Journal of Mazandaran University of Medical Sciences

fa تاثیر پنتوکسی فیلین بر آسیب پارامترهای اسپرمی القاء شده توسط اتوپوزاید در موش Influence of Pentoxifylline on the Damage of Sperm Parameters Induced by Etoposide in Mice فیزیولوژی جانوری Animal physiology پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف: اگرچه پیشرفت‌های اخیر در درمان سرطان باعث افزایش بقای بیماران و بهبود کیفیت زندگی شده است، قرار گرفتن در معرض داروهای شیمی درمانی منجر به مشکلات باروری قابل توجهی درکودکان سرطانی می‌شود. اتوپوزاید یک داروی شیمی درمانی است که به‌طور گسترده در درمان انواع سرطان استفاده می‌شود؛ اما با این حال سلول‌های سالم، به ویژه سلول‌های زایای مردانه را که درحال تکثیر سریع و مداوم هستند از بین می‌برد ومنجر به ناباروری می‌شود. مطالعه حاضر با هدف بررسی اثر آنتی‌اکسیدانتی پنتوکسی فیلین بر اختلال ناشی از اتوپوزاید بر پارامتر‌های اسپرمی موش‌های نر بالغ نژاد NMRI، انجام پذیرفت. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، 24 سر موش نر بالغ نژاد (NMRI) Naval Medical Research Institute با میانگین وزنی 2±35 گرم (6n=) به‌طور تصادفی به چهار گروه کنترل، اتوپوزاید (mg/kg 1)، پنتوکسی‌فیلین (mg/kg 100) و اتوپوزاید+ پنتوکسی‌فیلین تقسیم‌‌بندی و روزانه به مدت 35 روز به صورت تزریق داخل صفاقی تیمار شدند. در پایان دوره تیمار، موش‌ها با محلول ترکیبی کتامین زایلازین، بی‌هوش و ناحیه دمی اپیدیدیم چپ به پلیت 3 سانتی‌متری حاوی محیط کشت (HamsF10) در انکوباتور 37 درجه سانتی‌گراد منتقل شد تاجهت بررسی پارامترهای اسپرمی شامل تعداد، تحرک، مورفولوژی، قابلیت حیات و طول دم اسپرم مورد استفاده قرار گیرد. دناتوره شدن DNA اسپرم با استفاده از رنگ‌آمیزی آکریدین ‌اورنژ و همچنین میزان بلوغ هسته اسپرم به روش رنگ‌آمیزی آنیلین‌بلو سنجش شد. بیضه چپ خارج و جهت محاسبه تولید روزانه اسپرم (DSP)Daily sperm production استفاده شد. هم‌چنین بعد از خون گیری از قلب و آماده‌سازی سرم، میزان ظرفیت آنتی‌اکسیدانتی تام(TAC)Total antioxidant capacity و سطح مالون‌دی‌آلدئید (MDA)Malondialdehyde  سنجیده شد. داده‌ها با نرم‌افزار SPSS، روش آنالیز واریانس یک طرفه (One-Way ANOVA) و تست Tukey مورد تجزیه و تحلیل آماری قرار گرفت و تفاوت میانگین‌ها در سطح 0/05>P معنی‌دار در نظر گرفته شد. یافته‌ها: کاهش معنی‌داری در میانگین درصد اسپرم‌های پیش‌‌رونده و افزایش معنی‌داری در میانگین درصد اسپرم‌های درجا و ساکن در گروه اتوپوزاید نسبت به گروه کنترل مشاهده شد (0/001P<). هم‌چنین کاهش معنی‌داری در میانگین تعداد، قابلیت حیات، تولید روزانه، طول دم و مورفولوژی طبیعی اسپرم در گروه اتوپوزاید نسبت به گروه کنترل مشاهده شد(0/001>P). ظرفیت آنتی اکسیدانتی تام نیز در گروه اتوپوزاید درمقایسه با گروه کنترل کاهش معنی‌داری یافت(0/001>P)، در حالی‌که سطح مالون دی آلدئید سرم در گروه اتوپوزاید در مقایسه با گروه کنترل افزایش معنی‌‌داری نشان داد (0/001>P). تفاوت معنی‌داری در میانگین درصد آسیب DNA اسپرم و هم‌چنین بلوغ هسته اسپرم در گروه اتوپوزاید نسبت به گروه کنترل مشاهده نشد (0/05<P). تیمار همزمان پنتوکسی‌فیلین با اتوپوزاید پارامترهای فوق‌الذکر را در مقایسه با گروه اتوپوزاید به‌طور معنی‌داری بهبود بخشید. استنتاج: نتایج حاضر درگروه تیمار با اتوپوزاید نشان‌ دهنده، کاهش معنی‌داری در پارامترهای اسپرم و ظرفیت آنتی‌اکسیدانتی تام و هم‌چنین افزایش معنی‌داری در سطح مالون‌دی‌آلدئید بود. به نظر می‌رسد که سمیت القاء شده توسط اتوپوزاید از طریق ایجاد آپوپتوز، القاء استرس‌اکسیداتیو و پراکسیداسیون لیپیدی، اصلی‌ترین عامل ایجادکننده‌ ‌آسیب‌های وارد شده باشد،که با توجه به نتایج حاصل، پنتوکسی‌فیلین احتمالا با پتانسیل آنتی‌اکسیدانتی و کاهش استرس‌ اکسیداتیو، اثر سوء اتوپوزاید را بر پارامترهای اسپرمی و استرس اکسیدتیو کاهش داده است.   