Journal of Mazandaran University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران
J Mazandaran Univ Med Sci
Medical Sciences
http://jmums.mazums.ac.ir
1
admin
1735-9260
1735-9279
fa
jalali
1401
8
1
gregorian
2022
11
1
32
214
online
1
fulltext
fa
شناسایی عفونت مایکوباکتریوم توبرکولوزیس کمپلکس در انسان به روش الایزای غیرمستقیم، با استفاده از پروتئینهای سبکوزن بهدستآمده از فیلتراسیون کشت Mtb سویه C
Identification of Mycobacterium Tuberculosis Complex Infection in Human By Indirect ELISA Using Low Molecular Weight Proteins from Culture Filtrate of Mtb Strain C
ميکروبيولوژي
Microbiology
پژوهشي-کامل
Research(Original)
<span style="font-size:12pt"><span style="line-height:85%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:"Times New Roman","serif""><span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Koodak""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.1pt">سابقه</span></span></span></span><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Koodak""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.1pt"> و هدف:</span></span></span></span> <span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">سل از مشکلات اصلی سلامت جهانی با مرگومیر بالاست. ایجاد یک روش شناسایی سریع و ارزان به خصوص در کشورهای درحالتوسعه، بسیار قابلتوجه است. ازاینرو در این مطالعه، طراحی سیستم الایزای غیرمستقیم با استفاده از آنتیژنهای با وزن مولکولی پایین، جداشده</span></span></span> <span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">از فیلتراسیون کشت مایکوباکتریوم<i> توبرکوزیس سویه </i></span></span></span><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:85%"><span style="color:black">C</span></span></span></i><i><span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">، </span></span></span></i><span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">جهت شناسایی عفونت </span></span></span><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:85%"><span style="color:black">Mycobacterium tuberculosis Complex</span></span></span></i><span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black"> در انسان، مورد هدف قرار گرفت.</span></span></span><span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:#0e101a"></span></span></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:12pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="line-height:85%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:"Times New Roman","serif""><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Koodak""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.1pt">مواد و روش</span></span></span></span><span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.1pt"></span></span></span></span><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Koodak""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.1pt">ها:</span></span></span></span> <span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">در این مطالعه، از پروتئینهای ترشحی<i> </i></span></span></span><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:85%"><span style="color:black">Mtb</span></span></span></i><i><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black"> سویه </span></span></span></i><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:85%"><span style="color:black">C</span></span></span></i><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black"> جداشده با </span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:85%"><span style="color:black">Sephadex-G50</span></span></span><span style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black"> بهعنوان آنتیژن هدف، در طراحی سیستم الایزا</span></span></span> <span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">استفاده شد. سپس نمونه سرم موارد بالینی دارای نتایج تست توبرکولین، کشت، اسمیر میکروسکوپی اسید فست و </span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:85%"><span style="color:black">PCR</span></span></span><span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">،</span></span></span> <span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">باهدف ردیابی آنتیبادی علیه این پروتئینهای سبکوزن،</span></span></span><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black"> توسط سیستم الایزای طراحیشده، موردبررسی قرار گرفتند.</span></span></span><span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black"></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:12pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="line-height:85%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:"Times New Roman","serif""><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Koodak""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">یافته</span></span></span></span><span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt"></span></span></span></span><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Koodak""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">ها:</span></span></span></span> <span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">از میان فرکشن های پروتئینی بهدستآمده از کروماتوگرافی، فرکشن دوم (</span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:85%"><span style="color:black">F2</span></span></span><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">) با غلظت تقریبی </span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:85%"><span style="color:black">mg/ml</span></span></span><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">7/0 و باندهای پروتئینی در محدوده </span></span></span><span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">40</span></span></span><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">-14 کیلودالتون در آنالیز </span></span></span><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:85%"><span style="color:black">SDS-PAGE (12.5%)</span></span></span><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">، بهعنوان آنتیژن هدف در طراحی سیستم الایزا مورداستفاده قرار گرفت. سیستم الایزای طراحیشده، 78درصد حساسیت و 92درصد ویژگی در شناسایی افراد مبتلا به سل ریوی داشت.