Journal of Mazandaran University of Medical Sciences

fa اثر رنگدانه روتین بر فرایندهای میتوفاژی و استرس اکسیداتیو ناشی از بیسفنل-آ در رده سلول های سرتولی (TM4 cell line) The Effects of Rutin on Mitophagy and Oxidative Stress Induced by Bisphenol A in Sertoli Cells (TM4 Cell Line) فارماسیوتیکس(داروسازی صنعتی) Pharmaceutics پژوهشي-کامل Research(Original) سابقه و هدف: بیسفنول (BPA ) A یک ماده مختل‌ کننده غدد درون‌ریز است که با استرس اکسیداتیو و اختلال عملکرد میتوکندری در سلول‌های تولید مثلی مرتبط است. روتین، یک فلاونوئید طبیعی با خواص آنتی ‌اکسیدانی، ممکن است از سلول‌ها در برابر آسیب اکسیداتیو محافظت کند. این مطالعه با هدف بررسی اثرات محافظتی روتین در برابر استرس اکسیداتیو و اختلال عملکرد میتوکندری ناشی از BPA و ارزیابی تغییرات بیان ژن‌های مرتبط با میتوفاژی در سلول‌های سرتولی  TM4انجام شد. مواد و روش ‌ها: این مطالعه تجربی – آزمایشگاهی، سلول‌های سرتولی TM4 در معرض BPA به‌تنهایی یا همراه با غلظت‌های مختلف روتین قرار گرفتند. زنده‌مانی سلولی با آزمون MTT و میزان پروتئین با روش برادفورد ارزیابی شد. پتانسیل غشای میتوکندری و سطوح گونه‌های فعال اکسیژن با اسپکتروفلوریمتر اندازه‌گیری شدند. بیان ژن‌های <a href="https://en.wikipedia.org/wiki/PINK1">PINK1</a>، <a href="https://www.genecards.org/card/BNIP3">BNIP3</a> و Parkin با واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) زمان واقعی ارزیابی شد. همچنین، سطوح <a name="_Hlk237273685">مالون‌دی‌آلدئید</a>، <a name="_Hlk237273771">گلوتاتیون</a> و فعالیت آنزیم‌های <a name="_Hlk237273740">کاتالاز</a>، <a name="_Hlk237273698">سوپراکسید دیسموتاز </a>و گلوتاتیون پراکسیداز با روش‌های اسپکتروفتومتری اندازه‌گیری شدند. یافته‌ها: روتین به‌طور معنی‌داری سطوح مالون‌دی‌آلدئید را در سلول‌های سرتولی در معرض BPA کاهش داد. همچنین، روتین فعالیت سوپراکسید دیسموتاز و کاتالاز و پتانسیل غشای میتوکندری را در گروه‌های در معرض BPA به‌طور معنی‌داری افزایش داد. روتین سطوح گلوتاتیون و گلوتاتیون پراکسیداز را نیز افزایش داد که نشان ‌دهنده تقویت دفاع آنتی‌اکسیدانی سلولی در برابر آسیب ناشی از BPA است. تغییرات بیان <a href="https://en.wikipedia.org/wiki/PINK1">PINK1</a>، <a href="https://www.genecards.org/card/BNIP3">BNIP3</a> و Parkin نشان داد که روتین ممکن است پاسخ‌های مرتبط با میتوفاژی را تحت استرس ناشی از BPA تعدیل کند. استنتاج: روتین ممکن است آسیب اکسیداتیو و میتوکندریایی ناشی از BPA را در سلول‌های سرتولی  TM4کاهش داده و دفاع آنتی‌اکسیدانی سلولی را تقویت کند. تغییرات بیان ژن‌های مرتبط با میتوفاژی، احتمال نقش مسیرهای مرتبط با میتوفاژی را در اثرات محافظتی روتین مطرح می‌کند. با این‌ حال، برای تأیید این مکانیسم، اعتبارسنجی در سطح پروتئین و ارزیابی عملکردی شار میتوفاژی ضروری است.   Background and purpose: Bisphenol A (BPA) is an endocrine-disrupting chemical associated with oxidative stress and mitochondrial dysfunction in reproductive cells. Rutin, a naturally occurring flavonoid with antioxidant properties, may protect cells against oxidative damage. This study aimed to investigate the protective effects of rutin against BPA-induced oxidative stress and mitochondrial dysfunction and to evaluate changes in the expression of mitophagy-related genes in TM4 Sertoli cells. Materials and methods: In this experimental study, TM4 Sertoli cells were exposed to BPA alone or in combination with different concentrations of rutin. Cell viability was assessed using the MTT assay, and protein content was determined by the Bradford method. Mitochondrial membrane potential and