---

سابقه و هدف: پروتئین ۵۰ کیلو دالتونی واقع در انتهای کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A (BoNT/A-Hc) امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می‌رود. هدف از این پژوهش بررسی تولید این پروتئین نوترکیب در باکتری اشرشیا کلی در کشت‌های با تراکم سلولی بالا (ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده) و مقایسه تولید آن با کشت‌های ناپیوسته بود. مواد و روش‌ها: در این مطالعه، رشد باکتری اشرشیا کلی حاوی پلاسمید نوترکیب در محیط M۹ اصلاح‌شده با فرایند کشت ناپیوسته بررسی گردید. به منظور افزایش بیان پروتئین نوترکیب، میزان غلظت القاکننده Isopropyl β-D-thiogalactoside و زمان القا در Fermentor با حجم کاری ۲ لیتر، به کمک روش آماری Taguchi بهینه گردید. سپس کشت ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده با روش خوراک‌دهی‌نمایی با حجم ثابت تا رسیدن به تراکم سلولی بالا انجام گرفت. در پایان میزان بیان پروتئین نوترکیب هدف به کمک روش Bradford و دانسیتومتری ژل SDS-PAGE محاسبه شد. یافته‌ها: در شرایط بهینه‌شده کشت ناپیوسته و ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده، به ترتیب مقدار ۶۲ و ۴۸۶ میلی‌گرم پروتئین نوترکیب BoNT/A-Hc به ازای یک لیتر از محیط کشت حاصل گردید. استنتاج: بر اساس یافته‌های این تحقیق می‌توان نتیجه‌گیری کرد که رسیدن به تراکم سلولی بالا در کشت‌های ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده در افزایش بازدهی تولید پروتئین‌های نوترکیب بسیار مؤثر است.

---

نقش مهمی در ایجاد مقاومت سویه های CTX-M سابقه و هدف : حضور ژن های بتالاکتاماز وسیع الطیف به ویژه نوع Escherichia coli مولد این آنزیم ها به آنتی بیوتیک های بتا لاکتام ایفا می کنند. مقاومت باکتری های گرم منفی از جمله نسبت به آنتی بیوتیک های مختلف، به خصوص بتالاکتام ها به طور روزافزون گزارش شده است . این مطالعه با هدف صورت پذیرفت. E. coli ارزیابی بتالاکتامازهای وسیع الطیف در باکتری مواد و روش ه ا: در این مطالعه مقطعی - تحلیلی که از فروردین تا بهمن سال ۹۲ در بیمارستان های عمومی شهر جداسازی و جهت بررسی بتالاکتامازهای وسیع الطیف از روش E. coli ارومیه صورت گرفت، ۱۳۱ نمونه مورد PCR با روش CTX-M- با روش جوشیدن استخراج شد و از نظر وجود ژن ۱۵ DNA . استفاده شد Combined Disk بررسی قرار گرفت. ۱۱ درصد)، ۷ مورد از / ۸۲ درصد)، ۱۵ مورد از سپتی سمی ( ۴۵ / از عفونت ادراری ( ۴۴ E.coli یافته ها : ۱۰۸ باکتری ۵ درصد ) و ۱ مورد هم از بیمار مبتلا به مننژیت ( ۷۶ / درصد) جداسازی شد . از ۱۳۱ مورد جداسازی / عفونت زخمی ( ۳۴ ۲۳ درصد از سوی های مقاوم دارای / ۴۱ درصد) دارای مقاومت داروی چندگانه بودند . ۶۳ / شده، ۵۵ مورد ( ۹۸ بودند. CTX-M- بتالاکتامازهای وسیع الطیف از نوع ۱۵ استنتاج: با توجه به شیوع رو به افزایش سویه های تولیدکننده بتالاکتامازهای وسیع الطیف، استفاده از پروتکل درمانی مناسب براساس تعیین الگوی آنتی بیوگرام سویه ها، قویاً توصیه می شود.

