دوره 32، شماره 217 - ( بهمن 1401 )
جلد 32 شماره 217 صفحات 31-16 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Tirbakhsh Gouran S, Doosti A, Jami M. Expression of Brucella abortus Omp25 Protein in Lactococcus lactis Probiotic Bacteria. J Mazandaran Univ Med Sci 2023; 32 (217) :16-31
URL: http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-18746-fa.html
URL: http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-18746-fa.html
تیربخش گوران سمیه، دوستی عباس، جامی محمدسعید. بیان پروتئین Omp25 بروسلا آبورتوس در باکتری پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس. مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران. 1401; 32 (217) :16-31
چکیده: (1019 مشاهده)
سابقه و هدف: در تمام گونه‌‌های باکتری بروسلا، توالی ژن Omp25 حفاظت شده است. خاصیت آنتی ژنیسیته بالای محصول این ژن باعث تحریک سیستم ایمنی میزبان میشود. استفاده از باکتری پروبیوتیک مهندسی شده، روش مناسبی برای انتقال واکسن است. این مطالعه با هدف بیان Omp25 باکتری بیماری‌زای بروسلا آبورتوس در باکتری پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس، انجام پذیرفت.
مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، وکتور مورد نظر به همراه ژن و سیگنال پپتید (pNZ8148-Usp45-Omp25) طراحی و سنتز گردید. باکتری E. coli سویه TOP10F با وکتور بیانی pNZ8148-Usp45-Omp25 مبتنی بر القا توسط نیسین ترانسفورم شد. با استفاده از کیت استخراج پلاسمید، از باکتری‌‌های ترانسفورم شده پلاسمید نوترکیب استخراج گردید. ترانسفورماسیون باکتری پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس با وکتور pNZ8148-Usp45-Omp25، توسط روش الکتروپوریشن انجام گرفت. بررسی بیان ژن Omp25 در سطح RNA، به روش رونوشت‌برداری معکوس و تایید حضور پروتئین نوترکیب Omp25 در باکتری مهندسی شده با روش SDS-PAGE، ارزیابی شد.
یافته‌ها: بیان موفقیت‌آمیز پروتئین Omp25بروسلا آبورتوس در باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس با RT-PCR تأیید شد. با استفاده از روش سدیم دودسیل سولفات- پلی‌آکریل آمید ژل الکتروفورز (SDS-PAGE)، پروتئین‌‌ها براساس وزن مولکولی از یکدیگر تفکیک شدند .آنالیز بیان پروتئین‌‌ها، بیانOmp25 را به صورت یک باند پروتئینی 25 کیلو دالتونی اضافه در باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده با pNZ8148-Usp45-Omp25 در مقایسه با لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده با pNZ8148 (وکتور فاقد ژن هدف) نشان داد.
استنتاج: مطالعه حاضر نشان داد که پروتئین Omp25 در باکتری پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده توسط الکتروپوریشن با وکتور نوترکیب pNZ8148-Usp45-Omp25 بیان میشود. باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده، می‌‌تواند در مطالعات آینده به‌عنوان واکسن زیر واحدی خوراکی جهت پیشگیری از بروسلوز، مناسب باشد.
مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی، وکتور مورد نظر به همراه ژن و سیگنال پپتید (pNZ8148-Usp45-Omp25) طراحی و سنتز گردید. باکتری E. coli سویه TOP10F با وکتور بیانی pNZ8148-Usp45-Omp25 مبتنی بر القا توسط نیسین ترانسفورم شد. با استفاده از کیت استخراج پلاسمید، از باکتری‌‌های ترانسفورم شده پلاسمید نوترکیب استخراج گردید. ترانسفورماسیون باکتری پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس با وکتور pNZ8148-Usp45-Omp25، توسط روش الکتروپوریشن انجام گرفت. بررسی بیان ژن Omp25 در سطح RNA، به روش رونوشت‌برداری معکوس و تایید حضور پروتئین نوترکیب Omp25 در باکتری مهندسی شده با روش SDS-PAGE، ارزیابی شد.
یافته‌ها: بیان موفقیت‌آمیز پروتئین Omp25بروسلا آبورتوس در باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس با RT-PCR تأیید شد. با استفاده از روش سدیم دودسیل سولفات- پلی‌آکریل آمید ژل الکتروفورز (SDS-PAGE)، پروتئین‌‌ها براساس وزن مولکولی از یکدیگر تفکیک شدند .آنالیز بیان پروتئین‌‌ها، بیانOmp25 را به صورت یک باند پروتئینی 25 کیلو دالتونی اضافه در باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده با pNZ8148-Usp45-Omp25 در مقایسه با لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده با pNZ8148 (وکتور فاقد ژن هدف) نشان داد.
استنتاج: مطالعه حاضر نشان داد که پروتئین Omp25 در باکتری پروبیوتیک لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده توسط الکتروپوریشن با وکتور نوترکیب pNZ8148-Usp45-Omp25 بیان میشود. باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس ترانسفورم شده، می‌‌تواند در مطالعات آینده به‌عنوان واکسن زیر واحدی خوراکی جهت پیشگیری از بروسلوز، مناسب باشد.
نوع مطالعه: پژوهشي-کامل |
موضوع مقاله:
بیوتکنولوژی
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
Articles Copyright © The Author(s). Owned by Mazandaran University of Medical Sciences.
تماس با ما
ساری- میدان معلم- ساختمان شماره2 دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی مازندران- طبقه سوم- معاونت تحقیقات و فناوری- دفترمجله
تلفن: 01134484874
پست الکترونیکی : jmums
mazums.ac.ir
