Journal of Mazandaran University of Medical Sciences

fa بررسی اثرات محافظتی روتین بر عارضه کولمیک نفروپاتی در موش‌های صحرایی کلستاتیک Investigating the Protective Effects of Rutin on Cholemic Nephropathy in Cholestatic Rats سم شناسی toxicology گزارش کوتاه Brief Report سابقه و هدف: کلستاز کبدی یکی از علل عمده از کار افتادگی کبد است. کلستاز می‌تواند علاوه برکبد باعث اختلال در ارگان‌های دیگر بدن ازجمله کلیه‌ها گردد. به عارضه کلیوی که در نتیجه آسیب کبدی ایجاد می‌شود کولمیک نفروپاتی می‌گویند. به‌‌طورکلی یکی از مکانیسم‌هایی که در ایجاد این آسیب نقش دارد، استرس اکسیداتیو است. استرس اکسیداتیو به شرایطی اطلاق می‌شود که در آن نسبت رادیکال‌های آزاد در سلول بیش‌تر از مقدار آنزیم‌های آنتی‌اکسیدانی باشد. به‌طور معمول استفاده از گیاهان دارویی برای اهداف درمانی و پیشگیری از بیماری‌ها براساس مواد آنتی‌اکسیدانی موجود در آن‌ها امری رایج است. روتین (ROT) یک بیوفلانوئید است که در مواد مغذی یافت می‌‌شود از آن‌جاکه روتین یک آنتی‌اکسیدان می‌باشد از این رو پژوهش حاضر با هدف بررسی اثرمحافظتی روتین برآسیب کلیوی متعاقب کلستاز کبدی در موش‌های صحرایی انجام پذیرفت. مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، 50 رت نر از نژاد ویستار استفاده شد. رت‌ها در 5 گروه آزمایشی &rlm;&rlm;(&rlm;10=n&lrm;&rlm;) به‌صورت تصادفی تقسیم شدند. کلستاز در رت‌ها با بستن مجاری مشترک صفراوی القا شد. روتین با دوزهای مختلف (30-60-120 mg/kg) روزانه به‌صورت گاواژ به مدت 14 روز به موش‌های بیمار تجویز شد. در پایان دوره‌ی &rlm;مداخله، پس از بیهوش کردن حیوانات بافت‌های کلیه حیوانات را خارج کرده و نمونه‌های سرم و ادرار نیز جهت انجام سایر تست‌ها جمع‌آوری شدند. فعالیت آنزیم‌های آنتی‌اکسیدانی نظیر کاتالاز (CAT) سوپر اکسید دیسموتاز (SOD) و گلوتاتیون پروکسیداز (GPx) در بافت هموژنه کلیه با استفاده ازکیت الایزا و براساس دستورالعمل کیت اندازه‌گیری شد. جهت بررسی میزان گونه&rlm;های فعال اکسیژن (ROS) و سطح مالون دی‌آلدهید (MDA) 500 میلی&rlm;گرم از بافت کلیه به 5 میلی&rlm;لیتر در محلول خنک شده‌ی KCl اضافه، و سپس با دستگاه هموژنایزر هموژن شد. اثرات محافظتی روتین با بررسی فاکتورهای بیوشیمیایی سرم (BUN،Creatinine) و ادرار (Glucose،Protein)، هم‌چنین شاخص‌های استرس اکسیداتیو (ROS MDA) و فعالیت آنزیم‌های آنتی‌اکسیدانی (GPX، SOD و CAT) مورد سنجش قرار گرفت. تجزیه و تحلیل آماری با استفاده از نرم‌افزار گراف پد انجام شد و از آزمون One way ANOVA و Tukey’sاستفاده گردید. یافته‌ها: نتایج حاصل از این مطالعه نشان دادکه پس از القای کلستاز در رت‌ها، فاکتورهای بیوشیمیایی ادرار (Glucose،Protein) به‌طور معنی‌داری افزایش یافت در حالی که تیمار حیوانات با Rot اثرات کاهش دفع ادراری Glucose و Protein را نشان داد (0/05<P). علاوه بر این درحیوانات کلستاتیک فاکتورهای بیوشیمیایی سرم (BUN،Creatinine) نیز افزایش معنادار نسبت به‌گروه کنترل مشاهده شد که پس از تجویز Rot سطح این بیومارکرها نسبت به گروه کلستاتیک به‌طور معنی‌داری کاهش یافت(0/05<P). در بررسی مارکرهای استرس اکسیداتیو مشاهده شد که میزان ROS و MDA درنمونه بافتی در حیوانات کلستاتیک نسبت به گروه کنترل افزایش معنی‌داری یافته بود به‌طوری‌که Rot توانسته بود میزان این مارکرها را در گروه دریافت‌کننده در مقایسه با گروه کلستاتیک به‌طور معنی‌داری کاهش دهد(0/05<P). در ادامه نیز مشخص شد که میزان فعالیت آنزیم‌های CAT، GPX و SOD بافت کلیه در گروه کلستاتیک نیز نسبت به گروه کنترل به طرز معنی‌داری کاهش یافته بود که پس از تجویز Rot میزان فعالیت این آنزیم‌ها در مقایسه با گروه کلستایک افزایش معناداری داشت(0/05<P). استنتاج: بررسی حاضر نشان می‌دهد که پس از تجویز روتین با دوزهای مختلف اثر بهبود دهندگی آن برکاهش فاکتورهای سرمی، ادراری و شاخص‌های استرس اکسیداتیو و از طرف دیگر افزایش فعالیت آنزیم‌های آنتی‌اکسیدانی در آسیب کلیوی ناشی از نارسایی مزمن کبدی مشهود بود.   Background and purpose: Hepatic cholestasis is a primary cause of liver failure and can lead to complications in other organs, including the kidneys. Kidney damage resulting from liver dysfunction is known as cholemic nephropathy. Oxidative stress is a key mechanism in causing this damage. Oxidative stress occurs when the ratio of free radicals to antioxidant enzymes is imbalanced, with free radicals prevailing. Medicinal plants are often used to treat and prevent diseases due to their antioxidant properties. Rutin (ROT), a bioflavonoid with antioxidant properties found in certain foods, may offer protective effects. Therefore, this study aimed to investigate the protective effect of rutin on kidney damage following hepatic cholestasis in rats. Materials and methods: This experimental study included 50 Wistar rats, randomly divided into 5 experimental groups (n=10). Cholestasis was induced by ligating the common bile duct. Rutin was administered daily via gavage in different doses (30, 60, and 120 mg/kg) to the affected rats for 14 days. At the end of the intervention, the animals were anesthetized, tissue samples were collected, and serum and urine samples were obtained for further testing. Antioxidant enzyme activities, including catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), and glutathione peroxidase (GPx), were measured in kidney tissue homogenates using an ELISA kit, following the manufacturer’s instructions. For assessing reactive oxygen species (ROS) and malondialdehyde (MDA) levels, 500 mg of kidney tissue was homogenized in 5 ml of cooled KCl solution. The protective effects of rutin were evaluated by analyzing serum biochemical factors (BUN and creatinine), urine parameters (glucose and protein), oxidative stress markers (ROS and MDA), and antioxidant enzyme activities (GPx, SOD, and CAT). Statistical analysis was performed using GraphPad software, with one-way ANOVA and Tukey’s test. Results: The study results showed that, following cholestasis induction, urinary biochemical factors (glucose and protein) significantly increased. However, rutin treatment significantly reduced urinary glucose and protein excretion (P<0.05). Additionally, in cholestatic animals, serum biochemical factors (BUN and creatinine) increased markedly compared to the control group, but following rutin administration, these biomarker levels significantly decreased compared to the cholestatic group (P<0.05). Oxidative stress marker analysis revealed that ROS and MDA levels were significantly elevated in the kidney tissues of cholestatic animals compared to controls; rutin treatment significantly reduced these levels in the treated group compared to the cholestatic group (P<0.05). Furthermore, GPx, CAT, and SOD enzyme activities were significantly reduced in the cholestatic group, but after rutin administration, these enzyme activities significantly increased compared to the cholestatic group (P<0.05). Conclusion: The present study demonstrates that rutin administration, at various doses, had a beneficial effect in reducing serum and urinary factors and oxidative stress markers while enhancing antioxidant enzyme activity in kidney damage resulting from chronic liver failure.   روتین, شاخص‌های استرس اکسیداتیو, کلستاز,کولمیک نفروپاتی, کلیه rutin, oxidative stress indicators, cholestasis, cholemic nephropathy, kidney 72 80 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-16190-4&slc_lang=fa&sid=1 Zeynab Jashni زینب جشنی Z.jashni@yahoo.com 1003194753284600173890 1003194753284600173890 No Pharmacy Student, Student Research Committee, Lorestan University of Medical Sciences, Khorramabad, Iran دانشجوی داروسازی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی لرستان، خرم آباد، ایران Mohammad Ghaffari Nasab محمد غفاری نسب Ghaffari.72m@gmail.com 1003194753284600173891 1003194753284600173891 No MSc in Physiology, School of Medicine, Research Center of Physiology and Pharmacology, Rafsanjan University of Medical Sciences, Kerman, Iran کارشناسی ارشد فیزیولوژی، دانشکده پزشکی، مرکز تحقیقات گروه فیزیولوژی و فارماکولوژی، دانشگاه علوم پزشکی رفسنجان، کرمان، ایران Iraj Salimi Kia ایرج سلیمی کیا irajsalimikia@yahoo.com 1003194753284600173892 1003194753284600173892 No Associate Professor, Department of Pharmacognosy, Faculty of Pharmacy, Razi Herbal Medicine Research Center, Lorestan University of Medical Sciences, Khorramabad, Iran دانشیار، گروه فارماکوگنوزی، دانشکده داروسازی، مرکز تحقیقات داروهای گیاهی رازی، دانشگاه علوم پزشکی لرستان، خرم آباد، ایران Alimohammad Maleki علی محمد ملکی Dr.alimaleki58@yahoo.com 1003194753284600173893 1003194753284600173893 No Assistant Professor, Department of Pharmacotherapy, Faculty of Pharmacy, Lorestan University of Medical Sciences, Khorramabad, Iran استادیار، گروه فارماکوتراپی، دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی لرستان، خرم آباد، ایران Soosan Abdollahi سوسن عبدالهی Abdollahi.s@lums.ac.ir 1003194753284600173894 1003194753284600173894 No Assistant Professor, Department of Pharmaceutics, Faculty of Pharmacy, Lorestan University of Medical Sciences, Khorramabad, Iran استادیار، گروه کنترل دارو، دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی لرستان، خرم آباد، ایران Hamidreza Mohammadi حمیدرضا محمدی hamidrezamohammadi65@yahoo.com 1003194753284600173895 1003194753284600173895 Yes Assistant Professor, Department of Toxicology, Faculty of Pharmacy, Razi Herbal Medicine Research Center, Lorestan University of Medical Sciences, Khorramabad, Iran استادیار،گروه فارماکولوژی و سم شناسی، دانشکده داروسازی، مرکز تحقیقات داروهای گیاهی رازی، دانشگاه علوم پزشکی لرستان، خرم آباد، ایران