---

---

چکیده سابقه و هدف: اشرشیا کلی به عنوان پاتوژن فرصت طلب شایع در عفونت‌های بیمارستانی محسوب می‌شود. مصرف روزافزون آنتی بیوتیک‌های بتالاکتام سبب ایجاد مقاومت آنتی‌بیوتیکی در این باکتری شده است که این مقاومت معمولاً در اثر تولید آنزیم های بتالاکتامازی است. تولید آنزیم بتالاکتاماز در باکتری‌ها به ویژه در اشرشیا کلی مشکلات فراوانی را برای درمان بیماران ایجاد نموده است. این مطالعه به منظور تعیین الگوی مقاومت آنتی‌بیوتیکی و شیوع ژن CTX در اشرشیا کلی جدا شده از بیمارستان‌های آموزشی دانشگاه علوم پزشکی مازندران، شهرستان ساری انجام گرفت. مواد و روش‌ها:. در این مطالعه توصیفی مقطعی ابتدا ۲۰۰ نمونه ادراری از بخش‌های عفونی و نفرولوژی بیمارستان‌های رازی قائم شهر و امام خمینی (ره) ساری گردآوری شده، پس از کشت بر روی محیط EMB آگار در دمای oC۳۷ به مدت ۲۴ ساعت و انجام تست‌های بیوشیمیایی برای تایید، از بین ۲۰۰ نمونه ۱۲۰ ایزوله اشرشیا کلی جدا سازی شد. برای شناسایی مولد بتالاکتاماز از روش دیسک ترکیبی استفاده شد. سپس حساسیت نسبت به آنتی‌بیوتیک‌ها با روش کربی بائر تعیین شد. بررسی حضور ژن بتالاکتامازی CTX با استفاده از روش PCR انجام گرفت. یافته‌ها: از ۱۲۰ سویه مورد بررسی ۶۶ (۵۵ درصد) سویه مولد بتالاکتامازهای وسیع‌الطیف بوده، پس از طی پروسه PCR برای شناسایی ژن CTX مشخص گردید از ۶۶ سویه بتالاکتاماز وسیع الطیف مثبت،۴۰ ایزوله (۶۰ درصد) حاوی ژن مورد نظر بوده است. استنتاج: نتایج حاصل از این مطالعه نشان می‌دهد که ژن CTX شیوع بالایی در بین ایزوله‌های اشرشیا کلی مولد بتالاکتامازهای وسیع الطیف (ESBL) دارد، که وجود این آنزیم در باکتری با مقاومت آنتی‌بیوتیکی رابطه مستقیمی دارد. امروزه این مسئله یکی از مشکلات بهداشتی جدی در سطح دنیاست که اقدامات لازم به جهت جلوگیری از این مشکل الزامی است.

---

سابقه و هدف: مقاومت کینولونی وابسته به پلاسمید در توسعه مقاومت به کینولون‌ها در باکتری‌ها نقش مهمی دارد. هدف از این مطالعه تعیین فراوانی ژن‌های PMQR در جدایه‌های اشرشیا کلی مولد بتالاکتامازهای طیف گسترده (ESBL) بود.
مواد و روش‌ها: این مطالعه بر روی ۲۴۰ نمونه اشرشیا کلی جدا شده از نمونه ادرار بیماران در کرمانشاه انجام شد. تست تعیین حساسیت نسبت به آنتی‌بیوتیک‌های منتخب به روش دیسک دیفیوژن و میکرودایلوشن براث انجام گرفت. جدایه‌های تولید کننده ESBL با استفاده از آزمون دیسک ترکیبی شناسایی شدند. ژن‌های qnrA، qnrB، qnrS، aac (۶')-Ib و qepA با PCR تشخیص داده شد. تمام محصولات PCR برای ژن aac(۶´)-Ib  جهت تشخیص واریانت  aac(۶´)-Ib-cr با آنزیم BtsCI هضم شدند. داده‌ها توسط روش‌های آماری تحلیل شدند.
یافته‌ها: از ۶۶ جدایه مولد ESBL، ۴۵ (۱/۶۸ درصد) جدایه به سیپروفلوکساسین و لووفلوکساسین و ۵۶ (۸/۸۴ درصد) جدایه به نالیدیکسیک اسید مقاوم بودند. ژن‌های qnrA، qnrB، qnrS و qepA  به ترتیب در۷/۲۸ درصد، ۹/۴۰ درصد ، ۵/۴ درصد و ۳ درصد از جدایه‌ها یافت شدند. ژن aac (۶´)-Ib در ۱/۶۵ درصد از جدایه­ها  یافت شد که از این‌ها ۴/۸۸ درصد از نوع واریانت  aac(۶´)-Ib-cr بودند.
استنتاج: نتایج بیانگر شیوع بالای ژن‌های PMQR در جدایه‌های E.coli مولد ESBL در کرمانشاه است. بین مقاومت به بتالاکتام‌ها و کینولون‌ها همبستگی مشاهده شد که می‌تواند بیانگر انتقال مشترک ژن‌‌های کینولونی به وسیله پلاسمیدهای حامل ESBL باشد. در نتیجه شناسایی سویه های E.coli مولد ESBL می‌تواند نشانگر مقاومت بالا به کینولون ها باشد. بنابراین پیش از استفاده کینولون‌ها آزمایش غربالگری ESBL پیشنهاد می‌شود تا از افزایش مقاومت به این دسته دارویی جلوگیری شود.
 

---

سابقه و هدف: افزایش تعداد مقاومت به کوئینولون‌ها در باکتری‌های اشرشیا کلی و کلبسیلا پنومونیه‌های جدا شده از ساری، مشکلات فراوانی را در درمـان ایجـاد نموده است. موتاسیون در ژن gyrA منجر به تغییر اسیدهای آمینه و مقاومت به فلئوروکینولون‌ها در باکتری‌های اشرشیاکلی و کلبسیلا پنومونیه می‌باشد. هدف ما از این مطالعه، تشخیص جهش‌های قابل توجه از ایزوله‌های جدا شده به روش SSCP PCR می باشد.
مواد و روش‌ها: ایزوله‌های جدا شده جمع‌آوری و تست حساسیت آنتی‌بیوتیکی )سیپروفلوکساسین، نالیدیکسیک اسید) معمول به روش دیسک دیفیوژن آگار انجام شد. مقاومت فلوروکینولون با استفاده از آزمون MIC به روش E-test تایید شد. از روش SSCP PCR برای تشخیص جهش در ژن ser۸۳-asp۸۷) gyrA( استفاده شد. نتایج به دست آمده از روش SSCP PCR برای تایید به‌طور راندوم، تعیین توالی گردید.
یافته‌ها: از ۱۰۳ ایزوله جدا شده، ۶۵ نمونه (۲/۶۳ درصد) اشرشیاکلی و ۳۸ نمونه (۸/۳۶ درصد) کلبسیلا پنومونیه بودند. ایزوله‌های جدا شده با روش SSCP PCR بررسی شدند. در همه‌ی نمونه‌های اشرشیاکلی مقاوم به سیپروفلوکساسین، حداقل یک موتاسیون مشاهده گردید. هم‌چنین در همه نمونه‌های کلبسیلای مقاوم به سیپروفلوکساسین، حداقل یک موتاسیون و در ۱۴ نمونه در هر ۲ نقطه موتاسیون مشاهده گردید، در حالی که در ۵ نمونه حساس به سیپروفلوکساسین هیچ موتاسیونی دیده نشد.
استنتاج: نتایج نشان داد که جهش در gyrA ارتباط نزدیکی با مقاومت کینولون‌ها دارد. افزایش شیوع مقاومت کینولون ها در میان باکتری E.coli و K.penumune جدا شده، نشان دهنده نیاز به برنامه‌های کنترل عفونت می باشد.