Journal of Mazandaran University of Medical Sciences

fa طراحی و توسعه‌ی سودوتایپ لنتی ویروس برای کروناویروس سندرم حاد تنفسی 2 (SARS-CoV-2) Design and Development of a Pseudotyped-lentivirus for Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 (SARS-CoV-2) بیوتکنولوژی Biotechnology پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف: شبه‌ویروس‌ها به‌دلیل ایمنی و تطبیق‌پذیری، ابزار مفیدی برای ساخت واکسن‌ها و داروهای درمانی، به‌ویژه برای ویروس‌های نوظهور هستند. SARS-CoV-2 به‌دلیل مرگ‌ومیر بالا و انتقال راحت، باید تحت شرایط ایمنی‌زیستی سطح سه قرار گیرد که همین موضوع روند ساخت واکسن‌ها و داروهای درمانی را در بسیاری از مراکز تحقیقاتی، دشوار کرده است. هدف از این مطالعه تولید سودوتایپ لنتی ویروس است که در تست خنثی‌سازی ویروس بر مبنای شبه‌ویروس در شرایط سطح ایمنی‌زیستی دو، بتوان از آن استفاده کرد. مواد و روش‌ها: روی ژنوم HIV-1، ژن پروتئین اسپایک SARS-CoV-2 قرار داده شد. برای تأیید ورود از تست‌های فلوسایتومتری، میکروسکوپ الکترونی و ایمونوفلورسانس استفاده شد. در نهایت، قدرت خنثی‌سازی سرم بیماران بهبودیافته‌ از کووید19 با استفاده از تست خنثی‌سازی ویروس بر مبنای شبه‌ویروس اندازه‌گیری شد. یافته‌ها: نتایج تست‌های فلوسایتومتری، میکروسکوپ الکترونی و ایمونوفلورسانس ورود ژن اسپایک را تأیید کرد. همچنین، سرم بیماران بهبودیافته قدرت خنثی‌کنندگی بسیار بالاتری را نسبت به سرم گروه کنترل مواجه‌نشده با SARS-CoV-2 نشان داد. استنتاج: <a name="_Hlk149672321">نتایج این مطالعه نشان داد که با استفاده از سودوتایپ لنتی ویروس تولید شده می‌توان قدرت خنثی‌کنندگی سرم بیماران را اندازه‌گیری کرد و تست خنثی‌سازی ویروس بر مبنای شبه‌ویروس، جایگزین مناسبی برای تست خنثی‌سازی ویروس بر مبنای ویروس زنده‌ </a>SARS-CoV-2 است. همچنین، این تست می‌تواند در مطالعات ارزیابی واکسن‌ها یا داروهای درمانی برای مبارزه با این ویروس کشنده کارآمد باشد.   Background and purpose: Pseudoviruses, due to their immunity and adaptability, are valuable tools for developing vaccines and therapeutic drugs, particularly for emerging viruses. SARS-CoV-2, due to its high mortality rate and ease of transmission, should be handled under Biosafety Level 3 conditions, making the development of vaccines and therapeutic drugs challenging in many research centers. The present study aimed to produce a lentivirus pseudotype that can be used in neutralization assays based on pseudovirus under Biosafety Level 2 conditions. Materials and methods: The SARS-CoV-2 Spike protein gene was inserted into the HIV-1 genome. Confirmation of entry was obtained through flow cytometry, electron microscopy, and immunofluorescence. Finally, the neutralization capacity of convalescent COVID-19 patients' sera was measured using the pseudovirus-based neutralization assay. Results: The results of flow cytometry, electron microscopy, and immunofluorescence confirmed the entry of the Spike gene. Furthermore, the sera of convalescent patients showed significantly higher neutralizing capacity compared to the control group that had not been exposed to SARS-CoV-2. Conclusion: The results of this study demonstrated that the use of the produced lentivirus pseudotype can measure the neutralizing capacity of patients' sera, and the pseudovirus-based neutralization assay serves as a suitable alternative for assessing the neutralization of live SARS-CoV-2. Moreover, this test can effectively evaluate vaccines or therapeutic drugs for combating this deadly virus.   SARS-CoV-2, Lenti-SARS-Cov2, کووید19, سودوویروس COVID-19, Lenti-SARS-CoV-2, Pseudovirus, SARS-CoV-2 77 85 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-11-12901-2&slc_lang=fa&sid=1 Hadi Hassannia هادی حسن نیا hadi3977@yahoo.com 1003194753284600161893 1003194753284600161893 No Assistant Professor, Immunogenetics Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran and Department of Paramedicine, Amol Faculty of Paramedical Sciences, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran استادیار، مرکز تحقیقات ایمنوژنتیک، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران و گروه پیراپزشکی، دانشکده‌ی پیراپزشکی آمل، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Seyed Ehsan Enderami سید احسان اندرامی ehsan.enderami@gmail.com 1003194753284600161894 1003194753284600161894 Yes Assistant Professor, Department of Medical Biotechnology, Faculty of Advanced Technologies in Medical Sciences, Mazandarn University of Medical Sciences, Sari, Iran استادیار، گروه زیست‌فناوری پزشکی، دانشکده‌ی فناوری‌های نوین، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Reyhaneh Nassiri Mansour ریحانه نصیری منصور nassirireyhane@gmail.com 1003194753284600161895 1003194753284600161895 No Ph.D. Student in Tissue Engineering, Department of Tissue Engineering, Student Research Committee, School of Advanced Technologies in Medical Sciences, Sari, Iran دانشجوی دکتری تخصصی مهندسی بافت، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده‌ی فناوری‌های نوین، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Mohamad Eftekhary محمد افتخاری eftekharymohamad@gmail.com 1003194753284600161896 1003194753284600161896 No Assistant Professor, Department of Medical Biotechnology, Faculty of Paramedicine, Guilan University of Medical Sciences, Rasht, Iran استادیار، گروه زیست‌فناوری پزشکی، دانشکده‌ی پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران Mohamadfoad Abazari محمدفواد اباذری Foadabazari@outlook.com 1003194753284600161897 1003194753284600161897 No Ph.D. Candidate of Neurosciences, Division of Medical Sciences, Island Medical Program, University of British Columbia, Victoria, BC, Canada دانشجوی دکتری تخصصی علوم اعصاب، شاخه علوم پزشکی، برنامه پزشکی جزیره ونکور، دانشگاه بریتیش کلمبیا، ویکتوریا، کانادا Reza salarinia رضا سالاری نیا rezasalarinia@gmail.com 1003194753284600161898 1003194753284600161898 No Assistant Professor, Department of Molecular Medicine, School of Medicine, North Khorasan University of Medical Sciences, Bojnurd, Iran استادیار، گروه فناوری‌های نوین، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی خراسان شمالی، بجنورد، ایران