fa تشخیص مولکولی کلستریدیوم دیفیسیل دربیماران مبتلا به اسهال با استفاده از روش تکثیر تک دمای حلقه ای ايمونولوژي Immunology پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف: کلستریدیدم دیفیسیل باسیل گرم مثبت، بی هوازی اجباری است. تشخیص دقیق وسریع یکی از مسائل مهم در کنترل عفونت کلستریدیوم دیفیسیل است. هدف از این پژوهش راه‌اندازی و بهینه‌سازی روش مولکولی تکثیر هم دمایی به واسطه حلقه (LAMP) برای ارزیابی شیوع عفونت کلستریدیوم دیفیسیل در نمونه‌های اسهالی آبکی بیماران است. مواد و روش‌ها: این پژوهش به صورت مقطعی- توصیفی بر روی 48بیمار مبتلا به اسهال آبکی (24 بیمار مبتلا به اسهال بیمارستانی، 24 بیمار مبتلا به اسهال متعاقب مصرف آنتی‌بیوتیک) انجام شد. نمونه بیماران مبتلا به اسهال بر روی محیط اختصاصی CDMN آگار کشت داده شدند. 6 پرایمر اختصاصی برای تکنیک LAMP به کار گرفته شد و واکنش LAMP تحت شرایط بهینه انجام شد. تشخیص حساسیت و ویژگی تکنیک LAMP از ویژگی بسیار بالایی برخوردار بوده که جهت تشخیص کلستریدیوم دیفیسیل مورد بررسی قرار گرفت. یافته‌ها: در این مطالعه حساسیت روش بهینه‌سازی شده LAMP، 10 ذره باکتریایی بود. از 24 بیمار مبتلا به اسهال بیمارستانی و 24 بیمار مبتلا به اسهال متعاقب مصرف آنتی‌بیوتیک به ترتیب 2/18 درصد و 5/11 درصد به وسیله تکنیک LAMP مثبت گزارش شدند. استنتاج: تکنیک LAMP روشی کاربردی، حساس و سریع در تشخیص کلستریدیوم دیفیسیل می‌باشد. Background and purpose: Clostridium difficile is an obligate anaerobic, gram positive bacillus. The purpose of this study was to develop and optimize Loop-mediated Isothermal Amplification (LAMP) technique for assessing the prevalence of Clostridium difficile infection in the samples of watery diarrhea. Material and methods: This cross-sectional qualitative study was performed in 48 samples of watery diarrhea (fecal samples were obtained from 24 patients with nosocomial diarrhea and 24 patients with antibiotic-associated diarrhea). All samples were cultured in the specialized CDMN Agar medium. Six specific primers were applied for the LAMP Assay and the LAMP reaction was conducted under optimal conditions. Furthermore, sensitivity and specificity of LAMP were determined to detect Clostridium difficile. Results: In this study, the optimized LAMP technique was determined to be 10 bacterium. In addition, LAMP technique showed a high specificity for detecting the bacteria. Among the patients with nosocomial diarrhea and antibiotic-associated diarrhea, 18.2% and11.5% were reported to be positive, respectively. Conclusion: LAMP was found as an applicable, sensitive, and quick technique for detection of Clostridium difficile. تکنیک LAMP, اسهال آبکی, کلستریدیوم دیفیسیل Watery diarrhea, Clostridium difficile, LAMP technique 36 42 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-29-197&slc_lang=fa&sid=1 Seyyede Farsin Hosseini سیده فرسین حسینی hoseini.farsin@yahoo.com 100319475328460039326 100319475328460039326 Yes علوم پزشکی مازندران دانشجوی کارشناسی ارشد میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد فلاورجان، اصفهان، ایران Mohammad Amin Almasi محمد امین الماسی 100319475328460039327 100319475328460039327 No علوم پزشکی مازندران کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، زنجان، ایران Mohammad Taghi Kardi محمد تقی کاردی 100319475328460039328 100319475328460039328 No علوم پزشکی مازندران کارشناسی ارشد میکروبیولوژی، اصفهان، ایران Sharare Moghim شراره مقیم 100319475328460039329 100319475328460039329 No علوم پزشکی مازندران استادیار، گروه ویروس شناسی، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران Vajihe Karbasizade وجیهه کرباسی زاده 100319475328460039330 100319475328460039330 No علوم پزشکی مازندران استادیار، گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد فلاورجان، اصفهان، ایران