fa ارزیابی بیان ژن مولکول های متالوتیونین پس از آسیب عصب سیاتیک فيزيولوژي physiology پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف: آسیب به عصب محیطی تغییرات سلولی و مولکولی گسترده‌ای در نورون‌های آسیب دیده ایجاد می‌نماید که بسیاری از آن‌ها ناشناخته باقی مانده‌اند. یکی از این تغییرات افزایش تولید رادیکال‌های آزاد می‌باشد که به استرس اکسیداتیو منجر می‌شود. مواد آنتی اکسیدان از طریق اثر پاک کنندگی رادیکال‌های آزاد اکسیژن در ترمیم عصب شرکت می‌کنند. هدف از این مطالعه بیان ژن مولکول‌های متالوتیونین1و2 پس از آسیب له شدگی عصب سیاتیک رت بوده است. مواد و روش‌ها: در مطالعه تجربی حاضر عصب سیاتیک 40 رتبا آسیب له شدگی مورد استفاده قرار گرفت. سپس 1 و 3 روز و 1، 3 و 5 هفته پس از آسیب، عصب سیاتیک آسیب دیده خارج شد. ابتدا mRNA کامل از نمونه‌ها استخراج و سپس cDNA ساخته شد و بیان ژن‌های متالوتیونین1و2 با استفاده از آنالیز نسخه‌برداری معکوس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز نیمه کمی تایید شد. به منظور آزمایشات ایمونوهیستوشیمی نمونه‌ها در پارافورمالدئید فیکس شدند و با استفاده از کرایو استات برش‌های طولی به ضخامت 20 میکرون زده شد. یافته‌ها: نتایج نسخه‌برداری معکوس واکنش زنجیره‌ای پلیمراز در نمونه‌های دچار آسیب نشان دادکه بیان ژن‌های متالوتیونین1و2 در روزهای اول و سوم نسبت به نمونه‌های نرمال به صورت معنی‌داری (0001/0< p). افزایش داشته است. نتایج ایمونوهیستوشیمی نیز در مورد این پروتئین تاییدکننده بیان ژنی بود. استنتاج: آسیب‌های وارد شده به عصب سیاتیک باعث تولید استرس اکسیداتیو می‌شود. مطالعه حاضر افزایش بیان مولکول‌های متالو تیونین را در روندترمیم، زمانی که استرس اکسیداتیو بیش‌ترین افزایش را دارد، نشان می‌دهد و با آزمایشات تکمیلی ممکن است به عنوان مکمل در درمان مورد استفاده قرار گیرد. Background and purpose: Injury to peripheral nerve causes widespread cellular and molecular changes in injured neurons, however, the mechanisms involved remain unknown. One of these changes is increased production of free radicals that causes oxidative stress. Antioxidants participate in nerve repair through the scavenging effect of oxygen free radicals. In this research we studied gene expression of metallothionein 1 and 2 molecules after sciatic nerve crush in rats. Materials and methods: The sciatic nerve of 40 adult Wistar rats was crushed. In day 1 and 3 and week 1, 3, and 5 after injury the sciatic crushed nerves were extracted. Total mRNA of samples was extracted and then cDNA was synthesized. The expression of metallothionein 1and 2 genes was confirmed using semiquantitative RT-PCR (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction) analysis. For immunohistochemistry analysis the samples were fixed in paraformaldehyde and cut in 20 micrometer slices by cryostat. Results: The results showed that the expression of metallothionein was significantly higher in day 1 and 3 after crush injury compared with that of the intact (non-injured) nerves (P<0.0001). Immunohistochemistry results also confirmed the protein expression of these genes. Conclusion: The sciatic nerve injuries cause oxidative stress. This research found maximum up-regulation of metallothionein molecules in regeneration process, when oxidative stress have maximum peak and with more studies it may suggest as new complemental treatment. آسیب له شدگی, استرس اکسیداتیو, آنتی اکسیدان, متالوتیونین 1و2 Crush injury, oxidative stress, antioxidant, metallothionein 1 and 2. 170 182 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-5029-2&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Aghanassir فاطمه آقانصیر 100319475328460050666 100319475328460050666 No MSc in Physiology, Faculty of Medicine, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran کارشناسی ارشد فیزیولوژی، گروه فیزیولوژی و بیو فیزیک، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)، تهران، ایران Hassan Aghaei حسن آقایی 100319475328460050667 100319475328460050667 No Assistant Professor, Department of Physiology, Faculty of Medicine, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran استادیار، گروه فیزیولوژی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران Abbas Ali Imani Fouladi عباسعلی ایمانی فولادی 100319475328460050668 100319475328460050668 No Associate Professor, Applied Microbiology Research Center, Faculty of Medicine, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran دانشیار، مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)، تهران، ایران Mohammad Reza Nourani محمدرضا نورانی r.nourani@yahoo.com 100319475328460050669 100319475328460050669 Yes Associate Professor, Nano-Biotechnology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran دانشیار، مرکز تحقیقات نانوبیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)، تهران، ایران