fa کشت کراتینوسایت های موش صحرایی در محیط کشت بدون سرم به روش کاشت اپیدرم پژوهشي-کامل Research(Original) <div style="text-align: justify direction: rtl"> <span style="font-weight: bold">سابقه و هدف: </span>امروزه برای کمک به ترمیم آسیب های پوستی نظیر سوختگی ها، زخم های مزمن دیابتیک یا زخم های مزمن ناشی از جراحی، از کشت کراتینوسایت ها و پیوند آن ها به محل ضایعه استفاده می شود. در این روش باید پیوستگی لازم برای کشت سلول های اپیدرمال در شرایط آزمایشگاه ایجاد شود. به این منظور در این تحقیق از روش ساده کاشت اپیدرم به همراه محیط کشت بدون سرم که در آن نیازی به فیبروبلاست های 3T3 وجود ندارد، استفاده شد.<br><span style="font-weight: bold">مواد و روش ها:</span> قطعه کوچکی از پوست موش صحرایی را در تریپسین قرار داده و درم را از اپیدرم جدا نمودیم. سپس اپیدرم را به قطعات یک میلی متری تقسیم کرده و در یک فلاسک کاشتیم. پس از گذشت نیم ساعت، روی قطعات اپیدرم، محیط کشت بدون سرم افزوده و هر دو روز یک بار محیط کشت را تعویض کردیم. پس از 21 روز تقریبا 70 درصد سطح فلاسک توسط کراتینوسایت ها پوشانیده شد. این کراتینوسایت ها پس از دو بار پاساژ در تانک ازت ذخیره شدند.<br><span style="font-weight: bold">یافته ها:</span> کشت خالص کراتینوسایت به آسانی به روش کاشت اپیدرم و بدون استفاده از سرم های با منشا حیوانی و نیز لایه تغذیه کننده به دست آمد.<br><span style="font-weight: bold">استنتاج:</span> کاشت اپیدرم در محیط کشت بدون سرم یک روش ساده برای جداسازی کراتینوسایت های اتولوگ از قطعه کوچکی پوست می باشد که در آینده می توان از این روش برای کشت کراتینوسایت های انسانی جهت ترمیم زخم ها استفاده کرد. </div> <span style="font-weight: bold">Background and purpose:</span> To establish a simple method for preparation of pure epidermal cell in serum-free medium, without co culturing with lethally irradiated 3T3 cells. <br><span style="font-weight: bold">Materials and methods: </span>Â piece of skin biopsy was taken from a rat. Âfter trypsinazation to separate epidermal layer, the epidermis was cut into explants 1×1 mm and were laid at 50 mL on tissue cultured flasks. Then, the explants were covered with serum-free keratinocyte growth medium, while the culture medium was changed every two days. The keratinocyte colonies were expanded in flasks and proliferated to 70% confluency on day 21. Âfter two subcultures, the cells were frozen. <br><span style="font-weight: bold">Results:</span> Pure epidermal cells are established by this technique in a serum-free keratinocyte growth medium, under feeder cell-free condition. <br><span style="font-weight: bold">Çonclusion:</span> Çulturing of keratinocytes in serum-free medium is proved to be a useful and simple method for keratinocyte isolation. The successful culturing of keratinocytes from a small skin biopsy can be useful in the treatment of major burn wounds. کراتینوسایت، کشت سلول، کاشت اپیدرم Keratinocyte, epidermal explants, serum, free medium 67 71 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-552&slc_lang=fa&sid=1 M Shokerzadeh محمد شکرزاده 10031947532846005252 10031947532846005252 No M Mahmoudi Rad مهناز محمودی راد mahnazrad@gmail.com 10031947532846005253 10031947532846005253 Yes M Mirzaei منصوره میرزایی 10031947532846005254 10031947532846005254 No N Mosefa نریمان مصفا 10031947532846005255 10031947532846005255 No M Ahangari مائده آهنگری 10031947532846005256 10031947532846005256 No