Journal of Mazandaran University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران
J Mazandaran Univ Med Sci
Medical Sciences
http://jmums.mazums.ac.ir
1
admin
1735-9260
1735-9279
fa
jalali
1390
10
1
gregorian
2012
1
1
21
86
online
1
fulltext
fa
ارزیابی مقایسهای مایع کیست هیداتیک با سرم جنین گاو در محیط کشت سلول فیبروبلاست موش صحرایی
Comparative Evaluation of Hydatid Cyst Fluid and Fetal Bovine Serum (FBS) in Culture Medium of Rat Fibroblast Cells
پژوهشي-کامل
Research(Original)
چکیده
سابقه و هدف : متداولترین سرم مصرفی برای رشد بهتر سلولها در محیط کشت، سرم جنین گاو میباشد. با توجه به قیمت گران این سرم، این مطالعه با هدف ارزیابی مایع کیست هیداتیک به عنوان جایگزین سرم جنین گاو در محیطهای کشت سلول فیبروبلاست جدا شده از موش صحرایی انجام شد.
مواد و روشها: در این تحقیق تجربی از سلولهای فیبروبلاست، ناحیه درم پوست ناحیه کشاله ران و شکم موش صحرایی استفاده شد. فیبروبلاستها توسط آنزیم تریپسین 25/0 درصد از سایر سلولها جدا شده و در محیط پایه RPMI حاوی 20 درصد سرم جنین گاو (FBS) کشت داده شدند. پس از رشد و تکثیر کافی سلولها، آنها را جدا نموده و در چاهکهای پلیت 24 خانهای بهصورت سه رقت متوالی بهترتیب حاوی محیط کشت PRMI خالص و محیط کشت PRMI حاوی 10 و 20 درصد سرم جنین گاو بهعنوان شاهد و محیط کشت PRMI حاوی10 و 20 درصد مایع کیست هیداتیک گوسفندی کشت داده شدند. سپس میزان تکثیر و بقاء سلولهای فیبروبلاست تا سه روز متوالی به ترتیب با استفاده از میکروسکوپ معکوس(بررسی مورفولوژی) و رنگ حیاتی تریپان بلو 4/0 درصد (ارزیابی کمی) مورد بررسی قرارگرفت.
یافتهها: سلولهای فیبروبلاست در محیطهای کشت RPMI با غلظتهای 10 و 20 درصد سرم جنین گاو طی سه روز رشد و تکثیر طبیعی داشتند و میزان بقاء 95درصد بود. در مقابل، سلولهای فیبروبلاست در محیطهای کشت حاوی مایع کیست هیداتیک با غلظتهای 10 و 20 درصد، از حالت دوکی به شکل گرد تبدیل شدند و 80 درصد آنها طی سه روز متوالی زنده بودند.
استنتاج: نتایج نشان داد که میتوان تا 72ساعت از مایع کیست هیداتیک به عنوان جایگزین برای سرم جنین گاو در محیط کشت RPMI و یا به عنوان محیط ترانسپورت (انتقال) برای نگهداری کوتاه مدت سلولهای فیبروبلاست استفاده نمود.
Abstract
Background and purpose: The most common serum used in culture media is fetal bovine serum (FBS). Given that FBS is costly, this study aimed at evaluating the hydatid cyst fluid (HCF) as a substitute for FBS in culture medium of fibroblast cells isolated from rat.
Materials and methods: In this experimental study, skin dermal area from inguinal and abdomen of rat were used for fibroblast preparation. Fibroblasts cells were isolated using trypsin enzyme and then were cultured in RPMI medium (including 20% FBS). After sufficient cell growth, they were isolated and cultured in 24-well microtiter plate in three successive concentrations as follows: pure RPMI and RPMI medium supplemented with 10% and 20% FBS as control groups, and RPMI medium supplemented with 10% and 20% HCF. Then survival rate and proliferation level were checked in three successive days using invert microscope (morphology evaluation) and trypan blue 0.4% as vital dye (quantitative evaluation), respectively.
Results: Proliferation and growth of fibroblast cells in RPMI medium supplemented with 10% and 20% FBS concentrations were normal during the three days with 95% survival rate. In contrast, fibroblast cells in RPMI medium supplemented with 10% and 20% HCF concentrations were converted from normal to spherical form over the three days and 80 % of them were alive.
Conclusion: The results indicated that we can apply HCF as an alternative for FBS up to 72h in RPMI medium. It can also be used as transport or short maintenance media for fibroblast cells.
واژههای کلیدی: سلولهای فیبروبلاست، محیط کشت، مایع کیست هیداتیک، سرم جنین گاو، موش صحرایی
Key words: Fibroblast cells, RPMI medium, hydatid cyst fluid (HCF), fetal bovine serum (FBS), rat
213
221
http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-30-8&slc_lang=fa&sid=1
Mahdi
Fakhar
مهدی
فخار
100319475328460012097
100319475328460012097
No
گروه انگل شناسی و قارچ شناسی، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی ساری، دانشگاه علوم پزشکی مازندران
Mansoureh
Mirzaei
منصوره
میرزایی
100319475328460012098
100319475328460012098
No
بخش پاتولوژی، بیمارستان بوعلی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران
Alireza
Rafiei
علیرضا
رفیعی
rafiei1710@gmail.com
100319475328460012099
100319475328460012099
Yes
Department of Immunology and Bacteriology, Molecular and Cellular Biology Research Center, Faculty of Medicine, Mazandaran University of Medical Sciences, Sari, Iran
گروه ایمونولوژی و باکتری شناسی، مرکز تحقیقات بیولوژی سلولی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران
Saber
Armat
صابر
آرمات
100319475328460012100
100319475328460012100
No
کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران
Milad
Mojtahedian
میلاد
مجتهدیان
100319475328460012101
100319475328460012101
No
کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی مازندران