fa اثر فلاونوئید تام موجود در عصاره متانولی برگ کاسنی بر القای تمایز سلول‌های بنیادی 19P به سلول‌های انسولین‌ساز داروسازی Pharmacy پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف: با توجه به نقش مؤثر فلاونوئیدهای گیاهی در پیشگیری و درمان دیابت قندی، در این پژوهش القای تمایز سلول‌های بنیادی 19P به سلول‌های انسولین‌ساز تحت تأثیر فلاونوئید تام عصاره متانولی برگ کاسنی مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش‌ها: ابتدا عصاره متانولی از فلاونوئیدهای برگ گیاه کاسنی تهیه و سپس تعیین غلظت شد. اجسام شبه جنینی (Embryoid bodies یا EB) حاصل از کشت معلق سلول‌های 19P در محیط کشت α-MEM حاوی 15 درصد سرم جنین گاو به مدت سه روز کشت داده شدند. به منظور القای تمایز این سلول‌ها، به مدت 12 روز با غلظت‌های 50، 100 و 200 میکروگرم بر میلی‌لیتر فلاونوئید تام عصاره متانولی برگ کاسنی تیمار شدند. سلول‌های 19P و اجسام شبه جنینی تیمار نشده به عنوان شاهد در نظر گرفته شد. از تکنیک‌های رنگ‌آمیزی دیتیزون (Dithizone یا DTZ)، ایمنوفلورسنس و RT-PCR (Real-time polymerase chain reaction) جهت شناسایی سلول‌های تمایز یافته استفاده شد. یافته‌‌ها: سلول‌های 19P تمایز یافته با غلظت‌های مختلف عصاره نسبت به رنگ‌آمیزی دیتیزون پاسخ مثبت دادند. بیشترین درصد سلول‌های دیتیزون مثبت در غلظت 100 میکروگرم بر میلی‌لیتر عصاره حاصل شد. روش ایمنوفلورسنس نشان داد که سلول‌های 19P تمایز یافته قادر به بیان نشانگرهای اختصاصی سلول‌های بتای پانکراس هستند. بیان ژن Pdx-1 (Pancreatic duodenal homeobox-1) در این سلول‌ها توسط تکنیک RT-PCR به اثبات رسید. استنتاج: فلاونوئید تام عصاره متانولی برگ کاسنی قادر به القای تمایز سلول‌های بنیادی 19P به سلول‌های انسولین‌ساز است. Background and purpose: Regarding the effective role of plant flavonoids in the prevention and treatment of diabetes mellitus, in this investigation, induction of P19 stem cells differentiation into insulin producing cells by flavonoids of methanol extract of Cichorium intybus L. leaf was examined. Materials and methods: Initially, flavonoids of methanol extract of Cichorium intybus L. leaf were concentrated. The P19-derived embryonic bodies were cultured in α-MEM (Minimum Essential Medium) containing 15% fetal bovine serum for three days. To induce the differentiation, the cells treated with the concentrations of 50, 100 and 200 µg/ml of flavonoids of methanol extract of Cichorium intybus L. leaf for 12 days. Untreated P19 cells and embryonic bodies were used as controls. Dithizone staining, immunoflorecence and real-time polymerase chain reaction (RT-PCR) techniques were used to demonstrate the differentiated cells. Results: Differentiated P19 cells by different concentrations of extract shown positive reaction to dithizone staining. Most percentage of positive dithizone cells was reached in concentration of 100 µg/ml. Immunoflorecence method showed that differentiated P19 cells were able to express the pancreas beta cell-specific markers. Pdx-1 gene expression in the cells was demonstrated by RT-PCR technique. Conclusion: The flavonoids of methanol extract of Cichorium intybus L. leaf are able to induce differentiation of P19 stem cells to insulin producing cells. فلاونوئید تام عصاره متانولی برگ کاسنی, سلول‌های 19P, سلول‌های انسولین‌ساز, ژن Pdx-1, سلول‌های بتای پانکراس Methanol extract, flavonoid, Cichorium intybus L. leaf, P19 cells, insulin-producing cells, Pdx-1 gene, pancreas beta cells 93 100 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-29-145&slc_lang=fa&sid=1 Maryam Ebrahiminia مریم ابراهیمی‌نیا ebrahiminia.maryam@yahoo.com 100319475328460035961 100319475328460035961 Yes علوم پزشکی مازندران Fariba Esmaeili فریبا اسماعیلی 100319475328460035962 100319475328460035962 No علوم پزشکی مازندران Navaz Kharazian نواز خرازیان 100319475328460035963 100319475328460035963 No علوم پزشکی مازندران Fariba Houshmand فریبا هوشمند 100319475328460035964 100319475328460035964 No علوم پزشکی مازندران Marzieh Ebrahimi مرضیه ابراهیمی 100319475328460035965 100319475328460035965 No علوم پزشکی مازندران