and about 75 kDa, respectively). The supernatant fluid from the cultivation of <em>Lactobacillus casei</em> and bacteriocins showed antibacterial effects against <em>Streptococcus salivarius</em> isolates from dental plaque and the formation of biofilm by this bacterium.<br> <strong>Conclusion:</strong> According to this study, bacteriocin and supernatant fluid from <em>Lactobacillus casei</em> cultures could inhibit the growth of <em>Streptococcus salivarius</em> and also reduced biofilm formation, so, it could be used in oral care products. پروبیوتیک, لاکتوباسیلوس کازئی, باکتریوسین, بیوفیلم , استرپتوکوکوس سالیواریوس, پلاک دندانی probiotics, Lactobacillus casei, bacteriocin, biofilm, tooth decay, Streptococcus salivarius, dental plaque 23 35 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-7816-1&slc_lang=fa&sid=1 Mohammad Mehdi Soltan Dallal محمد مهدی سلطان دلال msoltandallal@gmail.com 1003194753284600132148 1003194753284600132148 Yes Professor, Division of Food Microbiology, Department of Pathobiology, School of Public Health, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran 2 Food Microbiology Research Center, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran . استاد، گروه پاتوبیولوژی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران، ایران 2. مرکز تحقیقات میکروبیولوژی مواد غذایی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، ایران Mohammad Reza Afradi محمد رضا افرادی mr.afradi90@gmail.com 1003194753284600132149 1003194753284600132149 No MSc in Food Microbiology, School of Public Health, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran کارشناس ارشد میکروب شناسی مواد غذایی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران، ایران Zahra Rajabi زهرا رجبی z_rajabi.arshad@yahoo.com 1003194753284600132150 1003194753284600132150 No PhD in Microbiology, Food Microbiology Research Center, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran دکتری میکروب شناسی، مرکز تحقیقات میکروبیولوژی مواد غذایی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، ایران Katayoon Samimirad کتایون صمیمی راد katayoon samjazi@yahoo.com 1003194753284600132151 1003194753284600132151 No Associate Professor, Department of Virology, School of Public Health, Tehran University of Medical Science, Tehran, Iran دانشیار، گروه ویروس شناسی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران، ایران Yousef Erfani یوسف عرفانی yerfani@sina.tums.ac.ir 1003194753284600132152 1003194753284600132152 No Assistant Professor, Department of Medical Laboratory Sciences, School of Allied Medical Sciences, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran استادیار، گروه علوم ازمایشگاهی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، ایران