fa بهبود تمایز نوروگلیال از سلول های بنیادی پالپ دندان انسانی توسط مایع مغزی-نخاعی بيولوژي Biology پژوهشي-کامل Research(Original) <p dir="RTL">سابقه و هدف: مایع مغزی- نخاعی (<span dir="LTR">CSF</span>) دارای طیف وسیعی از مولکول‌های ضروری در فرآیند نوروژنزیس است. سلول‌های بنیادی پالپ دندان انسانی (<span dir="LTR">hDPSCs</span>) که از سلول‌های ستیغ عصبی مشتق شده‌اند، می‌توانند در حضور فاکتورهای نوروتروفیک مناسب به سلول‌های گلیال و نورون تمایز یابند. هدف از این مطالعه القای تمایز <span dir="LTR">hDPSCs</span> به سلول‌های نوروگلیال با استفاده از اسید رتینوئیک و <span dir="LTR">CSF</span> است.</p> <p dir="RTL">مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، <span dir="LTR">hDPSCs</span> از دندان مولار سوم انسانی به روش مکانیکی- آنزیمی جدا و کشت داده شدند. 10⁵ &times; 2 سلول به هر یک از چاهک‌های پلیت 6 خانه‌ای منتقل و با اسیدرتینوئیک (گروه 1، گروه <span dir="LTR">RA</span>) و <span dir="LTR">CSF</span> (گروه 2، گروه <span dir="LTR">CSF</span>) به مدت 8 روز القاء شدند. هم‌چنین به مدت 4 روز توسط اسید رتینوئیک و 4 روز توسط <span dir="LTR">CSF</span> (گروه 3، گروه <span dir="LTR">RC</span>) تیمار شدند. ایمنوسیتوشیمی <span dir="LTR">Nestin</span>، <span dir="LTR">&beta;III-tubulin</span> و <span dir="LTR">GFAP</span> جهت ارزیابی استفاده شدند. طول آکسون سلول‌ها به روش نیترات نقره بررسی و اجسام نیسل با کریزل ویوله رنگ‌آمیزی شد. محاسبات آماری توسط نرم‌افزار <span dir="LTR">SPSS 16</span> و با آزمون‌های آماری <span dir="LTR">One-way ANOVA</span> و <span dir="LTR">Chi Square</span> انجام گرفت.</p> <p dir="RTL">یافته‌ها: مورفولوژی سلول‌های تمایز یافته به طور مشخص در گروه‌های تمایزی بعد از روز 5-3 تغییر یافت. نتایج ایمنوسیتوشیمی نشان داد که <span dir="LTR">Nestin</span> در همه گروه‌ها بیان شد. هم‌چنین بیش‌ترین درصد سلول‌های بیان‌کننده <span dir="LTR">Nestin</span> و <span dir="LTR">&beta;III-tubulin</span> به ترتیب در مراحل پیش‌القایی و القایی مشاهده شدند. اجسام نیسل به صورت ذرات توپر بنفش رنگ در سیتوپلاسم سلول‌های تمایز یافته شناسایی شدند.</p> <p dir="RTL">استنتاج: یافته‌ها نشان می‌دهد که می‌توان از اسید رتینوئیک به عنوان پیش القاگر و <span dir="LTR">CSF</span> به عنوان القاگر جهت تمایز در شرایط آزمایشگاهی <span dir="LTR">hDPSCs</span> به سلول‌های نوروگلیال استفاده کرد.</p> <p><strong>Background and purpose:</strong> Cerebrospinal fluid (CSF) has a broad set of molecules which is essential for neurogenesis. Human dental pulp stem cells (hDPSCs) are putatively neural crest cell-derived that can differentiate into neurons and glial cells under appropriate neurotrophic factors. The aim of this study was to induce differentiation of hDPSCs into neuroglial phenotypes using Retinoic acid (RA) and CSF.</p> <p><strong>Materials and methods:</strong> The hDPSCs were isolated by mechanical enzymatic digestion from an impacted third molar and cultured. 2 &times; 10⁵ cells were treated by 10^-7 &micro;M Retinoic acid (RA group) for 8 days, CSF (CSF group) for 8 days and pre-induced with RA for 4 days followed by inducing with CSF for 4 days (RC group). Nestin, &beta;III-tubulin and GFAP immunostaining were used for evaluating the differentiated cells. Axonal outgrowth was detected using Bielschowsky&#39;s silver impregnation method and Nissl bodies were stained in differentiated cells by Cresyl violet. Data analysis was performed in SPSS V.16 applying One-way ANOVA and Chi-square test.</p> <p><strong>Results:</strong> The morphology of differentiated cells in treated groups significantly changed after 3-5 days. The immunocytochemistry results showed that nestin, the neuroprogenitor marker, was observed in all groups. Whereas, a high percentage of nestin positive cells and &Beta;III-tubulin, as mature neural markers, were seen at the pre-induction and induction stage, respectively. Nissl bodies were detected as dark-blue particles in the cytoplasm of treated cells.</p> <p><strong>Conclusion:</strong> The findings suggest that the RA as pre-inducer and CSF as inducer could be used for in vitro differentiation of neuroglial cells from hDPSCs.</p> سلول بنیادی پالپ دندان انسانی, مایع مغزی-نخاعی, اسید رتینوئیک, نوروگلیال, تمایز hDPSCs, cerebrospinal fluid, retinoic acid, neuroglial, differentiation 1 14 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-5029-317&slc_lang=fa&sid=1 Sara Haratizadeh سارا هراتی زاده 100319475328460066076 100319475328460066076 No MSc Student in Anatoimical Sciences, Student Research Committee, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran دانشجوی کارشناسی ارشد علوم تشریحی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Maryam Nazm Bojnordi مریم نظم بجنوردی 100319475328460066077 100319475328460066077 No Assistant Professor, Department of Anatomy & Cell Biology, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran 3 Assistant Professor, Molecular and Cell biology Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran استادیار، گروه آناتومی و بیولوژی سلولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران 3. استادیار، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران Ali Niapour علی نیاپور 100319475328460066078 100319475328460066078 No Assistant Professor, Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, Ardabil University of Medical Sciences, Ardabil, Iran استادیار، گروه آناتومی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اردبیل، اردبیل، ایران Mehrdad Bakhtiari مهرداد بختیاری 100319475328460066079 100319475328460066079 No Associate Professor, Department of Anatomy & Cell Biology, Cellular and Molecular Research Center, Faculty of Medicine, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran دانشیار، گروه آناتومی، مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران Hatef Ghasemi Hamidabadi هاتف قاسمی حمیدآبادی h.ghasemi@mazums.ac.ir 100319475328460066080 100319475328460066080 Yes Assistant Professor, Department of Anatomy & Cell Biology, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran Assistant Professor, Immunogenetic Research Center, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran استادیار، گروه آناتومی و بیولوژی سلولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران استادیار، گروه آناتومی و بیولوژی سلولی، مرکز تحقیقات ایمنوژنتیک، دانشگاه علوم پزشکی مازندران، ساری، ایران