fa تأثیر میتومایسین C و همکشتی با سلول های فیبروبلاست و کومولوس بر بلوغ آزمایشگاهی اووسیت های نابالغ موش سوری پژوهشي-کامل Research(Original) <p dir="RTL">سابقه و هدف: میتومایسین <span dir="LTR">C</span> که به منظور جلوگیری از تکثیر سلول‌های همکشتی در کشت سلول به کار می‌رود، ممکن است با تأثیر مخرب خود بر این سلول‌ها نهایتاً اثرات نامطلوبی بر بلوغ اووسیت‌ها بگذارد. این مطالعه با هدف بررسی تاثیر میتومایسین و همکشتی سلول‌های فیبروبلاست و کومولوس بر بلوغ آزمایشگاهی اووسیت‌های نابالغ موش انجام گرفت.</p> <p dir="RTL">مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، اووسیت‌های مرحله وزیکول زایا به دست آمده از موش‌های سوری در محیط <span dir="LTR">a</span><span dir="LTR">MEM</span> تکمیل شده با <span dir="LTR">FSH</span>،<span dir="LTR">hCG </span>، سرم جنینی گاوی، پنی‌سیلین و استرپتومایسین در گروه‌های ذیل کشت شدند: گروه کنترل و گروه‌های آزمایشی 1: همکشتی با سلول‌های کومولوسی، 2: همکشتی با فیبروبلاستی جنینی موش، 3- همکشتی با سلول‌های کومولوسی تیمار شده با میتومایسین <span dir="LTR">C</span>، 4- همکشتی با فیبروبلاست جنینی موش تیمار شده با میتومایسین <span dir="LTR">C</span>. پس از 24 ساعت، تعداد اووسیت‌های بالغ نشده، متافاز <span dir="LTR">II</span>، <span dir="LTR">GVBD</span> و دژنره شده با استفاده از میکروسکوپ معکوس بررسی شد. آنالیز واریانس و مقایسه میانگین ها با استفاده از آزمون <span dir="LTR">Tukey</span> انجام گرفت.</p> <p dir="RTL">یافته‌ها: درصد اووسیت های مرحله وزیکول زایا (75/2&plusmn;24) و متافاز <span dir="LTR">II</span> (28/2&plusmn;51) در گروه کنترل با اختلاف معنی‌داری به ترتیب بیش‌تر از 25/2&plusmn;8 و 29/2&plusmn;10 و 28/2&plusmn;10 و19/1&plusmn;11 و کم تر از 34/2&plusmn;64 و 62/2&plusmn;63 و 86/2&plusmn;62 و 47/2&plusmn;62 همه گروه‌های آزمایشی بود. با این حال، بین گروه‌های آزمایشی اختلاف معنی‌داری مشاهده نشد.</p> <p dir="RTL">استنتاج: همکشتی با سلول های فیبروبلاست و کومولوس باعث بهبود بلوغ آزمایشگاهی اووسیت‌های نابالغ گردید و با توجه به عدم وجود اختلاف معنی‌دار بین گروه‌های آزمایشی می‌توان حذف بخش غیرفعال سازی سلول‌های مذکور با میتومایسین را از پروتکل‌های رایج پیشنهاد نمود.</p> <p><strong>Background and purpose:</strong> Mitomycin C (MMC) is used as an antiproliferative agent for feeder cells in cell culture. It may induce destructive effects on these cells and eventually on oocytes maturation. This study was conducted to investigate the effect of MMC and co-culturing with fibroblast and cumulus cells on in vitro maturation (IVM) of mouse immature oocytes.</p> <p><strong>Materials and methods:</strong> In this experimental study, germinal vesicle oocytes (GV) obtained from NMRI mature female mice were cultured in &alpha;MEM supplemented by FSH, hCG, fetal bovine serum (FBS), penicillin and streptomycin, at 37 &deg;C and 5% CO2 in following groups: a control group and four experimental groups; 1&ndash; co-cultured with cumulus cells, 2 &ndash; co-cultured with mouse embryonic fibroblast (MEF) cells, 3 - co-cultured with cumulus cells treated with MMC, and 4 - co-cultured with MEF treated with MMC. After 24 hours, number of GV, GVBD, MII and degenerated oocytes were determined using invert microscope. Data were analyzed using ANOVA with Tukey test.</p> <p><strong>Results:</strong> The percentages of GV (24&plusmn;2.75) and MII (51&plusmn;2.28) oocytes in control group were significantly higher (8&plusmn;2.25, 10&plusmn;2.29, 10&plusmn;2.28, 11&plusmn;1.19) and lower (64&plusmn;2.34, 63&plusmn;2.62, 62&plusmn;2.86, 62&plusmn;2.47) than those in all experimental groups, respectively. Nevertheless, no significant difference was observed between experimental groups<span dir="RTL">.</span></p> <p><strong>Conclusion:</strong> Co-culturing with fibroblast and cumulus cells promoted in vitro maturation of immature oocytes. There was no significant difference among experimental groups, therefore, removal of monolayer inactivation step by MMC from such protocols can be proposed.</p> میتومایسین C, بلوغ آزمایشگاهی, فیبروبلاست جنینی موش, سلول‌های کومولوسی, همکشتی Mitomycin C, in vitro maturation, mouse embryonic fibroblast, cumulus cells, co-culture 218 226 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-5029-194&slc_lang=fa&sid=1 Mehran Davarifar مهران داوری فر 100319475328460084425 100319475328460084425 No MSc in Cellular and Developmental Biology, Islamic Azad University, Qaemshahr Branch, Qaemshahr, Iran کارشناس ارشد زیست شناسی سلولی تکوینی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قائم شهر، قائم شهر، ایران Ramazan Khanbabaee رمضان خان بابایی 100319475328460084426 100319475328460084426 No Assistant Professor, Department of Biology, Islamic Azad University, Qaemshahr Branch, Qaemshahr, Iran . استادیار، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قائم شهر، قائم شهر، ایران Mahmoud Heidari محمود حیدری mahmodh78@gmail.com 100319475328460084427 100319475328460084427 Yes Assistant Professor, Department of Biology, Islamic Azad University, Gorgan Branch, Gorgan, Iran استادیار، گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد گرگان، گرگان، ایران