Journal of Mazandaran University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران
J Mazandaran Univ Med Sci
Medical Sciences
http://jmums.mazums.ac.ir
1
admin
1735-9260
1735-9279
fa
jalali
1381
12
1
gregorian
2003
3
1
13
38
online
1
fulltext
fa
طراحی کیت آنتی بادی ضد فاکتور پری نوکلئر (APF) به روش ایمنوفلورسانس و ارزیابی آن در بیماران آرتریت روماتوئید
Designing of pernucleare factor antibody (APF) by immunofluorescence assay and its evaluation in rheumatoid arthritis (RA) patients.
پژوهشي-کامل
Research(Original)
<div style="text-align: justify direction: rtl">
<span style="font-weight: bold">سابقه و هدف:</span> آرتریت روماتویید از بیماری های روماتیسمی منتشر خود ایمن است. در این بیماری، اتوآنتی بادی هایی کشف شده اند که از نظر تشخیص و پیش آگهی با ارزش می باشند. یکی از این آنتی بادی ها، آنتی بادی ضد فاکتور پری نوکلئر است که با گرانول های کراتوهیالن سلول های مخاطی دهان واکنش می دهد. بنابراین ابتدا کیت APf-IfA را طراحی و سپس میزان آنتی بادی را در بیماران آرتریت روماتوئید بررسی نمودیم.<br><span style="font-weight: bold">مواد و روش ها:</span> طراحی کیت شامل: 1- شناسایی کننده های مناسب؛ 2- آماده سازی سویسترای آنتی ژنیک و 3- بهینه سازی روش وکنترل کیفیت می باشد.این روش براساس اتصال APF با گرانول های کراتوهیالن سلول های مخاطی دهان شناسایی آن با استفاده از آنتی هیومن گلویولین تام کونژوگه به ماده فلورسنت می باشد. پس از کالیبراسیون کونژوگونه، سنجش APF بارقت های 5/1 و 10/1 تا 1280/1 در سه گروه بیماران آرتریت روماتویید [52 نفر با میانگین سنی [(48±15.8)، گروه کنترل بیمار [23 نفر با میانگین سنی [(32.5±16.9) و گروه کنترل سالم [30 نفر با میانگین سنی [(32.1±16.9) انجام شد.<br><span style="font-weight: bold">یافته ها:</span> از 52 بیمار آرتریت رماتویید 37 مورد (71.2 درصد) APFمثبت و در گروه کنترل بیمار 2 مورد (8.7 درصد) و در گروه کنترل سالم یک مورد (3.3 درصد) APFمثبت بود.کیت طراحی شده APF از دقت 98 درصد به روش Inter and intra assay برخوردار بوده و حساسیت و اختصاصی بودن تست APF در رقت 5/1 سرم به ترتیب 71.2 و 94.3 درصد بوده است. <br><span style="font-weight: bold">استنتاج:</span> با توجه به نتایج، بهترین حساسیت و اختصاصی بودن آزمایش برای بیماران آرتریت روماتویید، تیتر 5/1 بود؛ یعنی رقت 5/1 به عنوان Cut off یا حداقل تیتر معنی دار در تشخیص و تایید آرتریت روماتویید می باشد و با توجه به دقت 98 درصدی کیت طراحی شده سنجش APF-IFA دارای اعتبار تشخیص متوسط و تاییدی بالا برای آرتریت روماتویید است. همچنین مقایسه بین گروه های مورد آزمایش نشان داد که بین غلظت APF و شدت بیماری ارتباط معنی دار وجود دارد (P=0.05). در حالی که ارتباط معنی دار بین تیتر APF و ابتلای خارج مفصلی، ظرفیت علمی، جنسیت، سن، سن شروع بیماری و مدت بیماری دیده نشد.
</div>
<span style="font-weight: bold">Background and purpose: </span>Rheumatiod arthritis (RÂ) is one of systemic autoimmune disease. Ïn this disease, autoimmune antibodies are discovered, which have diagnostic and prognostic properties. Ône of them is ÂPF, that can react with keratohyalin granules of buccal mucosal cell. Therefore, at first ÂPF-ÏFÂ kit was designed and then antibody titer (Âb) was evaluated in RÂ patients.
<br><span style="font-weight: bold">Materials and methods:</span> Designing of kit was as follow: 1- Ïdentification of satisfactory donors. 2- Ântigenic substrate preparation. 3- Ïmprovement of method and quality control.
The method is based on the binding of ÂPF to Perinuclear Keratohyaline line granules of buccal mocusal cells and its detection with total Ânti Human Globulin (ÂHG) conjugated to FÏTÇ.
Âfter calibration of ÂHG, ÂPF assayed in sera dilution of , to in three RÂ patients (52 RÂ patients mean age 48.0 ± 15.8), 23 sera of patient control groups (Mean age 32.5 ± 16.4) and 30 sera of healthy control group (mean age 32.1 ± 16.9).
<br>
<span style="font-weight: bold">Results : </span>From total of 52 RÂ patients (71.2%) were ÂPF positive, in 2(8.7%) cases and in healthy control group 1(3.3%) case were ÂPF positive.
The designed ÂPF kit had 98% accuracy by inter and intra assay methods. Sensitivity and specificity of ÂPF in serum dilution was 71.2% and 94.3% respectively.
<br>
<span style="font-weight: bold">Çonclusion:</span> Âccording to the results of this study, 1/5 serum dilution has best diagnostic value for RÂ for best sensitivity and specificity, that means, 1/5 as a cutt off, or significant minimum dilution in diagnosis and approving of RÂ, and considering 98% accuracy of designed kit, ÂPF-ÏFÂ assay has medium diagnosis and high aproving property for RÂ patients. Âlso Çomparison between differant groups under investigation showed that there is significant relationship between concentration of ÂPF and Severity of disease.
آرتریت روماتویید، تکنیک آنتیبادی ایمونوفلورسانس
Ârthristis-Rheumatoid, Fluorescent Ântibody Technique
11
19
http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-747&slc_lang=fa&sid=1
F
Âbedyan
فرشیده
عابدیان
10031947532846007150
10031947532846007150
Yes
A.R
Rezaee
سیدعبدالرحیم
رضایی
10031947532846007151
10031947532846007151
No
H
Baradaran
حسن
برادران
10031947532846007152
10031947532846007152
No
M
Saghafi
مسعود
ثقفی
10031947532846007153
10031947532846007153
No
S.R
Mazalom
سیدرضا
مظلوم
10031947532846007154
10031947532846007154
No