fa طراحی کیت الیزا جهت تعیین IgG علیه توکسوپلاسما در سرم انسان با استفاده از آنتی ژن های دفعی - ترشحی و بررسی قدرت تشخیص آن پژوهشي-کامل Research(Original) <div style="text-align: justify direction: rtl"> <span style="font-weight: bold">سابقه و هدف:</span> روش رایج جهت تشخیص توکسوپلاسموزیس (Toxoplasmosis) تعیین آنتی بادی علیه توکسوپلاسما در سرم به کمک آزمون های سرولوژی می باشد. در مطالعات قبلی از آنتی ژن های دفعی - ترشحی به دست آمده از کشت انگل در محیط کشت RPMI استفاده شده است. در این مطالعه، انگل در مایع صفاق موش کوچک آزمایشگاهی کشت داده شد و از آنتی ژن های به دست آمده به عنوان آنتی ژن در طراحی کیت الیزای تشخیص آنتی بادی های ضد توکسوپلاسما استفاده شد.<br><span style="font-weight: bold">مواد و روش ها:</span> مایع صفاق موش سفید کوچک آزمایشگاهی که 3 روز قبل به طریق تزریق داخل صفاقی با تاکی زوئیت های توکسوپلاسما آلوده شده بود، کشیده شد و به میزان 750 ×gبه مدت 15 دقیقه سانتریفیوژ گردید. سپس رسوب سولفات آمونیوم اشباع (40 درصد) از مایع رویی آن تهیه و به عنوان ترکیب حاوی E/SAدر شرایط مناسب نگه داری شد. نمونه های سرم انسانی با استفاده از اسباب (kit) الیزا (رادیم IgG ساخت کشور ایتالیا) آزمایش و نمونه های منفی و حاوی IgG تعیین و با آزمون رنگ سنجی نیز تایید شدند سپس مجددا به روش الیزا با استفاده از ترکیب حاوی E/SA تهیه شده در این مطالعه آزمایش شدند.<br><span style="font-weight: bold">یافته ها:</span> با توجه به نتایج آزمایش، 32 نمونه حاوی IgG علیه توکسوپلاسما و 40 نمونه بدون آنتی بادی علیه توکسوپلاسما انتخاب شد. تحت شرایط مورد نظر در این مطالعه با 95 درصد اطمینان، نقطه برش آزمون الیزا برابر 0.78 تعیین گردید که جذب نوری سه عدد از نمونه های منفی بیش تر و جذب نوری 5 عدد از نمونه های حاوی IgG کم تر از نقطه برش به دست آمد. بنابراین حساسیت و ویژگی آزمون الیزا به ترتیب 84 و 92 درصد محاسبه گردید.<br><span style="font-weight: bold">استنتاج: </span>مطالعه حاضر نشان داد که مایع صفاق موش آلوده به توکسوپلاسما می تواند ترکیب مناسبی جهت به دست آوردن آنتی ژن های دفعی - ترشحی برای استفاده در روش های تشخیص سرولوژی توکسوپلاسموزیس باشد. </div> <span style="font-weight: bold">Background and Purpose: </span>Many studies report that Toxoplasma gondii excreted / secreted antigens (E/SA) appear to be a suitable marker for toxoplasmosis serodiagnosis. Most of these studies have used E/SA, obtained from supernatant of Toxoplasma cell culture, or by incubating tachyzoites in cell free media (RPMI-1640). The present study for the detection of Toxoplasma IgG in human serum was evaluated, using the components of peritoneal fluid of infected mice (as another source of E/SA). <br><span style="font-weight: bold">Materials and Methods:</span>Peritoneal fluids of mice infected by interaperitoneal (IP) inoculation of Toxoplasma tachyzoites were collected after 3 days and centrifuged at 750×g for 15 minutes. Then the supernatant was precipitated with ammonium sulphate solution (40% saturated) and used as components encompassing E/SA. Forty (40) none- infected ( without anti- toxoplasma antibodies) and thirty- two (32) positive (with IgG to toxoplasma) human serum samples were selected (all sera were first tested by standard method for detection of IgG antibodies anti-T. gondii) then, the sera were tested by ELISA using E/SA. <br><span style="font-weight: bold">Results:</span>The cut-off point with 95% confidences was found to be 0.78. Moreover, sensitivity and specificity of the method were determined to be 84% and 92%, respectively. <br><span style="font-weight: bold">Conclusion:</span>The present results indicate that peritoneal exudates from mice infected with T.gondii, may be used as a source of anti-genic material for the detection of Toxoplasma-specific IgG. Furthermore, it may be valuable for the development of new tools in the serodiagnosis of toxoplasmosis. توکسوپلاسموزیس، الیزا، آنتی ژن های دفعی،ترشحی، توکسوپلاسما گوندی Toxoplasmosis, Excreted / Secreted Antigens, ELISA, Toxoplasma 14 20 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-452&slc_lang=fa&sid=1 S.H Abdollahi سیدحسین عبدالهی habdollahid38@yahoo.com 10031947532846005685 10031947532846005685 Yes M Kazemi محمد کاظمی عرب آبادی 10031947532846005686 10031947532846005686 No