Journal of Mazandaran University of Medical Sciences

fa تاثیر پلاسمای غنی از پلاکت (PRP) بر روی تمایز سلول های بنیادی مشتق از پالپ دندان به سمت سلول های انسولین ساز پانکراس The Effect of Platelet-Rich Plasma (PRP) On the Differentiation of Dental Pulp-Derived Stem Cells into Pancreatic Insulin-Producing Cells بیوتکنولوژی Biotechnology پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف: سلول‌های بنیادی پالپ دندان (DPSC) با قابلیت تمایز به انواع مختلفی از سلول‌های فرد بالغ، چشم انداز جدیدی را در درمان انواع بیماری‌ها فراهم کرده است. با این حال بازدهی روش تمایز، برای تولید سلول‌های تولیدکننده انسولین (IPC) با چالش‌های مختلفی مواجه می‌باشد. در مطالعه حاضر، به تمایز سلول‌های بنیادی پالپ دندان به سمت سلول‌های تولید‌کننده انسولین با استفاده از پلاسمای غنی از پلاکت (PRP) پرداخته شده است. مواد و روش‌ها: در این مطالعه از نوع تجربی برای تولید سلول‌های IPC، در مرحله اول سلول‌های بنیادی پالپ دندان کشت داده شده‌اند و سپس برای تایید خصوصیات سلول‌های بنیادی، مورفولوژی سلول‌های بنیادی با مشاهده میکروسکوپی، بیان شاخص‌های CD90 و CD105 با فلوسایتومتری و پتانسیل تمایزسلول بنیادی به سمت چربی مورد ارزیابی قرار گرفت. بعد از تایید خصوصیت چند توانی سلول بنیادی، پروتکل 18 روزه تمایز به سمت سلول‌های تولیدکننده انسولین شروع شد. سپس ژن های <a name="_Hlk141732221">مربوط به اندوکرین پانکراسی شامل </a>insulin، pdx1، glut2 و glucagon با استفاده از روش Real_Time PCR، سنجش انسولین و سی_پپتید ترشح شده با استفاده از الایزا و بررسی اثر PRP بر روی حیات سلول ها با استفاده از تست زنده مانی سلولی ((MTT نیز مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته‌ها: نتایج نشان داد که با استفاده از پروتکل تمایزی نامبرده شده، در گروه تمایزی حاوی PRP، سلول‌ها با مورفولوژی شبیه به خوشه‌های جزایر لانگرهانس حاصل شده‌اند. بیان ژن‌های مربوط به اندوکرین پانکراسی در گروه تمایزی دارای PRP به‌صورت معناداری بالاتر از گروه‌های دیگر بوده است. هم‌چنین این سلول‌ها در دو گروه تمایزی دارای PRP و فاقد PRP بازدهی متفاوتی در مواجهه با غلظت‌های متفاوت گلوکز نسبت به ترشح انسولین و سی_ پپتید داشته‌اند. علاوه بر این نرخ تکثیر سلولی در گروه دارای PRP، بالاتر از سایر گروه‌ها بوده است. استنتاج: استفاده از DPSC و PRP بدلیل دردسترس بودن و عدم نیاز به روش‌های تهاجمی برای به‌دست آوردن این منابع و هم‌چنین ایمنی‌زایی پایین به‌دلیل استفاده از بافت‌های خود فرد به نظر می‌رسد یک روش هدفمند برای تولید سلول‌های ترشح‌کننده انسولین می‌باشد.   Background and purpose: Dental pulp stem cells (DPSCs) with the ability to differentiate into different types of adult cells have provided a new vision in the treatment of various diseases. However, different challenges remain with differentiation methods to produce insulin-producing cells (IPCs). In the present study, the differentiation of dental pulp stem cells into IPCs using platelet-rich plasma (PRP) has been addressed. Materials and methods: In this experimental study for generation of IPCs, DPSCs were cultured in the first step, and then to confirm the characteristics of stem cells, the morphology of stem cells was confirmed by microscopic observation, and then the expression of CD90 and CD105 markers assessed by flow cytometry. After confirming the pluripotency of the stem cells, a 18days differentiation protocol into IPCs began. Following that, pancreatic endocrine genes such as insulin, pdx1, glut2 and glucagon were analyzed using Real-Time PCR. Insulin and C-peptide release was assessed using ELISA. To investigate the effect of platelet-rich plasma on cell viability, the MTT test was performed. Results: Results showed that the use of the above-mentioned differentiation protocol, in the differentiation group containing PRP, the cells resembled Langerhans islet clusters. The expression of pancreatic endocrine genes in the differentiation group containing PRP was significantly higher than the other groups. Additionally, in two differentiation groups with and without PRP, the cells responded differently to glucose concentrations compared to insulin and C-peptide release. Furthermore, the rate of cell proliferation in the differentiation group containing PRP was higher than the other groups. Conclusion: Based on the availability of dental pulp stem cells and PRP, the absence of invasive methods for obtaining these resources, as well as the low immunogenicity due to the use of the patient's tissues, seems to be appropriate method for producing insulin-secreting cells.   سلول‌های بنیادی پالپ دندان, پلاسمای غنی از پلاکت, سلول‌های تولید‌کننده انسولین, تمایز dental pulp stem cells, platelet rich plasma, insulin producing cells, differentiation 1 12 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-15223-1&slc_lang=fa&sid=1 Reza Eshaghi-Gorji رضا اسحاقی گرجی rezaeshaghi1999@yahoo.com 1003194753284600162529 1003194753284600162529 No Student in Student in Laboratory Sciences, Student Research Committee, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran دانشجوی کارشناسی علوم آزمایشگاهی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Seyed Ehsan Enderami سید احسان اندرامی ehsan.enderami@gmail.com 1003194753284600162530 1003194753284600162530 Yes Assistant Professor, Immunogenetics Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran and Department of Medical Biotechnology, Faculty of Advanced Technologies in Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran استادیار، مرکز تحقیقات ایمونوژنتیک، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران و گروه زیست فناوری پزشکی، دانشکده فناوری های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Reyhaneh Nassiri Mansour ریحانه نصیری منصور nassirireyhane@gmail.com 1003194753284600162531 1003194753284600162531 No Ph.D. Candidate of Tissue Engineering, Student Research Committee, Faculty of Advanced Technologies in Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran دانشجوی دکتری تخصصی مهندسی بافت، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده فناوری‌های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Hadi Hassannia هادی حسن نیا hadi3977@yahoo.com 1003194753284600162532 1003194753284600162532 No Assistant Professor, Immunogenetics Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran and Department of Laboratory Science, Amol Faculty of Paramedicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Amol, Iran استادیار، مرکز تحقیقات ایمونوژنتیک، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران و گروه علوم آزمایشگاهی، دانشکده پیراپزشکی آمل، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، آمل، ایران Mohammadfoad Abazari محمدفواد اباذری Foadabazari@outlook.com 1003194753284600162533 1003194753284600162533 No Ph.D. Candidate of Neurosciences, Division of Medical Sciences, Island Medical Program, University of British Columbia, Victoria, BC, Canada دانشجوی دکتری تخصصی علوم اعصاب، شاخه علوم پزشکی، برنامه پزشکی جزیره ونکور، دانشگاه بریتیش کلمبیا، ویکتوریا، کانادا