</span></span></span><span lang="FA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black"></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:12pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="line-height:85%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="font-family:"Times New Roman","serif""><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Koodak""><span style="color:black"><span style="letter-spacing:-.2pt">استنتاج:</span></span></span></span> <span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black">نتایج حاصل از سیستم الایزای غیرمستقیم بر پایه پروتئینهای سبکوزن، با حساسیت و ویژگی بهدستآمده در این مطالعه، این فرضیه را پشتیبانی میکند که آنتیژنهای با وزن مولکولی پایین موجود در فیلتراسیون کشت </span></span></span><i><span dir="LTR" style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:85%"><span style="color:black">Mtb</span></span></span></i><span lang="AR-SA" style="line-height:85%"><span style="font-family:"B Zar""><span style="color:black"> میتوانند در تست الایزا بهعنوان ابزار شناسایی مفید در شناسایی بیماران مبتلابه سل ریوی مورداستفاده قرار گیرند.<span style="letter-spacing:-.2pt"></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:12pt"><span style="line-height:150%"><span style="font-family:"Times New Roman","serif""><b><span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%"><span style="font-family:"Arial","sans-serif""><span style="letter-spacing:-.2pt">Background and purpose:</span></span></span></span></b> <span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%">Tuberculosis is one of the major global health problems with high mortality. Establishing a rapid and low-cost identification method is significant, especially in developing <span style="letter-spacing:-.1pt">countries. In this study, we aimed to design an indirect ELISA system with low molecular weight antigens</span> secreted by </span></span><i><span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%">Mycobacterium tuberculosis</span></span></i><i> </i><span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%">strain<i> C</i>, for identification of </span></span><i><span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%">Mycobacterium tuberculosis </span></span></i><span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%">Complex</span></span> <span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%">infection in human.</span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:12pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="line-height:150%"><span style="text-autospace:none"><span style="font-family:"Times New Roman","serif""><b><span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%"><span style="font-family:"Arial","sans-serif"">Materials and methods:</span></span></span></b><b> </b><span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%">The secretory proteins from culture filtrate of <i>Mtb </i>strain C extracted by Sephadex-G50 were used as target antigen in designing an indirect ELISA system. Then, human sera with tuberculin skin test, culture, acid-fast bacilli smear, and PCR test results were selected to detect human serum antibodies against these low molecular weight proteins.</span></span></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:12pt"><span style="line-height:150%"><span style="font-family:"Times New Roman","serif""><b><span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%"><span style="font-family:"Arial","sans-serif"">Results:</span></span></span></b><b> </b><span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%">During gel chromatography and SDS-PAGE (12.5%) analysis, the purified protein F2 fractions with approximately 0.7 mg/ml and molecular weights in the range of 14-40 kDa were used as the target antigen in designing the indirect ELISA system. The ELISA system designed by F2 showed 78% sensitivity and 92% specificity in identifying tuberculosis.</span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:12pt"><span style="line-height:150%"><span style="vertical-align:top"><span style="font-family:"Times New Roman","serif""><b><span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%"><span style="font-family:"Arial","sans-serif"">Conclusion:</span></span></span></b><span style="font-size:10.0pt"><span style="line-height:150%"> The ELISA results based on low molecular weight proteins, with the sensitivity and specificity achieved in this study, might support the hypothesis that the <i>Mtb</i> culture filtrate antigens could be used as a rapid and sensitive assay in ELISA test for detection of pulmonary TB.<i></i></span></span></span></span></span></span><br>
مایکوباکتریوم توبرکلوزیس, پروتئینهای سبکوزن, SDS-PAGE, الایزای غیرمستقیم
Mycobacterium tuberculosis, low-molecular weight proteins, SDS-PAGE, indirect ELISA
90
101
http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-11-15540-1&slc_lang=fa&sid=1
Mozhgan
Khosrobeygi
مژگان
خسروبیگی
mozhibeygi1989@gmail.com
1003194753284600149340
1003194753284600149340
No
PhD Candidate in Microbiology, Department of Biological Sciences, Tehran North Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
دانشجوی دکترای میکروبیولوژی، گروه علوم زیستی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شمال، تهران، ایران
Nader
Mosavari
نادر
مصوری
n.mosavari@rvsri.ac.ir
1003194753284600149341
1003194753284600149341
Yes
Associate Professor, Department of Tuberculin and Mallein Production and Research, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Karaj, Iran
دانشیار، بخش تحقیق و تولید توبرکولین و مالئین، موسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی، البرز، کرج، ایران
Mitra
Salehi
میترا
صالحی
mitra_salehi_microbiology@yahoo.com
1003194753284600149342
1003194753284600149342
No
Assistant Professor, Department of Biological Sciences, North Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran
استادیار، گروه علوم زیستی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شمال، تهران، ایران
Naheed
Mojgani
ناهید
مژگانی
Dnmoj@yahoo.com
1003194753284600149343
1003194753284600149343
No
Assistant Professor, Department of Tuberculin and Mallein Production and Research, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Alborz, Iran
استادیار، بخش تحقیق و تولید توبرکولین و مالئین، موسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی، البرز، کرج، ایران
Majid
Akbari
مجید
اکبری
majakbari@yahoo.com
1003194753284600149344
1003194753284600149344
No
Assistant Professor, Department of Microbiology, Arak University of Medical Sciences, Arak, Iran
استادیار، گروه میکروبیولوژی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران