fa در ایزوله های OqxA بررسی الگوی ژنتیکی و نقش پمپ کلینیکی کلبسیلا پنومونیه ميکروبيولوژي Microbiology پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف : افزایش ظهور مقاومت چند دارویی در بین ایزوله های بیمارستانی کلبسیلا پنومونیه، گزین ه های درمانی را برای درمان عفونت های ایجاد شده به وسیله این باکتری محدود کرده است که در این میان بتالاکتامازها و پمپ ها ی ترشحی به عنوان یکی از اصلی ترین مکانیسم های مقاومت به آنتی بیوتیک ها در این باکتری محسوب م ی شوند . لذا هدف از این و بررسی الگوی OqxA تعیین میزان بیان پمپ ،OqxA ,OqxB مطالعه، شناسایی بتالاکتامازها، تشخیص ژ نهای پلاسمیدی ژنتیکی سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک در میان ایزول ه های بالینی کلبسیلا پنومونیه جدا شده از بیماران بستری در بیمارستان های مفید و طالقانی می باشد. مواد و رو شها: این مطالعه توصیفی بر روی 100 ایزوله کلبسیلا پنومونیه جدا شده از بیماران بستری در بیمارستان های مفید و طالقانی انجام شده است . تست ها ی حساسیت ضد میکروبی با استفاده از رو ش های دیسک دیفیوژن انجام گردید . Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) و میکرودایلوشن براث بر اساس رهنمودهای و کارباپنمازهای کلبسیلا پنومونیه با استفاده از MAST شناسایی بتالاکتامازهای با طیف وسیع با استفاده از کیت شرکت Sequencing و PCR با استفاده از روش های OqxAB انجام شد . پمپ های Modified Hodge Test (MHT) روش مورد ارزیابی قرار گرفت. برای تایپینگ Real-Time RT-PCR با استفاده از تکنیک OqxA تشخیص داده شدند و بیان ژن استفاده گردید. PFGE نمونه های مقاوم نیز از روش 5 درصد ) دارای ) 48 درصد ) دارای بتالاکتاماز با طیف وسیع و 5 ) یافته ها : از 100 ایزوله کلبسیلا پنومونیه، 48 OqxA بودند. در این مطالعه فسفومایسین، کلیستین و تیجیسیکلین بهترین اثر را داشتند. شیوع پمپ های (KPC) کارباپنماز در نمون ه های با کاهش حساسیت به OqxA 50 درصد ) بود و میزان بیان پمپ ) در سویه های کلبسیلا پنومونیه 50 OqxB و 2 برابر بیش تر از نمونه های حساس به سیپروفلوکساسین بود . نمونه ها مربوط به سه خوشه / سیپروفلوکساسین در حدود 3 اصلی بود که در بین آن ها بعضی از ایزوله ها مربوط به یک کلون بودند. استنتاج: شیوع ژن های مقاومت به آنت ی بیوتیک در این مطالعه موجب نگرانی است، از این رو برای کنترل عفونت و جلوگیری از گسترش باکتری های مقاوم به دارو، نیاز به مدیریت دقیق در تجویز دارو و شناسایی ایزول ههای مقاوم م یباشد. Background and purpose: The increasing emergence of multidrug resistance among Klebsiella pneumoniae nosocomial isolates has limited the therapeutic options in treatment of infections caused by these bacteria. The beta-lactamases, efflux pumps and porins constitute the major defense mechanisms of antibiotic resistance of these bacteria. The aims of the present study were detection of OqxA and OqxB genes, evaluation of expression level of OqxA efflux pump and also determining the genetic basis of resistant K. pneumoniae strains isolated from hospitalized patients in Mofid and Taleghani hospitals during 2011-2012. Materials and methods: This study was conducted in 100 K. pneumoniae isolates from Taleghani and Mofid hospitals in Tehran, Iran. Antibiotic susceptibility tests were performed by Kirby- Bauer disc diffusion and Broth Microdilution methods according to CLSI guidelines. Detection of extended spectrum beta-lactamases was done by a kit developed by MAST group. The Modified Hodge Test (MHT) was used to identify carbapenemase production among the isolates. The OqxA and OqxB genes were detected by PCR and sequencing methods and oqxA gene expression was analyzed using realtime RT–PCR. PFGE typing was then performed for further analysis of the resistant isolates. Results: Among 100 K. pneumoniae isolates, 5(5%) were KPC positive and 48(48%) were ESBL positive. In this study, fosfomycin, colistin and tigecycline were found more effective than other antibiotics. The prevalence of both oqxA and oqxB genes detected among the K. pneumoniae isolates was 50 (50%). RT– PCR revealed higher expression (2.3-fold) in isolates with reduced susceptibility to Ciprofloxacin. Isolates belonged to three clusters and some of them belong to a particular clone. Conclusion: The prevalence of antibiotic resistance genes identified in this study highlights the need for more infection control measures including antibacterial management and identification of resistant isolates. کلبسیلا پنومونیه, بتالاکتاماز, پمپ های ترشحی, مقاومت آنتی بیوتیکی Klebsiella pneumoniae, β-Lactamases, efflux pumps, antibiotic resistance 48 61 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3397-53&slc_lang=fa&sid=1 Ali Hashemi علی هاشمی hashemi1388@yahoo.com 100319475328460041285 100319475328460041285 Yes Department of Microbiology, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Fatemeh Fallah فاطمه فلاح 100319475328460041286 100319475328460041286 No Department of Microbiology, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Arezou Taherpour آرزو طاهرپور 100319475328460041287 100319475328460041287 No Department of Microbiology, Faculty of Medicine, Kurdistan University of Medical Sciences, Sanandaj, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کردستان، سنندج، ایران Hossein Goudarzi حسین گودرزی 100319475328460041288 100319475328460041288 No Department of Microbiology, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Soroor Erfanimanesh سرور عرفانی منش 100319475328460041289 100319475328460041289 No Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran Ali Hashemi1 دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Elahe Taki الهه تاکی 100319475328460041290 100319475328460041290 No Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran Ali Hashemi1 دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران