استفاده از روش Fast PCR جهت تشخیص گونه های فاسیولا

میزانی, آزاده; گیل, پوریا; سروی, شهاب الدین; دریانی,  احمد; شریف, مهدی; رحیمی, محمد تقی; شکری,  آذر; احمدپور, احسان

دوره 24، شماره 122 - ( اسفند 1393 ) جلد 24 شماره 122 صفحات 80-72 | برگشت به فهرست نسخه ها

Mendeley

Zotero

RefWorks

Mizani A, Gill P, Sarvi S, Daryani A, Sharif M, Rahimi M T, et al . Using Fast PCR Amplification in Identifying Fasciola Species. J Mazandaran Univ Med Sci 2015; 24 (122) :72-80
URL: http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-5450-fa.html

میزانی آزاده، گیل پوریا، سروی شهاب الدین، دریانی احمد، شریف مهدی، رحیمی محمد تقی، و همکاران.. استفاده از روش Fast PCR جهت تشخیص گونه های فاسیولا. مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران. 1393; 24 (122) :72-80

URL: http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-5450-fa.html

استفاده از روش Fast PCR جهت تشخیص گونه های فاسیولا

آزاده میزانی

، پوریا گیل

، مهدی شریف

، آذر شکری

چکیده: (7885 مشاهده)

سابقه و هدف: انگل‌های شایع کبدی فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا از عوامل ایجادکننده فاسیولایازیس بوده، که بیماری جهانی و شایع در انسان و دام می‌باشد. در مطالعه حاضر ما یک روش سریع، آسان و در عین حال دقیق را با استفاده از متد PCR Fast جهت تشخیص افتراقی گونه‌های فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا معرفی نمودیم. مواد و روش‌ها: 30 ایزوله فاسیولا ی بالغ از کبد گاو و گوسفند از کشتارگاه‌های استان مازندران جدا گردید. ناحیه ژنی ITS1 با استفاده از پره میکس های Amp® Fast PCR، در مقایسه با یکی از پره میکس‌های متداول موجود در بازار (AccuPower® Taq PCR PreMix شرکت Bioneer) تکثیر شدند. به علاوه پروفایل PCR-RFLP جهت تشخیص افتراقی گونه‌های فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا با استفاده از آنزیم اندونوکلئازی TasI (Tsp509I) انجام گرفت. یافته‌ها: باندی با وزن تقریبی 463 جفت باز برای تمامی نمونه‌های فاسیولا با استفاده از پره میکس Sapphire Amp® Fast PCR فقط ظرف مدت 34 دقیقه پس از تکثیر به دست آمد در حالی که تکثیر اسیدهای نوکلئیک با استفاده از پره‌میکس متداول پس از حدود 1 ساعت و 46 دقیقه کامل شد. تمامی محصولات با آنزیم محدودالاثر (Tsp509I TasI) مورد هضم قرار گرفت. پس از هضم در فاسیولا هپاتیکا دو باند 151 و 312 جفت باز و در فاسیولا ژیگانتیکا سه باند 93، 151 و 219 جفت باز تولید شد. استنتاج: واکنش Fast PCR با استفاده از پره میکس Sapphire Amp® در کم‌تر از 3/1 زمان استفاده از سایر پره میکس‌های رایج کامل می‌شود. روش جدید Fast PCR با استفاده از پره میکس. Sapphire Amp® Fast PCR یک متد آسان، سریع و در عین حال دقیق بوده که جهت تعیین و تشخیص افتراقی گونه‌های فاسیولادر مطالعات اپیدمیولوژیک در انسان و دام‌های اهلی در مناطق اندمیک فاسیولیازیس کاربرد دارد.

واژه‌های کلیدی: فاسیولا هپاتیکا، فاسیولا ژیگانتیکا، Fast PCR

متن کامل [PDF 510 kb] (3161 دریافت)

نوع مطالعه: پژوهشي-کامل | موضوع مقاله: انگل شناسي

ارسال پیام به نویسنده مسئول

بازنشر اطلاعات
	این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.

کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

Designed & Developed by : Yektaweb