دوره 24، شماره 119 - ( آذر 1393 )                   جلد 24 شماره 119 صفحات 82-72 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print

Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Sabaghzadeh S, Mirzahoseini H, Shahbazzadeh D, Naji T. Designing and Constructing Clone for Extracellular Expression of the Desirudin Anticoagulant Drug in E.coli. J Mazandaran Univ Med Sci 2014; 24 (119) :72-82
URL: http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-4696-fa.html
صباغ زاده سحر، میرزاحسینی حسن، شهباز زاده دلاور، ناجی طاهره. طراحی و ساخت کلون بیان کننده داروی ضد انعقادی دسیرودین (هیرودین) به شکل خارج سلولی در اشرشیا کلی. مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران. 1393; 24 (119) :72-82

URL: http://jmums.mazums.ac.ir/article-1-4696-fa.html

طراحی و ساخت کلون بیان کننده داروی ضد انعقادی دسیرودین (هیرودین) به شکل خارج سلولی در اشرشیا کلی
سحر صباغ زاده ، حسن میرزاحسینی ، دلاور شهباز زاده ، طاهره ناجی
چکیده:   (8907 مشاهده)
سابقه و هدف: هیرودین پلی پپتیدی با 65 تا 66 اسید آمینه است که به عنوان داروی ضدانعقادی، از غدد بزاقی زالو ترشح می‌شود. این دارو، مهارکننده بسیار قوی ترومبین می‌باشد بنابراین می‌تواند رقیبی برای هپارین نیز باشد. هدف از این مطالعه، الحاق توالی سیگنال پپتید pelB (توالی سیگنال پپتید pelB روی سکانس پلاسمید pET-22b تعبیه شده است) و بررسی بیان پروتئین نوترکیب هیرودین در اشرشیاکلی می‌باشد. مواد و روش‌ها: ترادف 66 آمینواسیدی واریانت HV3 ژن هیرودین تهیه و به داخل یک وکتور بیانی قوی (pET-22b) انتقال داده شد. برای تسهیل در تخلیص پروتئین از His-tag در ناحیه N-ترمینال ژن استفاده گردید. سیگنال پپتید pelB در ابتدای ژن با هدف ترشح به فضای پری پلاسمیک و محیط کشت درج شد و ساختار پلاسمیدی حاصله توسط سویه OrigamiB (DE3) باکتری E.coli بیان شد. در نهایت میزان بیان پروتئین تولیدی در ناحیه سیتوپلاسم، فضای پری پلاسمی و محیط کشت مقایسه گردید. یافته‌ها: نتایج به‌دست آمده نشان می‌دهد که مقدار پروتئین بیشتری در فضای پری پلاسمیک بیان شده و مقدار کمی پروتئین نیز به محیط کشت ترشح گردیده است. استنتاج: با به کارگرفتن وکتورهایی که قادر به انتقال پروتئین هدف به فضای پری پلاسمیک، که محیطی بسیار مطلوب برای شکل‌گیری باندهای دی سولفید و فلدینگ صحیح پروتئین هدف هستند، احتمال تشکیل اینکلوژن بادی‌ها کاهش یافته و تولید پروتئین‌های محلول و فعال افزایش می‌یابد.
واژه‌های کلیدی: سیگنال پپتید pelB، هیرودین، دسیرودین، ضد انعقادی، پری پلاسمیک
متن کامل [PDF 264 kb]   (4905 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي-کامل | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی
ارسال نظر درباره این مقاله : نام کاربری یا پست الکترونیک شما:
CAPTCHA
ارسال پیام به نویسنده مسئول

بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.

کلیه حقوق این وب سایت متعلق به مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران می باشد.

طراحی و برنامه نویسی : یکتاوب افزار شرق

© 2024 CC BY-NC 4.0 | Journal of Mazandaran University of Medical Sciences

Designed & Developed by : Yektaweb