fa کلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب زیرواحد بتای هورمون TSH انسانی (TSHβ) و ارزیابی آنتیژنیسیته آن غدد Endocrine diseases پژوهشي-کامل Research(Original) <p><strong>سابقه و هدف:</strong> اندازه گیری هورمون متحرک تیروئید (TSH) برای تشخیص و بررسی اختلالات تیروئیدی، بسیار مفید بوده و معمولا از آزمون های RIA و ELISA برای این منظور می شود. با توجه به اینکه زنجیره آلفا بین TSH و سه هورمون گلیکوپروتئینی LH, FSH و CG شباهت ساختمانی زیادی وجود دارد؛ بنابراین، در پژوهش حاضر سعی بر آن است که زیر واحد بتا TSH، تولید شده و از نظر آنتی ژنیسته مورد بررسی قرار می گیرد.</p> <p><strong>مواد و روش ها:</strong> در این پژوهش تجربی، ژن<strong>&nbsp;</strong>TSH&beta;​ انسانی به روش نوترکیب سنتز و مراحل کولینگ، بیان و تخلیص در باکتریE.coli) Escherichia coli​) انجام شد. سپس، آنتی ژنیسیته پروتئین آن با تکنیک وسترن بلات&nbsp;(Western Blot)​ علیه آنتی بادی های ضد&nbsp;TSH​ منو نوکلئان حیوانی مورد بررسی قرار گرفت.</p> <p>یافتهها: ژن TSH&beta;،&nbsp;به درستی در میزبان باکتریایی، کلون و بیان گردید و پروتئین خالص شده با آنتی بادی اختصاصی&nbsp;در تکنیک وسترن بلات واکنش نشان داد.</p> <p><strong>استنتاج:&nbsp;</strong>پروتئین​&nbsp;TSH&beta;​&nbsp;نوترکیب، با وجود داشتن تفاوت هایی مانند ساختار و شکل فضایی با پروتئین طبیعی​&nbsp;آنتی ژنیسیته قابل قبولی داشت. از سوی دیگر، به نظر می رسد این پروتئین به دلیل داشتن اپی توپ های​&nbsp;TSH​&nbsp;بیشتر،​&nbsp;قابلیت​&nbsp;جایگزینشدن جهت استفاده در کیت های تشخیصی و غیره را برای افزایش اختصاصی شدن این آزمایش ها دارد.​</p> <p><strong>Background and purpose:</strong> Measurement of thyroid stimulating hormone (TSH), usually through RIA and ELISA tests, is very useful for the diagnosis of thyroid disorders. Considering the structural similarity between alpha chain of TSH and the three glycoprotein hormones of luteinizing hormone, follicle stimulating hormone, and chorionic gonadotropin (CG), in this study, we aimed to examine the produced beta-subunit of TSH (TSH&beta;) in terms of antigenicity.<br> <strong>Materials and methods:</strong> In this study, human TSH&beta; gene was synthesized using recombinant&nbsp;method. The cloning, expression, and purification were performed in Escherichia coli. Thereafter, antigenicity of the protein against antibodies against animal monoclonal TSH was evaluated using<br> Western Blot technique.<br> <strong>Results: </strong>TSH&beta; gene was cloned and expressed correctly in the bacterial host. The purified protein reacted with the specific antibody in Western Blot.<br> <strong>Conclusion:</strong> Although recombinant TSH&beta; protein is different from the natural protein in some respects such as structure and spatial shape, it had acceptable antigenicity. On the other hand, it seems that this protein, due to having more TSH epitopes, can be applied in diagnostic kits to enahance the<br> specificity of these tests.</p> الایزا, پروتئین نوترکیب, زیرواحد بتای تیروتروپین, کلونینگ, هورمون محرک تیروئید ELISA, molecular cloning, recombinant protein, thyroid stimulating hormone, thyrotropin beta subunit 87 96 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4374-27&slc_lang=fa&sid=1 Hadi Mohammadzade هادی محمد زاده 100319475328460084592 100319475328460084592 No گروه زیست فناوری پزشکی، دانشکده پزشکی، Behzad Khansarinejad بهزاد خوانساری نژاد 100319475328460084593 100319475328460084593 No گروه میکروبشناسی و ایمنیشناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران Abdolrahim Sadeghi عبدالرحیم صادقی 100319475328460084594 100319475328460084594 No مرکز تحقیقات غدد و متابولیسم، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران Hamid Abtahi حمید ابطحی abtahi@arakmu.ac.ir 100319475328460084595 100319475328460084595 Yes مرکز تحقیقات پزشکی و مولکولی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اراک، اراک، ایران