Journal of Mazandaran University of Medical Sciences

fa بررسی اثر فاژ لیتیک اختصاصی جدا شده بر رشد و مهار تشکیل بیوفیلم S.mutans و S.sanguinis جدا شده از پلاک دندان پوسیده Effect of Isolated Specific Lytic Phage against Growth and Biofilm Inhibition of Streptococcus mutans and Streptococcus sanguinis Isolated from Decayed Dental Plaque ميکروبيولوژي Microbiology پژوهشي-کامل Research(Original)  سابقه و هدف: با وجود پیشرفت در صنعت بهداشت دهان و دندان، مشکل پوسیدگی دندان به عنوان یکی از شایع&lrm;ترین بیماری‌های دهان به قوت خود باقی است. یکی از روش&lrm;های جدید مبارزه با پلاک دندان که عامل اصلی پوسیدگی است، استفاده از باکتریوفاژ لیتیک خاص است. از این رو هدف مطالعه حاضر بررسی تأثیر فاژ لیتیک اختصاصی بر رشد و مهار بیوفیلم S. mutans و S. sanguinis جدا شده از پلاک دندانی پوسیده بود. مواد و روش‌ها: در این مطالعه مقطعی- توصیفی نمونه‌های پلاک دندان جهت جداسازی S. mutans و S.sanguinis جمع‌آوری و کشت در محیط MSA صورت پذیرفت. جدایه‌های مشکوک با تست‌های بیوشیمیایی بررسی و در نهایت با PCR تایید شدند. توانایی تشکیل بیوفیلم با رنگ‌سنجی کریستال ویوله در پلیت میکروتیتر سنجیده شد. باکتریوفاژ لیتیک با روش double layer agar از فاضلاب خام شهری جداسازی و مورفولوژی فاژ با میکروسکوپ الکترونی TEM بررسی شد. اثر فاژ لیتیک بر رشد S.mutans و S. sanguinis به روش لکه&lrm;گذاری در آگار و انتشار در چاهک و بر مهار بیوفیلم سنجیده شد. یافته‌ها: از 150 پلاک مورد بررسی،  65 جدایه (43/33درصد) S. mutans و 40 مورد (26/67درصد) S. sanguinis جداسازی شد. جدایه‌های S. mutans  (0/43=OD)، بیوفیلم قوی تری به نمایش گذاشتند. نتایج بررسی TEM، باکتریوفاژ لیتیک متعلق به خانواده Siphoviridae  را نشان داد که اثر مهاری خوبی بر رشد S. mutans و S. sanguinis داشت و تا 96 درصد قادر به مهار تشکیل بیوفیلم بود. استنتاج: باتوجه به اندازه ریز ذرات فاژ که می&lrm;توانند قدرت نفوذ خوبی برای ورود به لایه‌های بیوفیلم داشته باشند، می‌توان به توانایی فاژ به عنوان روشی برای مبارزه با پلاک دندان اشاره نمود.   Background and purpose: Despite advances in oral health and dental industry, tooth decay remains one of the most common oral diseases. One of the new methods to combat dental plaque, which is the main cause of caries, is using specific lytic bacteriophage. This study aimed to investigate the effect of isolated specific lytic phage against growth and biofilm inhibition of Streptococcus mutans and Streptococcus sanguinis isolated from decayed dental plaque samples. Materials and methods: In this descriptive cross-sectional study, dental plaque samples were cultured in MSA-specific medium to isolate S. mutans and S. sanguinis. Suspicious isolates were examined by biochemical tests and finally confirmed molecularly by PCR. The ability to form biofilm was measured by crystal violet colorimetry on a microtiter plate. Lytic bacteriophage was isolated from urban raw sewage using double layer agar method and phage morphology was examined by TEM electron microscopy. The effect of lytic phage on the growth of S. mutans and S. sanguinis was measured by agar spot and well diffusion and its inhibition effect on biofilm was assayed by microtiter plate method. Results: Out of 150 plaque samples, S. mutans and S. sanguinis strains were isolated from 65 (43.33%) and 40 (26.67%) samples, respectively. S. mutans isolates showed stronger biofilm formation (OD= 0.43). The results of TEM showed lytic bacteriophage belonging to Siphoviridae family with a good inhibitory effect on the growth of S. mutans and S. sanguinis that was able to inhibit biofilm formation up to 96%. Conclusion: Due to the small size of the phage particles that can have good penetration power to enter the biofilm layers, it can be concluded that the phage has the ability to fight dental plaque.   پلاک دندان, S. mutans, S. sanguinis, باکتریوفاژ, بیوفیلم dental plaque, S. mutans, S. sanguinis, bacteriophage, biofilm 76 87 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-14972-1&slc_lang=fa&sid=1 Zahra Rajabi زهرا رجبی z_rajabi.arshad@yahoo.com 1003194753284600150827 1003194753284600150827 No PhD in Microbiology, Zoonoses Research Center, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran . Food Microbiology Research Center, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran دکتری میکروبیولوژی، مرکز تحقیقات بیماری‌های مشترک انسان و دام ( زئونوز)، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران . مرکز تحقیقات میکروبیولوژی مواد غذایی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران MohammadReza Afradi محمد رضا افرادی mr.afradi90@gmail.com 1003194753284600150828 1003194753284600150828 No Msc in Food Microbiology, School of Public Health, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran.Food Microbiology Research Center, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran کارشناس ارشد میکروب شناسی مواد غذایی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران.مرکز تحقیقات میکروبیولوژی مواد غذایی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران Donya Alinejhad دنیا علی نژاد donya_alinejad@yahoo.com 1003194753284600150829 1003194753284600150829 No Assistant Professor, Department of Pediatric Dentistry, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran استادیار، گروه دندانپزشکی اطفال، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران Yousef Erfani یوسف عرفانی yerfani@tums.ac.ir 1003194753284600150830 1003194753284600150830 Yes Associate Professor, Department of Medical Laboratory, School of Allied Medical Sciences, Tehran University of Medical Science, Tehran, Iran دانشیار، گروه علوم آزمایشگاهی، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران