fa تولید و نگهداری کشت سلولی گیاه Digitalis nervosa Steud & Hochst و بررسی متابولیت‌های ثانویه آن پژوهشي-کامل Research(Original) <div style="text-align: justify direction: rtl"> <span style="font-weight: bold">سابقه و هدف:</span> گیاه Digitalis nervosa از گیاهان جنس دیژیتال، تنها گونه بومی ایران از جنس Digitalis بوده و مهم ترین گلیکوزید قلبی آن لاناتوزید A می باشد. در این تحقیق، تولید و نگهداری کشت سلولی گیاه و بررسی تولید متابولیت های ثانویه آن انجام شده است. <br><span style="font-weight: bold">مواد و روش ها: </span>دانه های گیاه توسط الکل اتیلیک 70 درصد و هیپوکلریت سدیم 5 درصد استریل شد و دانه رست های استریل به دست آمده در شرایط آسپتیک به محیط کشت Murshige and Skoog (MS) با غلظت های مختلف تنظیم کننده های رشد، منتقل و تولید کالوس در سه منطقه جوانه انتهایی، هیپوکوتیل و ریشه چه بررسی شد. آزمون های مقدماتی شیمیایی و جداسازی و شناسایی گلیکوزیدهای قلبی به روش کروماتوگرافی لایه نازک در گیاه و کالوس انجام شد.<br><span style="font-weight: bold">یافته ها:</span> استفاده از هیپوکلریت سدیــم 5 درصد نسبــت به الکل اتیلیک 70 درصد، اثر مهــاری کم تری روی قوه نامیه بذر داشت. بهترین محیط کشت برای تولید و نگهداری کالوس دارای تنظیم کننده رشدKinetin (0.5 mg/L) ، 2,4-Dichloro phenoxy acetic acid (0.5 mg/L)و Naphthalene acetic acid NAA (1 mg/L) بوده است. بیش ترین درصــد تولید کالــوس، مربوط به منطقـه ریشه چه دانه رست ها بود. نتایج آزمایش های مقدماتی تشخیص ساپونین ها، تانن ها فلاونوییدها، استروییدها و گلیکوزیدهای قلبی در گیاه و کالوس، مثبت مشاهده شد. در بررسی TLC ترکیبات گلیکوزیدی قلبی باRf های متفاوت در کالوس های مختلف، مشاهده شد.<br><span style="font-weight: bold">استنتاج:</span> یکـی از عوامــل اصلی در تولیــد کالوس، نسبت تنظیــم کننده های رشد اوکسین به سیتوکینین می باشد و این نسبت برای مناسب ترین محیط کشت، 3 به 1 بود. به نظر می رسد کشت کالوس گیاه D. nervosa توانایی تولید گلیکوزیدهای قلبی را دارا می باشد. </div> <span style="font-weight: bold">Background and purpose:</span> Digitalis nervosa is a wild species growing in Tran and the major cardenolode of this species is lanatoside Â. D nervosa cell culture was estabilished and its secondary metabolites were studied. <br><span style="font-weight: bold">Materials and methods :</span> Seeds of D. nervosa were surface sterilized in 70% ethanol or 5% Sodiume hypochlorite, then healthy seedlings were produced. The jemol, Hypocoty1 root tip of seedling were transferred onto the Murshige and Skoog (MS) culture media containing different concentrations of plant growth rgulators. The Phytochemical studies on callus and plant were carried out using Thin layer chromatography (YLÇ). Total Çardiac glaycosides in plant and callus were determined by spectrophotometric method. <br><span style="font-weight: bold">Results: </span>Sodium hypochlirite had less negative effect on the seedling production comparing with Ëthanol. The best callus intiation and estabilishment was observed in media containing K (0.5mg/l), 2,4-D (0.5 mg/l), NÂÂ(1 mg/l) as plant growth regulators. Çallus formed from the root part of seedies revealed the presence of saponins, tannins, flavonoids, steroids and Çardiac glycosides in both callus and plant extracts. The amount of cardiac glysosides in plant was 358 mg/100 gr. Dry.W. This amount varied from 29.68 to 15.90 mg/100 gr. Dry. Wt in the 7 th Generation of callus. <br><span style="font-weight: bold">Çonclusions: </span>The ratio between auxin and cytokinin is one of the important factors to callus production. The 3: 1 ratio demonstrated the best callus growth on D. Nervosa cell culture. The callus culture of D. nervosa showed the ability of producing cardiac glycosides howere, this ability reduced by repeated subculturing. کشت سلولی، Digitalis nervosa، متابولیت های ثانویه، گلیکوزیدهای قلبی Çell culture, Digitalis nervosa, Secondary metabolites 1 8 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-374&slc_lang=fa&sid=1 N Ghasemi dehkordi نصراله قاسمی دهکردی 10031947532846006918 10031947532846006918 Yes GH.R Âsghari غلامرضا اصغری 10031947532846006919 10031947532846006919 No F Vshahi فریده وشاحی 10031947532846006920 10031947532846006920 No