مریم ابراهیمینیا، فریبا اسماعیلی، نواز خرازیان، فریبا هوشمند، مرضیه ابراهیمی،
دوره ۲۳، شماره ۱۱۰ - ( ۱۲-۱۳۹۲ )
چکیده
سابقه و هدف: با توجه به نقش مؤثر فلاونوئیدهای گیاهی در پیشگیری و درمان دیابت قندی، در این پژوهش القای تمایز سلولهای بنیادی ۱۹P به سلولهای انسولینساز تحت تأثیر فلاونوئید تام عصاره متانولی برگ کاسنی مورد بررسی قرار گرفت.
مواد و روشها: ابتدا عصاره متانولی از فلاونوئیدهای برگ گیاه کاسنی تهیه و سپس تعیین غلظت شد. اجسام شبه جنینی (Embryoid bodies یا EB) حاصل از کشت معلق سلولهای ۱۹P در محیط کشت α-MEM حاوی ۱۵ درصد سرم جنین گاو به مدت سه روز کشت داده شدند. به منظور القای تمایز این سلولها، به مدت ۱۲ روز با غلظتهای ۵۰، ۱۰۰ و ۲۰۰ میکروگرم بر میلیلیتر فلاونوئید تام عصاره متانولی برگ کاسنی تیمار شدند. سلولهای ۱۹P و اجسام شبه جنینی تیمار نشده به عنوان شاهد در نظر گرفته شد. از تکنیکهای رنگآمیزی دیتیزون (Dithizone یا DTZ)، ایمنوفلورسنس و RT-PCR (Real-time polymerase chain reaction) جهت شناسایی سلولهای تمایز یافته استفاده شد.
یافتهها: سلولهای ۱۹P تمایز یافته با غلظتهای مختلف عصاره نسبت به رنگآمیزی دیتیزون پاسخ مثبت دادند. بیشترین درصد سلولهای دیتیزون مثبت در غلظت ۱۰۰ میکروگرم بر میلیلیتر عصاره حاصل شد. روش ایمنوفلورسنس نشان داد که سلولهای ۱۹P تمایز یافته قادر به بیان نشانگرهای اختصاصی سلولهای بتای پانکراس هستند. بیان ژن Pdx-۱ (Pancreatic duodenal homeobox-۱) در این سلولها توسط تکنیک RT-PCR به اثبات رسید.
استنتاج: فلاونوئید تام عصاره متانولی برگ کاسنی قادر به القای تمایز سلولهای بنیادی ۱۹P به سلولهای انسولینساز است.