Background and purpose: Although recent advances in cancer treatment have increased patient survival and improved quality of life, exposure to chemotherapy drugs leads to significant fertility problems in children with cancer. Etoposide is a chemotherapy drug that is widely used in the treatment of various types of cancer; However, it destroys healthy cells, especially male germ cells that are multiplying rapidly and continuously, and leads to infertility. In the present study, the antioxidant effect of pentoxifylline on the disorder caused by etoposide on the sperm parameters of adult male NMRI mice was investigated. Materials and methods: 24 adult male NMRI mice with an average weight of 35±2gr (n=6) were randomly allocated to the following groups (n=6): control, etoposide (1mg/kg), pentoxifylline (100mg/kg) and etoposide + pentoxifylline and treated with daily intraperitoneal injection for 35 days. At the end of the treatment period, mice were anesthetized with ketamine-xylazine solution, and the left caudal region of epididymis was transferred to a 3cm plate containing culture medium (HamsF10) in a 37°C incubator to examine sperm parameters including the number, motility, morphology, viability and tail length of the sperm. The denaturation of sperm DNA using acridine orange staining and the maturation rate of sperm nucleus using aniline blue staining method was measured. The left testicle was removed and used to calculate daily sperm production. After taking blood from the heart and preparing serum, total antioxidant capacity, and malondialdehyde level were also measured. The data were statistically analyzed with SPSS software, one-way ANOVA, and Tukey's test, and the difference in means was considered significant at the P<0.05 level. Results: A significant decrease in the mean percentage of progressive sperms and a significant increase in the mean percentage of in situ and immotile sperms were observed in the etoposide group compared to the control group (P<0.001). Also, a significant decrease in the mean count, viability, daily sperm production, tail length, and normal morphology of sperm was observed in the etoposide group compared to the control group (P<0.001). The total antioxidant capacity also decreased significantly in the etoposide group compared to the control group (P<0.001). The level of serum malondialdehyde showed a significant increase in the etoposide group compared to the control group (P<0.001). There was no significant difference in the mean percentage of sperm DNA damage and sperm nucleus maturation in the etoposide group compared to the control group (P<0.05). Simultaneous treatment of pentoxifylline with etoposide significantly improved the aforementioned parameters compared to the etoposide group. Conclusion: The results in the etoposide treatment group showed a significant decrease in sperm parameters and total antioxidant capacity, as well as a significant increase in malondialdehyde levels. The toxicity induced by etoposide through the induction of apoptosis, oxidative stress, and lipid peroxidation is considered the primary cause of the resulting damage, as evidenced by the study results. Pentoxifylline is believed to have mitigated the harmful effects of etoposide on sperm parameters and oxidative stress by leveraging its antioxidant properties to reduce oxidative stress.   اتوپوزاید, پنتوکسی‌فیلین, اسپرم, استرس‌اکسیداتیو, موش etoposide, pentoxifylline, sperm, oxidative stress, mice 28 38 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-12380-2&slc_lang=fa&sid=1 Monireh Mahmoodi منیره محمودی m-mahmoodi@araku.ac.ir 1003194753284600168190 1003194753284600168190 Yes Assistant Professor, Department of Biology, Faculty of Science, Arak University, Arak 3848177584, Iran استادیار، گروه زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه اراک، اراک ۳۸۴۸۱۷۷۵۸۴، ایران Zahra Esmaeili زهرا اسماعیلی zhraaaa7447@gmail.com 1003194753284600168191 1003194753284600168191 No MSc in Biology, Faculty of Science, Arak University, Arak 3848177584, Iran کارشناسی ارشد زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه اراک، اراک ۳۸۴۸۱۷۷۵۸۴، ایران