دوره 34، شماره 234 - ( تیر 1403 )
جلد 34 شماره 234 صفحات 60-48 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Azari A, Eslami M, Mohammadpour A, Shokrzadeh M. Evaluation of the Protective Effect of Quercetin on Normal Ovary Cells Viability Induce by Clomiphene Citrate and Correlation with p53 Gene Expression. J Mazandaran Univ Med Sci 2024; 34 (234) :48-60
URL: http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-20836-fa.html
URL: http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-20836-fa.html
آذری امیرحسین، اسلامی مریم، محمدپور عباس، شکرزاده محمد. بررسی نقش محافظتی کوئرستین بر حیات سلولهای نرمال تخمدان مواجه شده با داروی کلومیفن سیترات و ارتباط با بیان ژن p53. مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران. 1403; 34 (234) :48-60
چکیده: (1384 مشاهده)
سابقه و هدف: ناباروری، یکی از مشکلات عدیده پزشکی در دنیای امروز است. داروی کلومیفن سیترات برای درمان ناباروری استفاده می‌شود. از عوارض این دارو ایجاد بافت توموری در تخمدان می‌باشد. کوئرستین یک فلاونوئید است که به طور فراوان در طبیعت یافت می‌شود. کوئرستین در بسیاری از میوه‌ها، سبزیجات، برگ‌ها، دانه‌ها و غلات یافت می‌شود. کوئرستین، پتانسیل استفاده در درمان سرطان را دارد. شناخته‌شده‌ترین و شایع‌ترین ژن سرکوبگر تومور در انسان، ژن p53 است. ژن p53 در سال 1979 کشف شد و در سال 1989 به عنوان یک ژن مهارکننده تومور شناخته شد. این ژن در سال 1992 به دلیل نقشی که در حفظ ثبات ژنوم داشت به عنوان نگهبان ژنوم شناخته شد. ژن p53 متداول‌ترین ژن جهش یافته در سرطان‌های انسان است. این مطالعه با هدف بررسی نقش محافظتی کوئرستین بر حیات سلولهای نرمال تخمدان مواجه شده با داروی کلومیفن سیترات و ارتباط با بیان ژن p53، انجام پذیرفت.
مواد و روش‌ها: در این مطالعه آزمایشگاهی مداخله‌ای و از نوع کار تحقیقاتی از نوع کاربردی، از سلولهای نرمال تخمدان رده‌ی سلولیCHO استفاده شد. غلظت‌های 1000، 500، 100، 50، 10 میلی‌گرم بر میلی‌لیترکوئرستین و 50 میکرومولار داروی کلومیفن سیترات و 29/0 میکروگرم بر میلی‌لیتر سیس پلاتین تهیه و به‌مدت 24 ساعت به سلولهای کشت داده شده اضافه شد. در این مطالعه داروی کلومیفن سیترات و داروی سیس پلاتین هر دو به‌عنوان کنترل مثبت می‌باشند. ارزیابی حیات سلول‌ها به روش MTT assay انجام شد. ابتدا RNA استخراج و سپس بیان ژن p53 با دستگاه Real-Time PCR مورد بررسی و آنالیز قرار گرفت. در این مطالعه آغازگر مورد استفاده برای ژن p53 با استفاده از سایت‌های NCBI و primer3 طراحی شد. در این مطالعه ژن کنترل داخلی GAPDH می‌باشد.
یافته‌ها: نتایج این مطالعه نشان داد که غلظت‌های 1000، 500، 100، 50 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر کوئرستین با کاهش سمیت داروی کلومیفن سیترات و داروی سیس پلاتین (هر دو به عنوان کنترل مثبت) باعث افزایش حیات سلولی می‌شود به‌طوری‌که هر چه غلظت کوئرستین بیش‌تر شد، تعداد سلولهای زنده بیش‌تر می‌شود و در غلظت 1000 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر کوئرستین تعداد سلولهای زنده به 83 درصد رسید. نتایج حاصل از آزمون Real-time PCR بیانگر آن است که، کوئرستین به‌طور معنی‌داری باعث افزایش بیان ژن p53 در مقایسه با گروه کنترل مثبت (داروی کلومیفن سیترات) و کنترل منفی شد (p<0/05). در غلظت‌های 500 (0/0020=P) و 1000 (p<0/0001) کوئرستین در مقایسه با داروی کلومیفن سیترات، این افزایش بیان چشمگیرتر بود. هم‌چنین در غلظت‌های 500 (p<0/0001) و1000 (p<0/0001) کوئرستین در مقایسه با کنترل منفی، افزایش بیان چشمگیری در ژن p53 مشاهده شد.
استنتاج: یافته‌های حاصل از این بررسی نشان داد که، کوئرستین احتمالا باعث مهار سمیت سلولی حاصل از داروی کلومیفن سیترات و افزایش میزان بیان ژن p53 می‌شود و میزان اثربخشی آن وابسته به دوز می‌باشد. بنابراین مطالعه حاضر تا حدی می‌تواند بیان‌کننده نقش کوئرستین در فرآیند مهار تومورزایی در گسترش سرطان در سلولهای نرمال تخمدان باشد.
مواد و روش‌ها: در این مطالعه آزمایشگاهی مداخله‌ای و از نوع کار تحقیقاتی از نوع کاربردی، از سلولهای نرمال تخمدان رده‌ی سلولیCHO استفاده شد. غلظت‌های 1000، 500، 100، 50، 10 میلی‌گرم بر میلی‌لیترکوئرستین و 50 میکرومولار داروی کلومیفن سیترات و 29/0 میکروگرم بر میلی‌لیتر سیس پلاتین تهیه و به‌مدت 24 ساعت به سلولهای کشت داده شده اضافه شد. در این مطالعه داروی کلومیفن سیترات و داروی سیس پلاتین هر دو به‌عنوان کنترل مثبت می‌باشند. ارزیابی حیات سلول‌ها به روش MTT assay انجام شد. ابتدا RNA استخراج و سپس بیان ژن p53 با دستگاه Real-Time PCR مورد بررسی و آنالیز قرار گرفت. در این مطالعه آغازگر مورد استفاده برای ژن p53 با استفاده از سایت‌های NCBI و primer3 طراحی شد. در این مطالعه ژن کنترل داخلی GAPDH می‌باشد.
یافته‌ها: نتایج این مطالعه نشان داد که غلظت‌های 1000، 500، 100، 50 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر کوئرستین با کاهش سمیت داروی کلومیفن سیترات و داروی سیس پلاتین (هر دو به عنوان کنترل مثبت) باعث افزایش حیات سلولی می‌شود به‌طوری‌که هر چه غلظت کوئرستین بیش‌تر شد، تعداد سلولهای زنده بیش‌تر می‌شود و در غلظت 1000 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر کوئرستین تعداد سلولهای زنده به 83 درصد رسید. نتایج حاصل از آزمون Real-time PCR بیانگر آن است که، کوئرستین به‌طور معنی‌داری باعث افزایش بیان ژن p53 در مقایسه با گروه کنترل مثبت (داروی کلومیفن سیترات) و کنترل منفی شد (p<0/05). در غلظت‌های 500 (0/0020=P) و 1000 (p<0/0001) کوئرستین در مقایسه با داروی کلومیفن سیترات، این افزایش بیان چشمگیرتر بود. هم‌چنین در غلظت‌های 500 (p<0/0001) و1000 (p<0/0001) کوئرستین در مقایسه با کنترل منفی، افزایش بیان چشمگیری در ژن p53 مشاهده شد.
استنتاج: یافته‌های حاصل از این بررسی نشان داد که، کوئرستین احتمالا باعث مهار سمیت سلولی حاصل از داروی کلومیفن سیترات و افزایش میزان بیان ژن p53 می‌شود و میزان اثربخشی آن وابسته به دوز می‌باشد. بنابراین مطالعه حاضر تا حدی می‌تواند بیان‌کننده نقش کوئرستین در فرآیند مهار تومورزایی در گسترش سرطان در سلولهای نرمال تخمدان باشد.
واژه‌های کلیدی: سلول نرمال تخمدان، کلومیفن سیترات، فلاونوئید، کوئرستین، سیس پلاتین، ژن p53، تومورزایی
نوع مطالعه: پژوهشي-کامل |
موضوع مقاله:
سم شناسی
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
Articles Copyright © The Author(s). Owned by Mazandaran University of Medical Sciences.
تماس با ما
ساری- میدان معلم- ساختمان شماره2 دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی مازندران- طبقه سوم- معاونت تحقیقات و فناوری- دفترمجله
تلفن: 01134484874
پست الکترونیکی : jmums
mazums.ac.ir
