fa اثر انجماد شیشه ای بر تعداد و حیات توده سلول داخلی بلاستوسیست‌های گاوی رشد یافته در آزمایشگاه پژوهشي-کامل Research(Original) <div style="text-align: justify direction: rtl"> <span style="font-weight: bold">سابقه و هدف:</span> از کشت توده سلول داخلی بلاستوسیست در محیط مناسب، سلول های بنیادی جنینی به دست می آید. از این سلول ها به عنوان یک ابزار تحقیقاتی در تولید حیوانات ترانس ژنیک و مطالعه تکوین جنین استفاده می شود. با روش انجماد شیشه ای می توان بلاستوسیست های تولید شده را برای استفاده های بعدی نگهداری کرد. هدف از این مطالعه بررسی تعداد و میزان حیات سلول های توده داخلی بلاستوسیست های منجمد شده به روش انجماد شیشه ای است. به امید این که بتوان از جنین های منجمد شده نیز جهت تولید سلول های بنیادی استفاده نمود.<br><span style="font-weight: bold">مواد و روش ها: </span>پس از بلوغ ولقاح آزمایشگاهی تخمک های نابالغ گاو، جنین ها در محیط Ham's F10 بر لایه سلول های vero به مدت 7 روز در دمای CO2 %5 , 39°C کشت داده شد. 500 عدد بلاستوسیست انتخاب و به دو گروه تقسیم گردید. یک گروه به عنوان شاهد و گروه دیگر به روش انجماد شیشه ای (40 درصد اتیلن گلیکول، 18 درصد فایکل، 3/0 مولار ساکارز) منجمد شد. پس از ذوب، جنین ها به مدت 24 ساعت کشت داده شدند و جنین های متسع شده، انتخاب و همراه با گروه شاهد با روش Immunosurgery توده سلولی داخلی آن ها جدا شد. برای بررسی حیات سلول ها از رنگ آمیزی تریپان بلو استفاده گردید.<br><span style="font-weight: bold">یافته ها:</span> درصد حیات توده سلول داخلی بلاستوسیست های روز هفتم در گروه شاهد و انجماد به ترتیب 96درصد و 85 درصد و میانگین تعداد سلول ها به ترتیب17.4±3 و 14±2 بود. درصد حیات توده سلول داخلی بلاستوسیست های روز هشتم در گروه شاهد و انجماد به ترتیب 95درصد و 82 درصد و میانگین تعداد سلول ها به ترتیب 18.6±3 و 15.±2 بود.<br><span style="font-weight: bold">استنتاج: </span>درصد حیات و تعداد سلول های توده داخلی بلاستوسیست های گروه شاهد و انجماد درروز هفتم و هشتم دارای اختلاف معنی داری است. به روش انجماد شیشه ای درصد حیات و تعداد سلول ها به طور معنی داری کاهش می یابد. لذا بهتر است که جهت تولید سلول های بنیادی از بلاستوسیست های منجمد نشده استفاده شود. </div> <span style="font-weight: bold">Background and purpose:</span> Ëmbryonic stem cells (ËSÇ) can be produced by culturing blastocytes inner cell mass in a proper condition. ËSÇ are used as research tool in producing transgenic animals and in the study of embryo deyelopment. Produced blastocytes can be vitrified and used in appropriate time. Âim of this study was to determine the mean number and survival rate of vitrified ÏÇM, in order to use vitrified embryos in production of stem cells. <br> <span style="font-weight: bold">Materials and methods :</span> Âfter in vitro maturation and fertilization of immature bovine oocytes, embryos were co-cultured in Hams’F10 medium over Vero cells for 7 or 8 days at 30oc and 5% ÇÔ2. 500 blastocytes were selected and divided into two groups case and control. The blastocytes of the case group were vitrified (Ëthylene glycol 40%, Ficoll 18% and 0.3M sucrose). Âfter thawing, embryos were cultured for 24hr and the expanded embryos, along with the blastocytes in the control group were isolated by immunosurgery method. Çell survivals were assessed by trypan blue staining. <br><span style="font-weight: bold">Results : </span>The survival rate of ÏÇM cells at the day 7 blastocytes in the control and vitrified groups were 96% and 83% repectively, and the average number of ÏÇM cells were 17.4 ± 3 and 14 ± 2 respectively. The survival rate of ÏÇM cells from day 8th blastocytes in control and vitrified groups were 95% and 82% respectively. Mean number of ÏÇM cells were 18.6±3. <br><span style="font-weight: bold">Çonclusion :</span> Survival rate and number of blastocyte inner cell mass in the control and vitrified groups on the day 7 and 8 were significantly different. Ïn vitrified condition the survival rate and number of the cells declines significantly. Therefore it is not recommended to use vitrified blastocytes for production of the embryonic stern cells. بلاستوسیست، عفونت بلاستوسیستی، توده سلولی داخلی Blastocystis, Blastocysris Ïnfections 1 11 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-359&slc_lang=fa&sid=1 H Jashni حجت اله کریمی جشنی 10031947532846006973 10031947532846006973 Yes M.H Nasr esfahani محمدحسین نصراصفهانی 10031947532846006974 10031947532846006974 No H Baharvand حسین بهاروند 10031947532846006975 10031947532846006975 No H Ïmani حسین ایمانی 10031947532846006976 10031947532846006976 No M Mardani محمد مردانی 10031947532846006977 10031947532846006977 No