reactive oxygen species (ROS) levels were measured using a spectrofluorimeter. The expression of PINK1, BNIP3, and Parkin genes was evaluated by real-time PCR. Malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH), and the activities of catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), and glutathione peroxidase (GPx) were measured using spectrophotometric methods. Results: Rutin significantly reduced MDA levels in BPA-exposed Sertoli cells. Moreover, rutin significantly increased SOD and CAT activities and improved mitochondrial membrane potential in BPA-exposed cells. Rutin also increased GSH and GPx levels, indicating an enhancement of cellular antioxidant defences against BPA-induced damage. Changes in PINK1, BNIP3, and Parkin expression suggested that rutin may modulate mitophagy-related pathways under BPA-induced stress. Conclusion: Rutin may attenuate BPA-induced oxidative and mitochondrial damage in TM4 Sertoli cells and enhance antioxidant defences. The observed changes in mitophagy-related gene expression suggest a potential role for mitophagy-related pathways in rutin-mediated protection. However, protein-level validation and functional assessment of mitophagic flux are needed to confirm this proposed mechanism. روتین, BPA, میتوکندری, سرتولی, TM4 rutin, BPA, mitochondria, Sertoli cells, TM4 cells 68 81 http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-19405-1&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Rezaei-Tazangi فاطمه رضائی تزنگی f.rezaei67@yahoo.com 1003194753284600189635 1003194753284600189635 Yes Assistant Professor, Department of Anatomy, School of Medicine, Fasa University of Medical Sciences, Fasa, Iran استادیار علوم تشریح، گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی فسا، فسا، ایران Fereshtesadat Fakhredini فرشته سادات فخردینی ffakhredini_aot@yahoo.com 1003194753284600189636 1003194753284600189636 No Cellular and Molecular Research Center, Medical Basic Sciences Research Institute, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز، ایران Mohammad Ebrahim Astaneh محمد ابراهیم آستانه meastaneh@yahoo.com 1003194753284600189637 1003194753284600189637 No Assistant Professor, Department of Anatomy, School of Medicine, Fasa University of Medical Sciences, Fasa, Iran استادیار علوم تشریح، گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی فسا، فسا، ایران Fereshteh Aliakbari فرشته علی اکبری fereshtehaliakbari60@gmail.com 1003194753284600189638 1003194753284600189638 No Assistant Professor, Department of Urology, Urology Research Center, Guilan University of Medical Sciences, Guilan, Iran استادیار بیولوژی تولید مثل، مرکز تحقیقات ارولوژی، بیمارستان رازی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران Zahra Khoob زهرا خوب Zahra78.khoob@gmail.com 1003194753284600189639 1003194753284600189639 No Medical student, Student Research Committee, Fasa University of Medical Sciences, Fasa, Iran دانشجوی پزشکی، کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی فسا، فسا، ایران Mohadeseh Motamed-Jahromi محدثه معتمد جهرمی mohadesehmotamed@gmail.com 1003194753284600189640 1003194753284600189640 No Assistant Professor, Department of Public Health, School of Health, Fasa University of Medical Sciences, Fasa, Iran استادیار آموزش بهداشت و ارتقاء سلامت، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی فسا، فسا، ایران 