Journal of Mazandaran University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران
J Mazandaran Univ Med Sci
Medical Sciences
http://jmums.mazums.ac.ir
1
admin
1735-9260
1735-9279
fa
jalali
1395
5
1
gregorian
2016
8
1
26
139
online
1
fulltext
fa
جهش های ژن gyrA در جدایه های سودوموناس آئروزینوزا مقاوم به فلوروکوئینولون ها در استان گیلان
Mutations of GyrA Gene in Fluoroquinolone Resistant Isolates of Pseudomonas aeruginosa in Guilan Province
نوزادان
infants
پژوهشي-کامل
Research(Original)
<p dir="RTL">سابقه و هدف: سودوموناس آئروژینوزا یک پاتوژن مهم فرصت طلب در افراد مبتلا به بیماری تنفسی مزمن یا افراد با نقص ایمنی است. این باکتری مقاومت ذاتی و اکتسابی به انواع آنتیبیوتیکها را نشان میدهد. یک مکانیسم مهم مقاومت به فلوروکوئینولونها در سودوموناس آئروژینوزا جهش در <em><span dir="LTR">gyrA</span></em><em>،</em> یک زیرواحد توپوایزومراز نوع <span dir="LTR">II</span> می باشد. هدف از این مطالعه بررسی جهشهای ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> در جدایه های مقاوم به دارو در استان گیلان بود.</p>
<p dir="RTL">مواد و روشها: در این مطالعه مقطعی، 44 جدایه سودوموناس آئروژینوزا جدا شده از نمونههای مختلف از جمله سوختگی، ادرار و ترشحات تنفسی به کمک روشهای بیوشیمیایی تعیین هویت شدند. حساسیت و مقاومت به آنتی بیوتیک به روش کربی بور تعیین گردید. از آزمون <span dir="LTR">χ<sup>2</sup></span> بهره برده شد و برای معنیدار بودن نتایج 05/0<span dir="LTR"><</span> <span dir="LTR">P</span> لحاظ شد. برای بررسی جهش های ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> در جدایه های مقاوم به سیپروفلوکساسین، <span dir="LTR">PCR</span>- سکونسینگ انجام شد. نرم افزار <span dir="LTR">CLCmain workbench v3.5</span> و نرم افزار بلاست (<span dir="LTR">BLAST</span>) برای مقایسه توالی ژن <span dir="LTR">gyrA</span> در جدایههای مقاوم با ژن رفرنس در <span dir="LTR">PAO1</span> مورد استفاده قرار گرفتند.</p>
<p dir="RTL">یافتهها: بالاترین میزان مقاومت به سیپروفلوکساسین در جدایهها <span dir="LTR">MIC>512</span><span dir="LTR"> µg/ml</span> بود. دو جهش <span dir="LTR">T83I</span> و <span dir="LTR">D87Y</span> در ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> در جدایههای مقاوم شناسایی شد. همچنین این مطالعه نشان داد که بین میزان <span dir="LTR">MIC</span> در جدایههای مقاوم به سیپروفلوکساسین و جهش در ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> ارتباطی وجود ندارد.</p>
<p dir="RTL">استنتاج: این نتایج نشان میدهد که جهش در ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> یکی از مهمترین مکانیسمهای مقاومت به سیپروفلوکساسین در جدایههای کلینیکی سودوموناس آئروژینوزا در گیلان بوده و به نظر میرسد جهش در <em><span dir="LTR"> gyrA</span></em>به همراه چند ژن درگیر در ایجاد مقاومت، باعث افزایش مقاومت در جدایههای مختلف شده باشد.</p>
<p><strong>Background and purpose:</strong><em> Pseudomonas aeruginosa</em> is an opportunistic pathogen in patients with chronic respiratory disease or in immunocompromised hosts. This bacterium shows intrinsic and acquired resistance to diverse antimicrobial agents. An important mechanism of resistance to fluoroquinolones in <em>P. aeruginosa</em> is the mutation in <em>gyrA</em>, a subunit of topoisomerases II. The aim of this study was to investigate the <em>gyrA</em> mutations in ciprofloxacin resistant isolates in Guilan province.</p>
<p><strong>Materials and methods:</strong> In this cross-sectional study, 44 <em>P. aeruginosa</em> strains were isolated from different clinical samples such as burn, urine and respiratory secretions identified by biochemical tests. The antibiotic resistance and susceptibility of strains was determined by Kirby Bauer method. Chi-square test was carried out and<em> P</em> value of < 0.05 was considered statistically significant. PCR-sequencing was carried out to assess the <em>gyrA</em> mutations in drug resistant isolates. CLC main workbench v3.5 and BLAST softwares was used to compare <em>gyrA</em> sequence in resistant isolates with reference gene in PAO1.</p>
<p><strong>Results:</strong> The highest MIC of ciprofloxacin in some strains was >512 μg/ml. T83I and D87Y mutations were determined in <em>gyrA</em> gene in resistance isolates. Also, this study showed no relationship between MIC of ciprofloxacin in resistant isolates and mutation in <em>gyrA.</em></p>
<p><strong>Conclusion:</strong> These results demonstrated that <em>gyrA</em> mutations are one of the most important mechanisms of resistance to ciprofloxacin in clinical strains of <em>P. aeruginosa</em> in Guilan. It is believed that mutations in <em>gyrA </em>alongside several genes that are involved in development of resistance have increased the resistance in different strains.</p>
سودوموناس آئروژینوزا, کوئینولون, gyrA, جهش
Pseudomonas aeroginosa, Quinolone, gyrA, Mutation
84
92
http://jmums.mazums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-29-428&slc_lang=fa&sid=1
Forough
Rahnamay Roodposhti
فروغ
رهنمای رودپشتی
100319475328460085452
100319475328460085452
No
MSc in Microbiology, Faculty of Sciences,Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran
کارشناس ارشد میکروبیولوژی، دانشکده علوم، واحد رشت، دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران
Najmeh
Ranji
نجمه
رنجی
n_ranji@iaurasht.ac.ir
100319475328460085453
100319475328460085453
Yes
Assistant Professor, Department of Genetics, Faculty of Sciences, Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran
استادیار، گروه ژنتیک، دانشکده علوم، واحد رشت،دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران
Leila
Asadpour
لیلا
اسدپور
100319475328460085454
100319475328460085454
No
Assistant Professor, Department of Microbiology, Faculty of Sciences, Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran
استادیار، گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم، واحد رشت، دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران