fa جهش های ژن gyrA در جدایه های سودوموناس آئروزینوزا مقاوم به فلوروکوئینولون ها در استان گیلان نوزادان infants پژوهشي-کامل Research(Original) <p dir="RTL">سابقه و هدف: سودوموناس آئروژینوزا یک پاتوژن مهم فرصت طلب در افراد مبتلا به بیماری تنفسی مزمن یا افراد با نقص ایمنی است. این باکتری مقاومت ذاتی و اکتسابی به انواع آنتی‌بیوتیک‌ها را نشان می‌دهد. یک مکانیسم مهم مقاومت به فلوروکوئینولون‌ها در سودوموناس آئروژینوزا جهش در <em><span dir="LTR">gyrA</span></em><em>،</em> یک زیرواحد توپوایزومراز نوع <span dir="LTR">II</span> می باشد. هدف از این مطالعه بررسی جهش‌های ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> در جدایه های مقاوم به دارو در استان گیلان بود.</p> <p dir="RTL">مواد و روش‌ها: در این مطالعه مقطعی، 44 جدایه سودوموناس آئروژینوزا جدا شده از نمونه‌‌های مختلف از جمله سوختگی، ادرار و ترشحات تنفسی به کمک روش‌های بیوشیمیایی تعیین هویت شدند. حساسیت و مقاومت به آنتی بیوتیک به روش کربی بور تعیین گردید. از آزمون <span dir="LTR">&chi;²</span> بهره برده شد و برای معنی‌دار بودن نتایج 05/0<span dir="LTR"><</span> <span dir="LTR">P</span> &nbsp;لحاظ شد. برای بررسی جهش های ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> در جدایه های مقاوم به سیپروفلوکساسین، <span dir="LTR">PCR</span>- سکونسینگ انجام شد. نرم افزار <span dir="LTR">CLCmain workbench v3.5</span> و نرم افزار بلاست (<span dir="LTR">BLAST</span>) برای مقایسه توالی ژن <span dir="LTR">gyrA</span> در جدایه‌های مقاوم با ژن رفرنس در <span dir="LTR">PAO1</span> مورد استفاده قرار گرفتند.</p> <p dir="RTL">یافته‌ها: بالاترین میزان مقاومت به سیپروفلوکساسین در جدایه‌ها <span dir="LTR">MIC>512</span><span dir="LTR"> &micro;g/ml</span> بود. دو جهش <span dir="LTR">T83I</span> و <span dir="LTR">D87Y</span> در ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> در جدایه‌های مقاوم شناسایی شد. هم‌چنین این مطالعه نشان داد که بین میزان <span dir="LTR">MIC</span> در جدایه‌های مقاوم به سیپروفلوکساسین و جهش در ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> ارتباطی وجود ندارد.</p> <p dir="RTL">استنتاج: این نتایج نشان می‌دهد که جهش در ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> یکی از مهم‌ترین مکانیسم‌های مقاومت به سیپروفلوکساسین در جدایه‌های کلینیکی سودوموناس آئروژینوزا در گیلان بوده و به نظر می‌رسد جهش در <em><span dir="LTR">&nbsp;gyrA</span></em>به همراه چند ژن درگیر در ایجاد مقاومت، باعث افزایش مقاومت در جدایه‌های مختلف شده باشد.</p> <p><strong>Background and purpose:</strong><em> Pseudomonas aeruginosa</em> is an opportunistic pathogen in patients with chronic respiratory disease or in immunocompromised hosts. This bacterium shows intrinsic and acquired resistance to diverse antimicrobial agents. An important mechanism of resistance to fluoroquinolones in <em>P. aeruginosa</em> is the mutation in <em>gyrA</em>, a subunit of topoisomerases II. The aim of this study was to investigate the <em>gyrA</em> mutations in ciprofloxacin resistant isolates in Guilan province.</p> <p><strong>Materials and methods:</strong> In this cross-sectional study, 44 <em>P. aeruginosa</em> strains were isolated from different clinical samples such as burn, urine and respiratory secretions identified by biochemical tests. The antibiotic resistance and susceptibility of strains was determined by Kirby Bauer method. Chi-square test was carried out and<em> P</em> value of < 0.05 was considered statistically significant. PCR-sequencing was carried out to assess the <em>gyrA</em> mutations in drug resistant isolates. CLC main workbench v3.5 and BLAST softwares was used to compare <em>gyrA</em> sequence in resistant isolates with reference gene in PAO1.</p> <p><strong>Results:</strong> The highest MIC of ciprofloxacin in some strains was >512 &mu;g/ml. T83I and D87Y mutations were determined in <em>gyrA</em> gene in resistance isolates. Also, this study showed no relationship between MIC of ciprofloxacin in resistant isolates and mutation in <em>gyrA.</em></p> <p><strong>Conclusion:</strong> These results demonstrated that <em>gyrA</em> mutations are one of the most important mechanisms of resistance to ciprofloxacin in clinical strains of <em>P. aeruginosa</em> in Guilan. It is believed that mutations in <em>gyrA </em>alongside several genes that are involved in development of resistance have increased the resistance in different strains.</p> سودوموناس آئروژینوزا, کوئینولون, gyrA, جهش Pseudomonas aeroginosa, Quinolone, gyrA, Mutation 84 92 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-29-428&slc_lang=fa&sid=1 Forough Rahnamay Roodposhti فروغ رهنمای رودپشتی 100319475328460085452 100319475328460085452 No MSc in Microbiology, Faculty of Sciences,Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran کارشناس ارشد میکروبیولوژی، دانشکده علوم، واحد رشت، دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران Najmeh Ranji نجمه رنجی n_ranji@iaurasht.ac.ir 100319475328460085453 100319475328460085453 Yes Assistant Professor, Department of Genetics, Faculty of Sciences, Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran استادیار، گروه ژنتیک، دانشکده علوم، واحد رشت،دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران Leila Asadpour لیلا اسدپور 100319475328460085454 100319475328460085454 No Assistant Professor, Department of Microbiology, Faculty of Sciences, Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran استادیار، گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم، واحد رشت، دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران