Journal of Mazandaran University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران
J Mazandaran Univ Med Sci
Medical Sciences
http://jmums.mazums.ac.ir
1
admin
1735-9260
1735-9279
fa
jalali
1393
7
1
gregorian
2014
10
1
24
117
online
1
fulltext
fa
همسان سازی و بیان نوترکیب فاکتور بیماریزای EspA مربوط به باکتری E. coliO157:H7
Cloning and Recombinant Expression of EspA as a Virulence Factor of E. coli O157:H7
بيولوژي
Biology
پژوهشي-کامل
Research(Original)
<!--stripped-->
<!--stripped-->
<w:view>Normal</w:view>
<w:zoom>0</w:zoom>
<w:trackmoves>
<w:trackformatting>
<w:punctuationkerning>
<w:validateagainstschemas>
<w:saveifxmlinvalid>false</w:saveifxmlinvalid>
<w:ignoremixedcontent>false</w:ignoremixedcontent>
<w:alwaysshowplaceholdertext>false</w:alwaysshowplaceholdertext>
<w:donotpromoteqf>
<w:lidthemeother>EN-US</w:lidthemeother>
<w:lidthemeasian>ZH-TW</w:lidthemeasian>
<w:lidthemecomplexscript>AR-SA</w:lidthemecomplexscript>
<w:compatibility>
<w:breakwrappedtables>
<w:snaptogridincell>
<w:wraptextwithpunct>
<w:useasianbreakrules>
<w:dontgrowautofit>
<w:splitpgbreakandparamark>
<w:dontvertaligncellwithsp>
<w:dontbreakconstrainedforcedtables>
<w:dontvertalignintxbx>
<w:word11kerningpairs>
<w:cachedcolbalance> </w:cachedcolbalance></w:word11kerningpairs></w:dontvertalignintxbx></w:dontbreakconstrainedforcedtables></w:dontvertaligncellwithsp></w:splitpgbreakandparamark></w:dontgrowautofit></w:useasianbreakrules></w:wraptextwithpunct></w:snaptogridincell></w:breakwrappedtables></w:compatibility>
<w:browserlevel>MicrosoftInternetExplorer4</w:browserlevel>
<m:mathpr>
<m:mathfont m:val="Cambria Math">
<m:brkbin m:val="before">
<m:brkbinsub m:val="--">
<m:smallfrac m:val="off">
<m:dispdef>
<m:lmargin m:val="0">
<m:rmargin m:val="0">
<m:defjc m:val="centerGroup">
<m:wrapindent m:val="1440">
<m:intlim m:val="subSup">
<m:narylim m:val="undOvr"> </m:narylim></m:intlim></m:wrapindent></m:defjc></m:rmargin></m:lmargin></m:dispdef></m:smallfrac></m:brkbinsub></m:brkbin></m:mathfont></m:mathpr>
<!--stripped-->
<p class="MsoNormal" dir="rtl" style="text-align: justify direction: rtl unicode-bidi: embed"><span lang="AR-SA" style="font-size: 16pt">چکیده</span></p>
<p class="MsoNormal" dir="rtl" style="text-align: justify text-indent: 17pt direction: rtl unicode-bidi: embed"><span lang="FA">سابقه</span><span lang="AR-SA"> و هدف: </span><span lang="FA">باکتری </span><i><span dir="ltr" style="font-size: 10pt letter-spacing: -0.1pt">E. coli</span></i><span dir="ltr" style="font-size: 10pt letter-spacing: -0.1pt">O157:H7</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA"><span dir="rtl"></span> جزء پاتوژن</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">های روده</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">ای می</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">باشد که آسیب</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">های جدی در دستگاه گوارش پدید می</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">آورد. اتصال باکتری در روده بزرگ به واسطه یک</span><span dir="ltr"></span><span lang="FA" dir="ltr" style="font-size: 10pt letter-spacing: -0.1pt"><span dir="ltr"></span> </span><span lang="FA">سری از فاکتورهای
بیماری</span><span dir="ltr"></span><span lang="FA" dir="ltr" style="font-size: 10pt letter-spacing: -0.1pt"><span dir="ltr"></span> </span><span lang="FA">زا</span><span dir="ltr"></span><span lang="FA" dir="ltr" style="font-size: 10pt letter-spacing: -0.1pt"><span dir="ltr"></span> </span><span lang="FA">صورت می</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">پذیرد که پروتئین</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">های ترشحی نوع 3 نیز جزء این فاکتورها دسته</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">بندی می</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">شوند. در بین پروتئین</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">های موجود در سیستم مذکور، پروتئین </span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt letter-spacing: -0.1pt">EspA</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA"><span dir="rtl"></span> نقش </span><span lang="FA">اصلی و مهم را در پیکره شکلگیری این سیستم ایفا می</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">کند. هدف از انجام این تحقیق همسان</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">سازی و بیان این پروتئین به شکل</span><span lang="FA"> </span><span lang="FA">نوترکیب
جهت دستیابی به یک ساختار و منبع پایدار برای تولید آن به منظور بررسی</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">های آینده به عنوان کاندید واکسن می</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">باشد.</span></p>
<p class="MsoNormal" dir="rtl" style="text-align: justify text-indent: 17pt direction: rtl unicode-bidi: embed"><span lang="AR-SA">مواد
و روش</span><span lang="FA"></span><span lang="AR-SA">ها:</span><span lang="AR-SA"> </span><span lang="FA">طراحی پرایمر اختصاصی برای ژن </span><i><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">espA</span></i><span dir="rtl"></span><span><span dir="rtl"></span> <span lang="FA">توسط نرم</span></span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">افزار </span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">Oligo
7</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA"><span dir="rtl"></span> انجام شد و
تکثیر ژن توسط واکنش </span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">PCR</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA"><span dir="rtl"></span> از روی </span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">DNA</span><span dir="rtl"></span><span><span dir="rtl"></span> <span lang="FA">الگو صورت پذیرفت. واکنش</span></span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">های
هضم آنزیمی و الحاق ژن درون وکتور بیانی </span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">pET28a(+)</span><span dir="rtl"></span><i><span><span dir="rtl"></span> </span></i><span lang="FA">انجام شد. پس از تأیید همسان سازی ژن مورد نظر، بیان نوترکیب پروتئین </span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">EspA</span><span dir="rtl"></span><span><span dir="rtl"></span> <span lang="FA">با استفاده از القاءگر مصنوعی </span></span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">IPTG</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA"><span dir="rtl"></span> صورت پذیرفت. آنالیز وسترن بلات نیز برای تأیید پروتئین </span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">EspA</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA"><span dir="rtl"></span> صورت پذیرفت.<span style="color: black"></span></span></p>
<p class="MsoNormal" dir="rtl" style="text-align: justify text-indent: 17pt direction: rtl unicode-bidi: embed"><span lang="AR-SA">یافته</span><span lang="FA"></span><span lang="AR-SA">ها:</span><span lang="AR-SA" style="font-size: 14pt"> </span><span lang="FA">همسان سازی ژن </span><i><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">espA</span></i><span dir="rtl"></span><span><span dir="rtl"></span> <span lang="FA">درون وکتور </span></span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">pET28a(+)</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA"><span dir="rtl"></span> به شکل مناسب بین جایگاه های مربوطه صورت پذیرفت و
پروتئین </span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">EspA</span><span dir="rtl"></span><span><span dir="rtl"></span> <span lang="FA">پس از القا، بیان نوترکیب مناسب و قابل توجهی را
نشان داد. آنتی</span></span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">بادی
مورد استفاده در وسترن بلات نیز توانست به شکل مناسبی </span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">EspA</span><span dir="rtl"></span><span><span dir="rtl"></span> <span lang="FA">را شناسایی کند.<span style="color: black"></span></span></span></p>
<p class="MsoNormal" dir="rtl" style="text-align: justify text-indent: 17pt direction: rtl unicode-bidi: embed"><span lang="AR-SA">استنتاج:</span><span lang="AR-SA"> </span><span lang="FA">ساختار نوترکیب پایدار محتوی ژن </span><i><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">espA</span></i><span dir="rtl"></span><span><span dir="rtl"></span> <span lang="FA">تولید
گردید که بیان نوترکیب قابل توجهی از پروتئین را نشان داد. بنابراین پروتئین </span></span><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">EspA</span><span dir="rtl"></span><span><span dir="rtl"></span> <span lang="FA">را می</span></span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">توان در مطالعات آینده برای بررسی میزان ایمن</span><span lang="AR-SA"></span><span lang="FA">سازی علیه </span><i><span dir="ltr" style="font-size: 10pt">E. coli</span></i><span dir="ltr" style="font-size: 10pt"> O157:H7</span><span dir="rtl"></span><span lang="FA"><span dir="rtl"></span> مورد بررسی قرار داد.</span><span lang="FA"></span></p>
<!--stripped-->
<w:latentstyles latentstylecount="267" defpriority="99" defqformat="false" defsemihidden="true" defunhidewhenused="true" deflockedstate="false">
<w:lsdexception name="Normal" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="0" locked="false">
<w:lsdexception name="heading 1" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="9" locked="false">
<w:lsdexception name="heading 2" qformat="true" priority="9" locked="false">
<w:lsdexception name="heading 3" qformat="true" priority="9" locked="false">
<w:lsdexception name="heading 4" qformat="true" priority="9" locked="false">
<w:lsdexception name="heading 5" qformat="true" priority="9" locked="false">
<w:lsdexception name="heading 6" qformat="true" priority="9" locked="false">
<w:lsdexception name="heading 7" qformat="true" priority="9" locked="false">
<w:lsdexception name="heading 8" qformat="true" priority="9" locked="false">
<w:lsdexception name="heading 9" qformat="true" priority="9" locked="false">
<w:lsdexception name="toc 1" priority="39" locked="false">
<w:lsdexception name="toc 2" priority="39" locked="false">
<w:lsdexception name="toc 3" priority="39" locked="false">
<w:lsdexception name="toc 4" priority="39" locked="false">
<w:lsdexception name="toc 5" priority="39" locked="false">
<w:lsdexception name="toc 6" priority="39" locked="false">
<w:lsdexception name="toc 7" priority="39" locked="false">
<w:lsdexception name="toc 8" priority="39" locked="false">
<w:lsdexception name="toc 9" priority="39" locked="false">
<w:lsdexception name="caption" qformat="true" priority="35" locked="false">
<w:lsdexception name="Title" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="10" locked="false">
<w:lsdexception name="Default Paragraph Font" priority="1" locked="false">
<w:lsdexception name="Subtitle" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="11" locked="false">
<w:lsdexception name="Strong" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="22" locked="false">
<w:lsdexception name="Emphasis" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="20" locked="false">
<w:lsdexception name="Table Grid" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="59" locked="false">
<w:lsdexception name="Placeholder Text" unhidewhenused="false" locked="false">
<w:lsdexception name="No Spacing" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="1" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Shading" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="60" locked="false">
<w:lsdexception name="Light List" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="61" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Grid" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="62" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="63" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="64" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="65" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="66" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="67" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="68" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="69" locked="false">
<w:lsdexception name="Dark List" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="70" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Shading" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="71" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful List" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="72" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Grid" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="73" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Shading Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="60" locked="false">
<w:lsdexception name="Light List Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="61" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Grid Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="62" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 1 Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="63" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 2 Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="64" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 1 Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="65" locked="false">
<w:lsdexception name="Revision" unhidewhenused="false" locked="false">
<w:lsdexception name="List Paragraph" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="34" locked="false">
<w:lsdexception name="Quote" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="29" locked="false">
<w:lsdexception name="Intense Quote" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="30" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 2 Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="66" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 1 Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="67" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 2 Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="68" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 3 Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="69" locked="false">
<w:lsdexception name="Dark List Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="70" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Shading Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="71" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful List Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="72" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Grid Accent 1" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="73" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Shading Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="60" locked="false">
<w:lsdexception name="Light List Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="61" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Grid Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="62" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 1 Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="63" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 2 Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="64" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 1 Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="65" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 2 Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="66" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 1 Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="67" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 2 Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="68" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 3 Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="69" locked="false">
<w:lsdexception name="Dark List Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="70" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Shading Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="71" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful List Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="72" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Grid Accent 2" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="73" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Shading Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="60" locked="false">
<w:lsdexception name="Light List Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="61" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Grid Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="62" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 1 Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="63" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 2 Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="64" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 1 Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="65" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 2 Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="66" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 1 Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="67" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 2 Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="68" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 3 Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="69" locked="false">
<w:lsdexception name="Dark List Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="70" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Shading Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="71" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful List Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="72" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Grid Accent 3" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="73" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Shading Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="60" locked="false">
<w:lsdexception name="Light List Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="61" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Grid Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="62" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 1 Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="63" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 2 Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="64" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 1 Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="65" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 2 Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="66" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 1 Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="67" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 2 Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="68" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 3 Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="69" locked="false">
<w:lsdexception name="Dark List Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="70" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Shading Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="71" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful List Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="72" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Grid Accent 4" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="73" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Shading Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="60" locked="false">
<w:lsdexception name="Light List Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="61" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Grid Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="62" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 1 Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="63" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 2 Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="64" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 1 Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="65" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 2 Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="66" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 1 Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="67" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 2 Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="68" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 3 Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="69" locked="false">
<w:lsdexception name="Dark List Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="70" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Shading Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="71" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful List Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="72" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Grid Accent 5" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="73" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Shading Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="60" locked="false">
<w:lsdexception name="Light List Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="61" locked="false">
<w:lsdexception name="Light Grid Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="62" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 1 Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="63" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Shading 2 Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="64" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 1 Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="65" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium List 2 Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="66" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 1 Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="67" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 2 Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="68" locked="false">
<w:lsdexception name="Medium Grid 3 Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="69" locked="false">
<w:lsdexception name="Dark List Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="70" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Shading Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="71" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful List Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="72" locked="false">
<w:lsdexception name="Colorful Grid Accent 6" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="73" locked="false">
<w:lsdexception name="Subtle Emphasis" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="19" locked="false">
<w:lsdexception name="Intense Emphasis" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="21" locked="false">
<w:lsdexception name="Subtle Reference" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="31" locked="false">
<w:lsdexception name="Intense Reference" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="32" locked="false">
<w:lsdexception name="Book Title" qformat="true" unhidewhenused="false" semihidden="false" priority="33" locked="false">
<w:lsdexception name="Bibliography" priority="37" locked="false">
<w:lsdexception name="TOC Heading" qformat="true" priority="39" locked="false"> </w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:lsdexception></w:latentstyles>
<!--stripped--><!--stripped-->
<style>
/* Style Definitions */
table.MsoNormalTable
{mso-style-name:"Table Normal"
mso-tstyle-rowband-size:0
mso-tstyle-colband-size:0
mso-style-noshow:yes
mso-style-priority:99
mso-style-qformat:yes
mso-style-parent:""
mso-padding-alt:0cm 5.4pt 0cm 5.4pt
mso-para-margin:0cm
mso-para-margin-bottom:.0001pt
mso-pagination:widow-orphan
font-size:11.0pt
font-family:"Calibri","sans-serif"
mso-ascii-font-family:Calibri
mso-ascii-theme-font:minor-latin
mso-fareast-font-family:PMingLiU
mso-fareast-theme-font:minor-fareast
mso-hansi-font-family:Calibri
mso-hansi-theme-font:minor-latin
mso-bidi-font-family:Arial
mso-bidi-theme-font:minor-bidi}
</style>
<!--stripped-->
</w:donotpromoteqf></w:validateagainstschemas></w:punctuationkerning></w:trackformatting></w:trackmoves>
Abstract
Background and purpose: E. coli O157:H7 is one of the intestinal pathogens that mediate serious damages in gastrointestinal track. The bacterium attachment in large intestine is mediated via some colonization factors mainly Type III secretion proteins that are involved in this process. Among these factors, EspA protein plays an important role in system foundation. The aim of this study was cloning and recombinant expression of EspA in order to achieve a stable construct for the protein production and using it as a vaccine candidate in future investigations.
Materials and methods: Specific primers were designed by Oligo 7 software and gene amplification was performed by PCR technique on template DNA. Enzymatic digestion and ligation were done by restriction enzymes and T4 ligase enzyme, respectively. Recombinant expression of EspA was induced by IPTG following cloning confirmation. Protein confirmation was done by Western blotting analyze.
Results: Results showed that cloning of <i>espA</i> in pET28a (+) vector was performed in an appropriate mode between expected sites. Also, EspA had good and remarkable recombinant expression after induction and the antibody used in western blotting could recognize EspA on nitrocellulose membrane.
Conclusion: Stable recombinant construct containing espA gene was fabricated that showed appropriate recombinant expression of protein. So, this protein could be used in future studies as a vaccine candidate against E. coli O157:H7.
پاتوژن رودهای, همسان سازی ژن espA, بیان نوترکیب, وسترن بلات
Intestinal pathogen, espA gene cloning, recombinant expression, Western blotting
12
20
http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1269-9&slc_lang=fa&sid=1
Mostafa
Bakhshi
مصطفی
بخشی
100319475328460038624
100319475328460038624
No
PhD Student in Nanobiotechnoligy, Biology Research Center, Faculty of Basic Science, Imam Hossein University, Tehran, Iran
دانشجوی دکتری نانوبیوتکنولوژی، مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده و پژوهشکده علوم پایه، دانشگاه امام حسین (ع)، تهران، ایران
Firouz
Ebrahimi
فیروز
ابراهیمی
febrhimi@ihu.ac.ir
100319475328460038625
100319475328460038625
Yes
Assistant Professor, Department of Clinical Biochemistry, Biology Research Center, Faculty of Basic Science, Imam Hossein University, Tehran, Iran
استادیار، گروه زیست شناسی، مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده و پژوهشکده علوم پایه، دانشگاه امام حسین (ع)، تهران، ایران
Jamil
Zargan
جمیل
زرگان
100319475328460038626
100319475328460038626
No
Assistant Professor, Department of Toxicology, Biology Research Center, Faculty of Basic Science, Imam Hossein University, Tehran, Iran
استادیار، گروه زیست شناسی، مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده و پژوهشکده علوم پایه، دانشگاه امام حسین (ع)، تهران، ایران
Shahram
Nazarian
شهرام
نظریان
100319475328460038627
100319475328460038627
No
Assistant Professor, Department of Microbiology , Biology Research Center, Faculty of Basic Science, Imam Hossein University, Tehran, Iran
استادیار، گروه زیست شناسی، مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشکده و پژوهشکده علوم پایه، دانشگاه امام حسین (ع)، تهران، ایران
Vahideh
Sheikhzade
وحیده
شیخ زاده
100319475328460038628
100319475328460038628
No
MSc in Food Science and Technology, Islamic Azad University, Quchan Branch, Quchan, Iran
کارشناسی ارشد تکنولوژی و علوم غذایی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قوچان، گروه علوم و صنایع غذایی، قوچان، ایران