fa اثر پلاسمای اتمسفری سرد بر میزان بیان و متیلاسیون ژن‌های دخیل در پاتوژنز سرطان کولورکتال ايمونولوژي Immunology پژوهشي-کامل Research(Original) <span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;">سابقه</span></span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;"> و هدف:</span></span></span> <span style="font-family:B Zar;">سرطان </span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">کولورکتال دومین سرطان شایع در مردان و سومین سرطان شایع در زنان در سراسر دنیا محسوب می‌شود. درمان‌های روتین کنونی اثرات جانبی زیادی داشته و کارایی پایینی دارند. هدف از مطالعه‌ی حاضر بررسی اثر پلاسمای اتمسفری سرد بر تغییرات اپی ژنتیک ژن‌هایی است که در بیماری‌زایی سرطان کولون نقش دارند.<span style="letter-spacing:-.1pt;"></span></span></span><br> <span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;">مواد و روش</span></span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">‌</span></span></span><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;">ها:</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">میزان تکثیر سلول‌ها با استفاده از روش </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">MTT</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> به دست آمد.&nbsp; برای هر دو رده، تیمار به مدت 40 ثانیه انجام شد و ارزیابی بیان ژن‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">Beclin-1</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">Runx3</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">AIM2</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> با کمک روش </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">Real-time PCR</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> محاسبه شد. همچنین میزان متیلاسیون ژن‌های نامبرده با تکنیک </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">Quantitative methylation specific PCR</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">(</span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">Q-MSP</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">) به دست آمد.</span></span><br> <span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;">یافته</span></span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">‌</span></span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;">ها:</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">بقای سلول‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">C26</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> پس از تیمار با </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">CAP</span></span></span> <span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">(Cold atmospheric Plasma)</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> به‌صورت معناداری نسبت به سلول‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">L929</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> کاهش یافت. بقای سلول‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">C26</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> به 75درصد، 52/2 درصد و 34 درصد طی 12، 24 و 48 ساعت با تیمار 40 ثانیه‌ای </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">CAP</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> کاهش یافت. میزان بیان ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">AIM2</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> کاهش (0/12 برابر) و بیان ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">Runx3</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> نسبت به گروه تیمار نشده افزایش (2/66 برابر) نشان داد. هم‌چنین تیمار با </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">CAP</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">، میزان متیلاسیون ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">Runx3</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> را نسبت به سلول‌های تیمار نشده کاهش داد (33/45 درصد در مقابل 63/24 درصد</span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">(</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">.</span></span><br> <span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Koodak;">استنتاج:</span></span></span> <span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;">این مطالعه اثر انتخابی تیمار با </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">CAP</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> بر سلول‌های سرطانی که هدف نهایی در درمان سرطان می‌باشد را تائید می‌کند. همچنین نشان داده شد که تیمار با </span></span><span dir="LTR"><span style="color:black;"><span style="font-size:10.0pt;">CAP</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"> بر میزان بیان ژن و متیلاسیون ژن‌های دخیل در بیماری‌زایی سرطان کولورکتال اثرگزار است.</span></span><span style="letter-spacing:-.2pt;"><span style="color:black;"><span style="font-family:B Zar;"></span></span></span> <strong>Background and purpose:</strong> Colorectal cancer (CRC) is ranked as the second most common cancer in men and the third most common cancer in women worldwide. Routine treatments have many side effects and little efficiency. The aim of this study was to investigate the effects of Cold Atmospheric Plasma (CAP) on epigenetic changes of some genes involved in CRC progression.<br> <strong>Materials and methods:</strong> Proliferation rate of cells after 40 s treatment was analyzed using MTT assay. Gene expressions of Beclin-1, Runx3, and AIM2 were measured using Real time PCR and methylation alternations of mentioned genes were evaluated with quantitative Methylation-Specific PCR (Q-MSP).<br> <strong>Results:</strong> The viability of CAP-treated C26 cells significantly decreased compared to that of the L929 cells. The viability of C26 cell line decreased to75%, 52.2%, and 34% following 12, 24, and 48 hours of CAP therapy for 4<span dir="RTL">0</span> seconds. CAP therapy decreased the AIM2 expression (fold change=0.12) and increased the Runx3 gene expression (fold change=2.66) in C26 cell line. Also, treatment with CAP decreased the methylation level of Runx3 gene in CAP-treated cells compared with untreated cells (33.45% vs 63.24%).<br> <strong>Conclusion:</strong> This study confirmed the selective effect of CAP on cancer cells which is an ultimate goal of cancer therapy approach. Also, CAP treatment was found to affect gene expression and methylation level of critical players of CRC.<br> &nbsp; پلاسمای اتمسفری سرد, سرطان کولورکتال, متیلاسیون, اپی ژنتیک cold atmospheric plasma, colorectal cancer, methylation, epigenetics 26 39 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-232-9&slc_lang=fa&sid=1 Parisa Zafari پریسا ظفری pzafari.70@gmail.com 1003194753284600141138 1003194753284600141138 No PhD Student in Immunology, Molecular and Cell Biology Research Center, Student Research Committee, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran دانشجوی دکترای ایمونولوژی، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Zahra Yadani زهرا یزدانی zahrayazdanikachooi1391@gmail.com 1003194753284600141139 1003194753284600141139 No PhD Student in Immunology, Molecular and Cell Biology Research Center, Student Research Committee, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran دانشجوی دکترای ایمونولوژی، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Haleh Akhavan-Niaki هاله اخوان نیاکی haleh.niaki@gmail.com 1003194753284600141140 1003194753284600141140 No Professor, Department of Genetics, Faculty of Medicine, Babol University of Medical Sciences, Babol, Iran استاد، گروه ژنتیک، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بابل، بابل، ایران Alireza Rafiei علیرضا رفیعی rafiei1710@gmail.com 1003194753284600141141 1003194753284600141141 Yes Professor, Department of Immunology, Molecular and Cell Biology Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran استاد، گروه ایمونولوژی، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران