طراحی و ساخت حامل لنتی ویروسی بیان کننده miRNA-499a و انتقال آن‌ به سلول ‌های بنیادی مزانشیمی انسان

نشاطی, وجیهه; ملازاده, سمانه; فضلی بزاز, بی بی صدیقه; مجرد, مجید; نشاطی, زینب; کراچیان, محمد امین

دوره 28، شماره 166 - ( آبان 1397 ) جلد 28 شماره 166 صفحات 29-21 | برگشت به فهرست نسخه ها

Mendeley

Zotero

RefWorks

Neshati V, Mollazadeh S, Fazly Bazzaz B S, Mojarrad M, Neshati Z, Kerachian M A. Designing and Constructing the Lentiviral Vector Coding miRNA-499a and Transduction of Human Mesenchymal Stem Cells. J Mazandaran Univ Med Sci 2018; 28 (166) :21-29
URL: http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-11141-fa.html

نشاطی وجیهه، ملازاده سمانه، فضلی بزاز بی بی صدیقه، مجرد مجید، نشاطی زینب، کراچیان محمد امین. طراحی و ساخت حامل لنتی ویروسی بیان کننده miRNA-499a و انتقال آن‌ به سلول ‌های بنیادی مزانشیمی انسان. مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران. 1397; 28 (166) :21-29

URL: http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-11141-fa.html

طراحی و ساخت حامل لنتی ویروسی بیان کننده miRNA-499a و انتقال آن‌ به سلول ‌های بنیادی مزانشیمی انسان

وجیهه نشاطی

، سمانه ملازاده

، بی بی صدیقه فضلی بزاز

، مجید مجرد

، زینب نشاطی

، محمد امین کراچیان

چکیده: (3290 مشاهده)

سابقه و هدف: وکتورهای لنتی‌‌ویروسی حامل‌های مناسبی برای انتقال ژن به سلول‌ها بوده و می‌توانند سبب بیان بالا و مداوم ژن‌‌ها در سلول‌های میزبان شوند. ریز RNA ها (miRNAs )، گروهی از RNA های غیر کد‌کننده کوچک هستند که بیان ژن را پس از رونویسی از طریق مهار ترجمه یا القاء تجزیه mRNA کنترل می‌کنند و از این طریق فرآیند‌‌های زیستی متعددی از جمله تمایز سلولی را تنظیم می‌‌نمایند. مطالعاتی نشان داده‌اند که miRNA-499a در تمایز سلول‌های بنیادی به سلول‌های قلبی نقش دارد. با توجه به مطالب ذکر شده، در این مطالعه ساخت وکتور لنتی‌‌ویروسی ناقل miRNA-499a جهت استفاده در تمایز سلول‌‌های قلبی مورد بررسی قرار گرفت.
مواد و روش‌ها: رشته‌‌های p3 و p5 مربوط به miRNA-499a طراحی و ساخته شده و در پلاسمید ویژه‌‌ای کلون شدند. برای اطمینان از ورود صحیح این رشته‌های نوکلئوتیدی، هضم آنزیمی و توالی‌‌یابی انجام گردید. سپس ذرات لنتی‌ویروسی حامل رشته‌‌های miRNA-499a-3p و p5miRNA-499a- ساخته شدند و برای ترانس‌‌داکشن سلول‌های مزانشیمی مغز استخوان انسان مورد استفاده قرار گرفتند.
یافته‌ها: نتایج حاصل از هضم آنزیمی و توالی‌‌یابی، کلون شدن صحیح رشته‌‌های p3 و p5 مربوط به miRNA-499a به داخل پلاسمید را نشان دادند. بیان بالای eGFP نشان دهنده کارایی بالای ترانس‌‌فکشن و ترانس‌داکشن بود. ویروس‌‌های حامل رشته‌‌های miRNA-499a-3p/5p ساخته شده، توانستند سبب ترانس‌داکشن سلول‌‌های بنیادی مزانشیمی گردند.
استنتاج: در این مطالعه حامل‌‌های لنتی‌ویروسی ناقل miRNA-499a-3p/5p تولید شدند، که با توجه به میزان مناسب ترانس‌‌داکشن سلول‌‌های بنیادی مزانشیمی، می‌توانند در تمایز این سلول‌‌ها به سلول‌‌های قلبی مورد استفاده قرار گیرند.

واژه‌های کلیدی: لنتی‌ ویروس، ریز RNA، تمایز

متن کامل [PDF 650 kb] (1267 دریافت)

نوع مطالعه: پژوهشي-کامل | موضوع مقاله: بيولوژي

ارسال پیام به نویسنده مسئول

بازنشر اطلاعات
	این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.

کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

Designed & Developed by : Yektaweb